Análisis de resultados El medio de cultivo

Análisis de resultados

El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de los microorganismos es por eso que la preparación del mismo es fundamental para el éxito del cultivo, en la práctica realizada se prepararon tres medios de cultivo.

• Medio 1: Agar nutritivo en base de extracto de carne  utilizado para propósitos generales, para el aislamiento de microorganismos poco exigentes en lo que se refiere a requerimientos nutritivos.
• Medio 2: Agar OGYE (agar extracto de levadura con glucosa y cloranfenicol) para cuenta y aislamiento de levaduras y mohos proporciona condiciones para el crecimiento de una amplia variedad de microorganismos, el cloranfenicol inhibe el crecimiento de la flora acompañante.
• Medio 3: Agar EMB (agar eosina azul de metileno) es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae. La diferenciación entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, está dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas.

En el método, previamente señalado en este informe se menciona que después de preparado el medio se debe esterilizar ¿para qué se hace esta esterilización del medio? Los medios de cultivo microbiológico deben estar en condiciones de esterilidad total antes de la siembra para ello se acude a la técnica por calor húmedo del autoclave, la muerte térmica de un microorganismo es el resultado de la inactivación de proteínas celulares esenciales o enzimas y hay alta correlación entre altas temperaturas y la inactivación celular o proteica.

El calor húmedo es el preferido porque su acción letal es más rápida por ej. a 80ºC 5 a 10 minutos se destruyen las formas vegetativas de bacterias y hongos. Para esporas de Cl.botulinium 121ºC 4 minutos, Bacilus estearothermophilus 121ºC 12 minutos. En la práctica se autoclavo el medio a una temperatura de 121° con 15 libras de presión, a continuación se muestra el diagrama de fase que relaciona la temperatura con la presión del vapor de agua en la autoclave.

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La línea indica el equilibrio de las dos fases. (Agua y vapor) Hay tanta agua que pasa a vapor, como vapor que vuelve a agua. El vapor esta sobresaturado de agua

Con los tres medios servidos y almacenados se dio de baja a una caja de Petri de cada tipo de agar, para aplicar la prueba de esterilidad que no es más que un modelo de desarrollo observado para cada medio con un tiempo estipulado de crecimiento bacteriano o micotico, para agares nutritivos y EMB se encuba el medio de 18 a 24 horas a una temperatura constante de 37° y para agar OGYE 4 días a temperatura ambiente.

Revisados los medios encubados se observó macroscópica y microscópica,  medios de cultivo libres de crecimientos bacterianos y micoticos dando lugar a una práctica libre de errores sistemáticos en el proceso. En conclusión los medios preparados y almacenados son viables para siembra de microorganismos.

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