CROMATOGRAFÍA: AISLAMIENTO, PURIFICACÍON E IDENTIFICACIÓN DE CLOROFILA Y CAROTENOS DE LAS HOJAS DE ESPINACA

CROMATOGRAFÍA: AISLAMIENTO, PURIFICACÍON E IDENTIFICACIÓN DE CLOROFILA

Y CAROTENOS DE LAS HOJAS DE ESPINACA

Holy James Mina Olaya1, Jose Hernandez2

1,2Quimica farmaceutica, Facultad de ciencias naturales, Universidad Icesi, dirección de la facultad, Cali  Colombia

Recibido: 04 de abril de 2017

RESUMEN

En esta práctica de laboratorio se empleó la técnica de cromatografía para la purficación e identificación de cada uno de los componentes principales de un extracto de espinaca, empleando silica gel como fase estacionaria y varias mezclas de elución a diferentes proporciones de hexano:acetona. La identificaciòn de dichos componentes se hizo por medio de la cromatografìa de capa fina teniendo en cuenta el desplazamiento que cada componenete presentaba con respecto al frente del eluyente, el cual consistía en una mezcla 70:30, para asi determinar sus factores de retención (Rf)

Palabras claves: Cromatografía, silica gel, factor de retención, polaridad, adsorción, absorción

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INTRODUCCIÓN

La cromatografia se define como un método físico de separación en el que los componentes a separar se disribuyen entre dos fases, una  estacionaria, y otra móvil. El proceso de separación de cada sustancia se da como resultado de repetidos procesos de adsorción-desorción durante el movimiento de los componentes de la mezcla arrastrados por la fase móvil a lo largo de la fase estacionaria, produciéndose la separación debido a las diferencias en las constantes de distribución de los componentes de la mezca entre la fase estacionaria y la fase móvil.

La fuerza en la que es adsorbido un componente depende de su polaridad, de la actividad del adsorbente y también de la polaridad de la fase móvil. En general, entre más polar es un compuesto más facilmente será adsorbido. Éste tipo de cromatografía está

particularmente bien adaptada para la separación de compuestos de polaridad baja y media.

En esta practica se procedera a purificar e identificar  cada uno de los componentes principales de un extracto de espinaca empleando la cromatografia en columna (CC) para su separación y la cromatografia en capa fina (CCF)  para su identificación.

DATOS, CALCULOS Y RESULTADOS

Para la identificación de cada uno de los componentes obtenidos en la cromatografia en columna, se procedió a determinar los factores de retención (Rf) de cada uno de ellos por medio de la cromatografia en capa delgada que se obtuvo (imagen 1) empleando la siguiente ecucacion:

[pic 1]

En la tabla 1 se reportan las distancias recorridas por cada uno de los compuestos y el valor obtenido de su Rf

Tabla 1. Distancias recorridas por cada uno de los compuestos, el valor obtenido en su Rf y el pigmento mostrado en placa de capa fina

Tabla 2. Estructura de compuestos y momentos de polares (Fuerzas de Debyes huckel)

Imagen 1. Placa cromatografica realizada en el laboratorio

[pic 4]

Imagen 2. Grafico de representación de Rf’s en la placa cromatografica, con el valor de factor de retención y pigmento mostrado

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