Bioquimica

Cuestionario

1. Menciona cuatro usos que se les puede dar a las proteínas purificadas

2. Dentro de la guía para purificar a una proteína se plantea que es importante

establecer cuál va a ser el uso final de la proteína purificada. Explica por qué.

3. ¿Qué propiedades de la lactato deshidrogenasa se aprovecharán en cada paso de su

purificación? (Ejemplos: carga, peso, solubilidad y unión a ligandos)

4. ¿Por qué es importante mantener la mezcla de proteínas a 4C?

5. Investiga cuáles son las propiedades de la lactato deshidrogenasa de pollo (lactate

dehydrogenase from Gallus gallus), como la localización subcelular, su secuencia

primaria de aminoácidos, su pI (punto isoeléctrico), la actividad enzimática que

cataliza, peso molecular, estructura terciaria y/o cuaternaria.

6. De acuerdo con la reacción que cataliza y su función en el organismo, ¿por qué crees

que se seleccionó el músculo esquelético de pollo para aislar la lactato

deshidrogenasa?

7. De acuerdo con el pI de la lactato deshidrogenasa que encontraste predice ¿cuál será

su carga eléctrica positiva o negativa? cuando la proteína se encuentre en un

amortiguador de fosfatos pH 7.0, y cuando se encuentre en un amortiguador a pH 8.6

¿Qué tipo de columna y eluyente recomiendas para su purificación y porqué?

8. Existen varios métodos en la literatura para purificar a la lactato deshidrogenasa, ¿por

qué existe esa variedad si todos purifican a la misma proteína?

9. Menciona al menos dos proteínas que tienen actualmente un uso farmacéutico o

médico y cuál es la fuente biológica de la que se obtienen.

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