Apuntes virologia

Apuntes virología

MORFOLOGÍA.
 
 1.- El tamaño de losvirus varín mucho, desde 15 a 30 nm, los más pequeños y de 250 a 300 nm, los más grandes. La forma de medirlos, fué mediante filtros, con diferente tamaño de poro, en la actualidad se ha logrado mejorar solo un poco la técnica.
  En la actualidad se cuenta con el microtomo, que es un instrumento, que sirve para cortar
secciones extremadamente delgadas, que son útiles en el estudio de las diferentes etapas de desarrollo de los virus, dentro de las células. El método que utiliza el ácido fosfotúngstico, mezclado con el virus, es más exacto. Éste écido es más denso que el virus  a los rayos de electrones y entonces es posible la observación en contraste negativo. Con ésta técnica se mide el tamaño e las partículas virales, así como el detalle de su estructura.
 
Las primeras observaciones realizadas, permitieron distinguir en los virus tres formas fundamentales: más o menos esférica, alargadas y en forma de renacuajo
  En 1956 Crick y Watson, encontraron que los átomos de un cristal de virus, tiene una simetría espacial, cúbica, debido a la observación que hicieron por difracción de rayos X, que hicieron.
 
  En la actualidadse ha determinado que los virus tienen básicamente simetría cúbica, helicoidal o una combinación de ambas, aunque existen virus que carecen de simetría, y a estos se les considera complejos.
Los virus de simetría cúbica, son icosaedros, como los adenovirus o los herpesvirus; tienen una membrana o peplos, que rodea la cápside. La partícula viral adquiere esta envoltura, al atravesar la membrana citoplásmica o la membrana nuclear, de la célula, durante el proceso de maduración. Aquí, dejen un espacio para un dibujo o esquema por favor. Ésos se los doy en la clase. CONTINUARÁ.....

2.- Entre los virus de simetría helicoidal, se encuentran principalmente los que infectan a las plantas. El mejor ejemplo es el virus del mosaico del tabaco que ha podido aislarse en grandes cantidades de las plantas infectadas y por que el extracto que se obtiene, contiene poco material extraño. Además de ser el primero que se cristalizó y que se estudió por difracción de rayos X. Se observó que este virus es de forma alargada, de 300milimicras de largo x 18 o 19 milimicras de diámetro y tiene una parte central, hueca, en toda su longitud y está compuesta por 2130 subunidades, idénticas, de una sola molécula de proteína y están dispuestas de forma helicoidal. Tiene una sola molécula de ARN, de una sola cadena enrrollada de forma helicoidal, alrededor de un hueco axial.
DEJEN ESPACIO PARA LA FIGURA.
 
Otro ejemplo son los mixovirus, también de simetría helicoidal, aunque en algunas micrografías se puede observar como si fuera  esférico porque la estructura se enrrolla formando una esfera y está recubierta por una membrana que se puede romper con facilidad.
  Entre otros virus de simetría compleja entán los poxvirus  que presentan una banda (de proteína?) que enrrolla al centro del virus. Toman formas diferentes y su simetría no está definida (virus complejos). Su ADN es de doble cadena.
  A este grupo pertenecen también los de la estomatitis vesicular y los bacteriófagos T pares (que tienen forma de renacuajo) que tienen una cabeza grande y una cola. La cabeza es casi hexagonal que está formada por una gran cantidad de subunidades protéicas, que encierran el ADN. Hay fagos que tienen ARN. La cola le sirve para unirse a los receptores de la pared celular de las bacterias suceptibles. Esta cola es la que inyecta al ADN de la cabeza del fago, dentro de la célula bacteriana.
  Son los virus que se conocen mejor; fueron descubiertos por Twort en 1915 y redescubiertos por d´Herelle, quien les dio el nombre de bacteriófagos. Se encuentran en abundancia , en aguas negras, superficiales contaminadas, heces, etc, y también en muchas bacterias, en las que existen en estado de latencia.
  La acción de los  bacteriófagos es lisar o destruir las bacterias.
 
DEJEN OTRO ESPACIO PARA LA FIGURA
 
CONTINUARÁ...

3.- Métodos físicos y químicos para el estudio delos virus.
 
 En 1898 Loeffler y Frosch, demostraron que la glosopeda del ganado, podía ser transmitida por un material que había pasado por filtros con poro muy pequeño, para admitir el paso de las bacterias; al grupo de organismos  se les llamó "ultramicroscópicos"  ya que todos, excepto los poxvirus  de 200 nm= 200 milimicrones=2000 Angstroms. Con la llegada del microscopio electrónico, fue posible estudiar la morfología de los virus en forma más apropiada. Se supo que varían de tamaño, desde los poxvirus (300x250x100nm), descendiendo hasta los papovavirus de20 nm de diámetro.
  En 1959 Brenner y Horne aplicaron la tinción negativa, a la microscopía electrónica de los virus. El fosfotungstato de potasio, que es más denso, llena los espacios de la superficie viral, dando como resultado una micrografía electrónica con un grado de detalle fino, imposible de obtener anteriormente, cuando la técnica de difracción de los rayos X habían proporcionado evidencia, de la composición y colocación de la envoltura viral, ésta técnica, confirmó este hallazgo.
 
ESTRUCTURA VIRAL.
  En los virus más simples, la partícula viral madura, el virión consiste en una molécula única de ácido nucleico, rodeada por una cubierta proteica, la cápside ; ésta, junto con su núcleo encerrado de ácido nucleico, constituye la nucleocápside. En algunos de los virus más complejos, la cápside rodea un centro proteico. El ácido nucleico viral, no es simplemente un relleno dentro del virión, sino que tiene probablemente, relación con los polipéptidos dela cápside o del centro. La cápside está compuesta por una gran número de capsómeros que están unidos por uniones no covalentes y se ven en el microscopio electrónico.  DEJEN ESPACIO PARA EL DIBUJO
 
 
 Las cápsides están compuestas de unidades repetidas de un polipéptido o de un pequeño número de diferentes clases de polipéptidos. Para poder formar una cubierta completa que proteja al ácido nucleico viral de las nucleasas, las moléculas de este polipéptido, se colocan simétricamente, y únicamente se han reconocido dos clases de simetría en las cápsides: la icosaédrica  y la helicoidal.
Simetría icosaédrica.- es uno delos "sólidos platónicos" de la geometría, tiene 12 vértices y 20 caras, cada una es un triángulo equilátero. Varias clases de viriones icosaédrricos, contienen una cubierta proteica adicional, en los reovirus esta "cápside interna"
también es icosaédrica. En los adenovirus, los poxvirus y quizá los herpesvirus, no se ha encontrado que la proteína interna que contiene un "centro" de ADN tenga estructura icosaédrica definida. DEJEN ESPACIO
 
 
Simetría helicoidal (espiral).- Las nucleocápsides de ciertos ribovirus, muestran un tipo diferente de simetría: los capsómeros y la molécula del ácido nucleico están enrollados juntos en una hélice o espiral (virus del mosaico del tabaco).
  Los virus de plantas en forma de bastones, consisten únicamente de la nucleocápside desnuda.
  En los virus de los vertebrados ésta nucleocápside tubular está enrollada en forma de hélice y rodeada por una envoltura de lipoproteína débilmente ajustada. La envoltura generalmente consiste de una "membrana proteica" interna que es especificada por el virus y un complejo lipoproteico externo, que se deriva directamente de la membrana citoplásmica celular, durante la liberación de la nucleocápside de la célula infectada por un proceso de "brote".  La proteína celular en la membrana, puede llegar a ser reemplazada, por subunidades proteicas, glucoproteicas, especificadas por el virus, llamadas peplómeros (peplos= envoltura).Estos peplómeros se ven claramente en micrografías electrónicas como "puntas" que se proyectan de la envoltura.
  Las envolturas no están restringidas a los virus de simetría helicoidal; algunos virus icosaédricos, las tienen también, comolos rabdovirus, en los que la envoltura está bien aplicada a la cubierta en forma de bala, que encierra una nucleocápside tubular, con simetría helicoidal.
 
LA COMPO SICIÓN QUÍMICA DE LOS VIRUS
MÉTODOS DE PURIFICACIÓN DE LOS VIRUS
  Un factor muy importante en el análisis químico de los virus, es contar con los métodos adecuados de purificación de partículas virales. Se crean problemas especiales por la íntima asociación de los virus con las células q están parasitando. No es fácil liberar  virus, de los restos de las células asociadas o de las proteínas virales sintetizadas en exceso, en la célula infectada. Además, la infectividad de los viriones es muy sensible a la inactivación por el calor, el ácido, el álcali, y algunas veces a los solventes de los lípidos o al choque osmótico. En la purificación de los virus, estos se mantienen a un pH neutro y a 4°C.
Liberación del virus de las células.-  El primer paso en el proceso de purificación, consiste en liberar al virus de las células en que han crecido. El líquido sobrenadante que baña un cultivo celular infectado, proporciona la fuente de viriones más limpia, para comenzar, pero algunos virus deben liberarse de las células, por métodos, tales como vibración sónica, homogeneización o congelación-descongelación repetida.
 
Métodos químicos de purificación.- La superficie del virión, está formado de proteína, algunas veces junto con lípidos asociados. De acuerdo con esto, los métodos químicos de purificación de virus, deben evitar las condiciones que conduzcan a la desnaturalización de las proteínas. Los virus pueden precipitarse, con sulfato de amonio o alcohol, o pueden ser adsorbidos por columnas que contienen celulosa, otros, como fosfato de calcio, gel de hidróxido de aluminio, resinas de intercambio iónico, eritrocitos, haciendo la elución con amortiguadores de diferente pH y fuerza iónica o a diferente temperatura. Los virus que no tienen envoltura, pueden separarse de los lípidos y de las proteínas solubles, por su partición o separación en la fase acuosa de una emulsión de fluorocarbonato acuoso. CONTINUARÁ.....

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