Alcaloides Brugmancia

UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

FACULTAD DE CIENCIAS

DEPARTAMENTO DE FARMACIA

LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA

PROF: MARITZA ROJAS

LAURA TERESA QUINTERO E. COD: 124866

ESTEFANIA RIOS VARGAS COD: 124870

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Objetivos

* Llevar a cabo un procedimiento de extracción en el cual se logre el aislamiento de los alcaloides presentes en la planta de borrachero (Brugmancia spp).

* Determinar si Chromolaena leivensis contiene alcaloides mediante comparación con la muestra patrón tanto en pruebas de tubo con el uso de reactivos que dan precipitación para alcaloides, como en cromatografía en capa delgada.

Resultados

Tabla # 1. Resultados de pruebas de tubo

Planta | Ensayo | Descripcion del resultado | Resultado |

| Dragendorff | Precipitado de color naranja | Positivo |

BorracheroBrugmancia spp | Mayer | Precipitado de color crema | Positivo |

| Valser | Precipitado de color crema | Positivo |

| Reinekato | Solución blanca | Negativo |

| Dragendorff | Solución naranja | Negativo |

Chromolaena leivensis | Mayer | Solución amarillo traslucida | Negativo |

| Valser | Solución verde claro | Negativo |

| Reinekato | Solución verde claro | Negativo |

Análisis de resultados

Los alcaloides son sustancias mayoritariamente de origen natural y sobre todo de origen vegetal. Tienen ciertas características químicas muy específicas que les confieren propiedades fisiológicas y farmacológicas importantes. Son sustanciasorgánicas que por lo general cuentan con estructuras químicas con heterociclos nitrogenados derivados de aminoácidos y la mayoría de ellos son de carácter básico. Dicha basicidad fue aprovechada en la presente práctica para llevar a cabo la extracción de los alcaloides contenidos en las diferentes partes aéreas (hojas, flores y frutos) de la planta de borrachero, y para comprobar o descartar su presencia en la muestra problema que corresponde a Chromolaena leivensis.

En primera instancia se procedió a pesar 5 gr del material vegetal proveniente de las flores de borrachero y 1 gr del extracto de Chromolaena leivensis; a esta cantidad de material vegetal se le adicionaron 5 ml de NH4 OH concentrado y 50 ml de CHCl3 a la muestra de borrachero, y 20 ml a la muestra de Chromolaena leivensis. Al adicionar NH4OH a las muestras lo que se pretende, es hacer reaccionar a todos aquellos alcaloides que se encontraban en la muestra en forma de sales, para que de esa forma todos los alcaloides presentes en el material vegetal quedaran en forma de base libre, y que de esta manera, pudieran solubilizarse en el CHCl3 que es un solvente orgánico muy polar. Esta mezcla se agitó durante 15 minutos para favorecer la extracción de todos o la mayoría de alcaloides de las muestras. Seguidamente se llevó la mezcla que contenía borrachero a una filtración al vacío con el fin de lograr la máxima eficiencia de separación en esta mezcla que presentaba aún un contenido muy alto de material sólido, a diferencia de la mezcla con Chromolaena leivensis , que al estarse trabajando con un extracto de la misma, su contenido de sólidos era mucho menor, y por lo tanto no fue necesario que se llevara a cabo un filtración al vacío sino simplemente una filtración por gravedad.

Una vez filtrados los extractos, se procedió a trasvasar los filtrados a un embudo de decantación donde se les adicionó a cada una de las muestras, 10 ml de H2SO4 0,5 N. Este acido sulfúrico, al entrar en contacto con los grupos amino básicos de los alcaloides, lleva a cabo una reacción acido base que permite que todos los alcaloides queden en forma de sal y por lo tanto se solubilicen en la fase acuosa de la mezcla ahora contenida en el embudo de decantación. La fase orgánica en esta ocasión se localizó en la parte inferior del embudo dado que corresponde mayoritariamente a cloroformo que es un compuesto clorado y por lo tanto más denso que el agua. Esta fase orgánica fue separada de la acuosa y se le relizó otra extracción con acido sulfúrico idéntica a la anterior con el fin de extraer aquellos alcaloides que aún se encontraban en forma de base libre en esta fase. Una vez se obtuvo nuevamente la mezcla con dos fase en el embudo, se separaron de igual forma y se juntaron las dos porciones de la fase acuosa obtenidas en las dos extracciones. La fase orgánica resultante de dichas extracciones fue desechada dado que al obtenerse los alcaloides en forma de sales después de este procedimiento, la probabilidad de que estos se encontraran disueltos en la fase orgánica era prácticamente nula.

A continuación, antes de seguir con las extracciones de la fase acuosa, se procedió a hacer la prueba de Reineckato de amonio con 2 ml de esa fase acuosa, a los cuales se le llevó a sequedad en una estufa a 90ºC y se les agregó 1 ml de HCl con el fin de que se diera la reacción entre el alcaloide en forma de base libre y el acido pasando asi todos los alcaloides presentes en la muestra a su forma salina. Seguidamente fueron agregadas unas gotas del reactivo de Reineckato de amonio, que es básicamente una solución de clorhidrato de hidorxilamina. El fundamento de esta prueba consiste en la reacción del clorhidrato de hidroxilamina con alcaloides cuaternarios o en forma de N-oxidos en su forma salina dando lugar a la formación de un compuesto de alto peso molecular insoluble blanco que precipita. Se observaron en esta prueba resultados negativos para la muestra de borrachero al no obtenerse dicho precipitado color blanco, y en cambio se observó una solución blanca un poco turbia. Al obtenerse resultados negativos en esta prueba en necesario tener en cuenta que esto no significa que la muestra no contiene alcaloides, sino que no contiene alcaloides cuaternarios o N-oxidos, lo cual es lógico para borrachero cuyos alcaloides como escopolamina, hiosciamina y atropina no son alcaloides cuaternarios. Además en este punto de la prueba pueden darse falsos negativos enmascarados por otros compuestos que aun no han sido retirados en su totalidad del extracto. Por otro lado se observaron resultados negativos para la muestra de Chromolaena leivensis al obtenerse simplemente una solución con una coloración verde claro, lo cual es lógico, ya que según la bibliografía consultada, esta planta no contiene ningún tipo de alcaloides.

Se procedió seguidamente a agregársele al resto de la fase acuosa aproximadamente 2 ml de hidróxido de amonio hasta alcalinizar a un pH entre 7 y 8. En este paso del proceso fue preciso verificar con papel tornasol el pH de la solución para así asegurar que ocurriera la reacción deseada que era

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