Cromatografia Emplear la cromatografía

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bjetivos: Emplear la cromatografía, como un método para separar los compuestos presentes en una mezcla; así mismo, utilizar a esta para la purificación y posible identificación de los mismos.

Define los siguientes términos:

1. Cromatografía: Es un método sencillo pero confiable para separar una mezcla en sus sustancias constituyentes. El término cromatografía (Del griego Chroma=color y Graphos=escritura), aunque implica color, ha sido utilizado indistintamente para el proceso en donde se emplean materias coloridas e incoloras.
2. Fase móvil: Puede ser un líquido o un gas, y su función es transportar a los componentes de la mezcla a través del sistema cromatográfico.
3. Fase estacionaria: Consiste en partículas generalmente sólidas pequeñas y con una superficie microporosa de forma que representa un amplio desarrollo superficial. Puede estar empaquetada en forma de columna o extendida en forma de capa. En ocasiones es necesario un tratamiento químico en la fase estacionaria para conseguir unas partículas de tamaño y poro adecuado. En la CCF la fase estacionaria es una capa uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio u otro soporte.
4. Revelador: Son métodos visuales para la localización de sustancias coloridas e incoloras y por consiguiente invisibles

Realiza una tabla que describa las características de compuestos que pueden ser empleados como fase móvil o fase estacionaria, así como ejemplos de sustancias químicas que pueden utilizarse, como fase móvil y fase estacionaria:

Métodos cromatográficos:

¿Cómo preparar una placa fina para cromatografía en capa fina?:

Se trata de una cromatografía de adsorción y consiste en recubrir una placa, usualmente de vidrio, con una capa uniforme de una suspensión de un adsorbente adecuado en polvo (fase estacionaria), se coloca cerca del origen de la placa una muestra de disolución del compuesto orgánico (o mezcla) en estudio, se deja que un disolvente adecuado (fase móvil) ascienda por la capa del adsorbente por capilaridad y el compuesto se localiza en la placa, directamente en el caso de los compuestos coloridos o con ayuda de un revelador cuando los compuestos son incoloros. Los compuestos ascienden con velocidades distintas por la capa de adsorbente en relación al eluyente, ocasionando la separación de los componentes de una mezcla.

¿Cómo se prepara una columna?:

La columna de cromatografía está constituida por un tubo de vidrio en posición vertical en el cual, por la parte baja, se colectarán las diferentes fracciones. En el fondo del tubo se introduce un pequeño trozo de algodón que cumple la función de un filtro que impide que el gel de sílice salga. Una vez colocado el algodón, se coloca una fina capa de arena, la cual no permite que el algodón se mueva de su posición. Posteriormente, por la parte superior, se introduce el adsorbente, el cual ha visto previamente suspendido en el disolvente seleccionado para la separación con el objeto de eliminar las burbujas que se encuentran en las partículas de adsorbente. Existen otros tipos de empacados, el empacado por vía seca consiste en introducir el adsorbente y posteriormente el eluyente seleccionado.

La cantidad requerida de fase estacionaria se determina de acuerdo a la cantidad de muestra a separar. Una regla común es usar de 30 a 100 veces el peso de la muestra a separar de adsorbente. Las dimensiones de la columna se diseñan según las características de la muestra a separar, siendo por lo general una relación de 10:1  de largo de la columna por el radio de ésta.

Una vez que se ha preparado la columna, la muestra a separar se disuelve en la mínima cantidad de disolvente y se aplica por la parte superior de la columna, las diferentes fracciones separadas. El grado de elución de los diferentes compuestos separados depende del grado de polaridad de cada uno de ellos.

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