Cambio En Concentracion De Enzima

introducción

La cantidad de enzimas presentes en un fluido biológico es muy difícil de determinar en valores absolutos, mg. o moles, una forma de resolver este problema es midiendo la velocidad de reacción catalizada por la misma empleando un sustrato específico. La velocidad de reacción puede expresarse como la cantidad de reactivo que se transforman en producto por unidad de tiempo. De allí que la unidad internacional (UI) de cualquier enzima se define como la cantidad de la misma que cataliza la transformación de un mol de sustrato por minuto, bajo condiciones definidas: pH, temperatura, concentración de sustrato/s y cofactores, etc.

En base a lo que se acaba de explicar es posible expresar la cantidad de una enzima en un fluido biológico en UI/cm3 o en UI/ mg. de proteína total. Esta última expresión denominada actividad específica es la cantidad de moles de sustrato transformados por minuto y por mg. de proteína, debiéndose indicar la temperatura, el pH, etc.

Es importante recordar que la actividad específica de una enzima es una medida indirecta de la fracción de la proteína total en una preparación que contienen a la enzima. [1]

Objetivo

Observar el efecto que se tiene el aumento de la cantidad de enzima en la velocidad de reacción

Resultados

1 2 3 4 5

Absorbencia 0.178 0.242 0.388 0.661 0.741

Azúcar reductor (µmoles)/2mL 2.118 2.771 4.261 7.046 7.863

Velocidad (unidades de invertasa) 0.211 0.277 0.4261 0.704 0.786

Concentración de enzima (µg/2mL) 0.5 1 1.5 2 2.5

Cálculos

Velocidad:

Vo= ([Ar]µmoles)/10 [=] UI

Concentración del enzima:

Enzima 10µg/mL

[E]=((10µg)/ml)(volumen de enzima (mL)((1mL de solucion)/(2mL de solución))

[E]=((10µg)/ml)(0.1(mL)((1mL de solucion)/(2mL de solución))=0.5

[E]=((10µg)/ml)(0.2 (mL)((1mL de solucion)/(2mL de solución))=1

[E]=((10µg)/ml)(0.3 (mL)((1mL de solucion)/(2mL de solución))=1.5

[E]=((10µg)/ml)(0.4 (mL)((1mL de solucion)/(2mL de solución))=2

[E]=((10µg)/ml)(0.5 (mL)((1mL de solucion)/(2mL de solución))=2.5

Discusión de resultados

El cambio de concentraciones de la enzima nos ayuda saber la concentración necesaria de enzima para que reaccione todo el sustrato pero antes de llegar a ese momento la velocidad de reacción aumenta directamente proporcional por que se tiene una cantidad fija de sustrato y cierta parte reaccionara con la cantidad de enzima que se le adiciono, con cada aumento de concentración de enzima actúa con más cantidad de sustrato hasta llegar al punto máximo donde la enzima y el sustrato interactúan completamente en concentraciones llegando así a una velocidad máxima y después de esta se estima que la velocidad se mantenga contante por que la cantidad de sustrato es como un reactivo

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