Bio Celular 1

Introducción

La Microscopia es el conjunto de métodos y técnicas utilizados para observar y estudiar objetos que debido a su pequeño tamaño están fuera del rango del ojo normal.

Un elemento primordial dentro de la microscopía, son los microscopios pieza clave para el desarrollo de esta ciencia. Generalmente los más utilizados son los microscopios ópticos y los microscopios electrónicos ambos nos permiten ver objetos a una escala microscópica, pero no funcionan de igual manera y tampoco a los mismos rangos de resolución.

El microscopio óptico está basado en un sistema de lentes ópticos que con la ayuda de una luz de fotones permite atravesar la muestra y los lentes generando una imagen mucho mayor a la de la muestra original, pero este tipo de microscopios solo se utilizan para visualizar organismos entre los 0.1-1µm. mientras que el microscopio electrónico emplea electrones en vez de fotones, lo que permite generar mayores aumentos dado que los electrones son de menor longitud de onda que los fotones, el microscopio electrónico tiene un poder de resolución de hasta 4 Å.

El poder de resolución de los microscopios es esencial para determinar las estructuras observables en la muestra, de esto depende lo que encontraremos o será claramente visible.

Las células en su mayoría están a escala microscópica por lo tanto es indispensable el uso de un microscopio que nos permita llegar a esa escala de resolución para así lograr observar primeramente las células, su estructura, organización y funcionamiento en cada estructura a estudiar.

Objetivos

.- Aprender la correcta utilización y el uso del microscopio Óptico

.- Determinación del campo visual del objetivo

.- Determinación del tamaño celular

.- Observación y distinción de estructuras en muestras biológicas permanentes y biológicas frescas (con y sin Tinción)

Materiales y métodos

En el laboratorio realizado, se utilizaron diversos materiales para llevar a cabo la experimentación deseada, materiales de los cuales se va hacer mención durante la descripción de la metodología utilizada en la realización de los diferentes experimentos.

Se comenzó preparando el microscopio para la observación de las muestras dadas, bajando la platina hasta su nivel máximo y dejando el objetivo de 4x. La primera preparación fue una letra “e” impresa con tinta sobre un papel, la cual se colocó en la platina y se movió el revólver hasta el objetivo de 10x, al estar en esa posición se utilizó el tornillo macrometrico para ajustarlo a la resolución más cercana, al tenerla se utilizó el tornillo micrométrico para tener una nitidez aún mejor y ver la muestra con mayor exactitud y resolución. Se comparó la posición de la letra en el porta objetos y a través del ocular del microscopio, se anotaron las diferencias observadas y se procedió a cambiar el objetivo a 40x repitiendo el mismo proceso de observación.

En el siguiente experimento, se mojó un portaobjetos con agua destilada y se colocó un papel milimetrado de 1cm2 para luego ser observado en el microscopio con el objetivo de 4x y así calcular el campo visual contando los cuadrados que puede ser posible ver en la muestra, y así sucesivamente con los lentes de 10x y 40x.

Después se nos fueron entregadas las muestras permanentes, frotis de sangre humana, intestino delgado de rata e hígado, respectivamente. Cada una de estas fue observada con el lente objetivo de 40x y se anotaron las estructuras apreciadas en cada muestra, para luego ser descritas en un informe posterior.

Luego de eso se nos facilitaron preparaciones frescas con/sin tinción, catafilo de cebolla, elodea y protozoos (euglema y paramecio). Del catafilo de cebolla y elodea se sacaron tejidos y fueron puestos en un portaobjetos con una gota de agua y luego cubiertos con el cubreobjetos, en el caso de la cebolla, este proceso se repitió tres veces, ya que se realizaron dos muestras con tinción y una sin tinción, en el caso de las muestras con tinción se le adicionó azul de metileno a una y lugol a la otra, que posteriormente fueron observadas con el lente objetivo de 10x (incluyendo la muestra sin tinción). Las muestras restantes (elodea y protozoos) fueron observadas en el microscopio con el lente objetivo de 40x. Junto con cada muestra y análisis fueron anotadas las descripciones y observaciones de cada preparación.

Resultados

Experimento 1- Letra “e”

Aumento total: 100x

Tipo de muestra: Permanente

Descripción: En primera instancia se logra observar la letra “e” rotada en 180° producto del sistema óptico del microscopio. También observamos algunos filamentos irregulares de tinta del relleno que forman la letra “e”. Al igual que la tonalidad marrón de las fibras de celulosa que se ven del papel

Experimento 2- Hoja milimetrada

(determinación del campo visual)

Aumento total: 100x

Tipo de muestra: permanente

Tinción: N.A

Descripción: al observar con el objetivo de 10x se logró ver y contabilizar el número de

Cuadrados de 1mm encontrados. También se aprecia nuevamente la pigmentación irregular de las líneas verdes y la tonalidad marrón de las fibras del papel.

Formula: DCV= (DCV.Obj 4X * Aumento Obj.4X)/ Aumento Obj. “x”

Objetivo 4x = 12mm2 12000µm

Objetivo 10x= 2mm2 2000 µm

Objetivo 40x =no visibles 1200 µm

Experimento 3 - hígado

Aumento total: 400x

Tipo de muestra: permanente

Tinción: hematoxilina eosina

Descripción: logramos observar un tejido conectivo color rosado, se ven espacios en blancos que son estructuras vasculares y acumulaciones de color rosado compuestas de pequeñas celdas, que son células, con el núcleo de color más rosado-morado. En algunos casos podemos ver células binucleadas.

Experimento 4 – Frotis sanguíneo

Aumento total: 400x

Tipo de muestra: permanente

Tinción: May-grumwal Giensa

Descripción: La zona ideal de observación con el microscopio óptico fue

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