CROMATOGRAFIA EN PAPEL

INTRODUCCIÓN

Los métodos más usados en la separación de moléculas son la ultracentrifugación, la electroforesis y la cromatografía (Cardella-Hernandez, n.d.). Esta técnica incluye una serie de métodos analíticos de separación que tienen como característica general el de estar constituidos por una fase estacionaria y una fase móvil, entre las que se distribuyen diferencialmente las sustancias a separar. Cuando la fase móvil, la que arrastra a las partículas que se van a separar, es un liquido (solvente o mezcla de solventes) se denomina cromatografía de líquidos. Si la fase móvil es un gas se denomina cromatografía de gases (Gonzales et al, 2008).

La cromatografía en papel (cromatografía en la que la fase estacionaria es papel), es una técnica en la que se aplica un pequeño volumen de la muestra cerca de uno de los extremos de una hoja de papel filtro. Este tipo de cromatografía puede ser ascendente, en la que el papel se sujeta a la parte superior de la cámara y se sumerge en el solvente, que se encuentra en el fondo, entonces el solvente se mueve hacia arriba por capilaridad. Al realizarse la separación, los solutos de la mezcla original migran a lo largo del papel con diferentes velocidades, dependiendo de la solubilidad en el solvente. La relación de migración de una sustancia (Rf) puede expresarse de acuerdo con la siguiente fórmula (Gonzales et al, 2008):

Rf=(distancia recorrida por la muestra)/(distancia recorrida por la mezcla eluyente)

La cromatografía es una técnica que permite la separación de moléculas pequeñas como lípidos, nucleótidos, vitaminas, fármacos y aminoácidos; debido a que cada sustancia exhibe un valor Rf particular, es posible separar aminoácidos y péptidos, ya que estos presentan características particulares, de solubilidad, polaridad y tamaño, por la composición química de sus grupos R (Koolman & Roehm, 2005).

OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia de un edulcorante artificial en una muestra problema mediante su Rf, y ver sus propiedades de solubilizacion comparándolo con los Rf de los aminoácidos que los componen.

OBJETIVOS PARTICULARES

Separar aminoácidos y péptidos mediante el uso de la cromatografía en papel.

Determinar el corrimiento cromatográfico de un aminoácido polar y uno no polar, comparando el Rf de cada uno de ellos.

Separar e identificar, por medio de la cromatografía en papel, el aspartame presente en un refresco dietético, comparando su Rfcon el del Canderel.

HIPÓTESIS

Si se utiliza la técnica de cromatografía es posible separar las sustancias en sus componentes esenciales.

MATERIAL Y MÉTODO

Primero, se recortó un rectángulo de papel de whatman con medidas de 20x9cm con guantes de látex puestos para no contaminarlo. Enseguida se coloco encima de un pliego de cartulina para su fácil manipulación.

Después,

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