COMO SE DA EL CUESTIONARIO CROMATOGRAFÍA PARTE l

CUESTIONARIO CROMATOGRAFÍA PARTE l

1. ¿Qué ocurre si al introducir la placa en la cámara cromatográfica, el nivel del eluyente alcanza el sitio de aplicación de la muestra?. R/: Si el nivel del eluyente está por encima de la muestra, no se llevará a cabo una separación por cromatografía puesto que el eluyente disolverá la muestra.
2. ¿Cuál es el efecto de la polaridad en la cromatografía?. R/: La polaridad tiene un papel muy importante en la cromatografía de capa fina, básicamente la polaridad nos dice que tan fácil se puede arrastrar una sustancia,  debido a que este tipo de cromatografía funciona mediante un mecanismo de adsorción-desorción, entre mayor polar sea la sustancia será más fácil que se adsorba en la fase móvil y por ende será separada con mayor facilidad.
3. ¿Cuáles son las consecuencias de una columna mal empacada?. R/: Una columna mal empacada podría arrojar resultados erróneos debido a que el tamaño de la partícula y la distribución del tamaño de la partícula son las principales características para los materiales del relleno de columnas y de ello depende directamente la retención y el volumen de elución al que aparecerán los solutos
4. ¿Cuáles son las diferencias entre cromatografía líquida y de gases?. R/: La diferencia radica en que para implementar la cromatografía líquida la fase móvil es un líquido, mientras que para llevar a cabo la cromatografía de gases, la fase móvil es un gas. Además la cromatografía líquida puede efectuarse en una columna o sobre un plano, mientras que la de gases siempre se realiza en una columna.
5. Profundización sobre fluorescencia para sustancias incoloras. R/: Sí las sustancias sometidas a cromatografía no son coloreadas se emplean métodos especiales. Generalmente se emplea una lámpara UV, se basa en el hecho de que muchas sustancias que son incoloras a la luz ordinaria presentan una fuerte fluorescencia a la luz ultravioleta. Por ejemplo, un reactivo con el que los compuestos adsorbidos formen cierta coloración puede servir como revelador.
6. Parámetros de la cromatografía líquida de alta eficiencia. R/: En la cromatografía líquida, la fase móvil es un líquido que fluye a través de una columna que contiene a la fase fija. La separación cromatográfica en HPLC es el resultado de las interacciones específicas entre las moléculas de la muestra en ambas fases, móvil y estacionaria. A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidos de alto rendimiento (HPLC, de high-performance liquid chromatography) no está limitada por la volatilidad o la estabilidad térmica de la muestra. La HPLC es capaz de separar macromoléculas y especies iónicas, productos naturales lábiles, materiales poliméricos y una gran variedad de otros grupos polifuncionales de alto peso molecular. Con una fase móvil líquida interactiva, otro parámetro se encuentra disponible para la selectividad, en adición a una fase estacionaria activa. La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo que permite una mayor gama de estas interacciones selectivas y más posibilidades para la separación.
7. En qué orden (de arriba hacia abajo) se puede esperar encontrar los siguientes compuestos: Naftaleno, ácido butírico y acetato de fenilo en un gel de placa de TLC de sílice desarrollada con diclorometano. Orden de aparición de: naftaleno, ácido butírico y acetato de etilo. Según la tabla presentada en los anexos, teniendo en cuenta la fuerza de elución de la fase móvil y la actividad de la fase estacionaria, el orden de aparición de los compuestos mencionados anteriormente (de arriba a abajo) sería el siguiente:

               -ácido butírico.

              -acetato de fenilo (ester).

              -naftaleno (hidrocarburo aromático).

1. ¿Qué efecto se produce si se siembra mucha muestra en la cromatoplaca?. Si la muestra queda demasiado concentrada, cuando la fase móvil comience a arrastrar la muestra esta toma la forma de una estela, lo que dificulta la lectura de longitud.
2. Si se observa un Rf de 0.62, ¿esto prueba que tiene un solo componente?. Para determinar con mayor exactitud se debe comparar con sustancias patrones(en caso de conocer posibles sustancias), observando el recorrido de estas y comparando con la muestra, también se deben hacer ensayos con diferentes fases móviles con el fin de determinar que aparezca un solo color o si por el contrario aparece mas de uno, en este caso no habría una sola sustancia. En conclusión no basta con tener un Rf de 0,62 para determinar que solo exista una sustancia, puede que la fase móvil sea muy fuerte y arrastre casi toda la muestra hasta un punto.
3. De qué manera influye la saturación de la cámara en el proceso de separación. Con esto se garantiza que cuando la fase móvil se esté moviendo por la cromatoplaca no se seque y no se desplace adecuadamente.

 Anexo:[pic 1]

CUESTIONARIO CROMATOGRAFÍA PARTE 2

l. Un colorante desconocido se piensa que puede ser azul de metileno, ¿Cómo se podría comprobar esta suposición utilizando un procedimiento basado en una técnica cromatográfica?.R/: Por medio de la separación de las diferentes fases además de utilizar los disolventes que sean los más adecuados para disolver este colorante por medio de cromatografía en capa fina identificando el número de fases correspondiente al azul de metileno y si éstas fases corren igual al ser comparadas con un testigo de azul de metileno, podría tratarse de la misma sustancia.

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