Cultivo de tejidos vegetales por callogenesis

ESTABLECIMIENTO DE UN CULTIVO DE CALLOS DE Agave americana L. EN MEDIO MS ADICIONADO CON 2 mg/L DE BAP

Camas Regalado, José Eduardo; Fonseca Castro, Héctor Efraín; Ruiz Nucamendi, Edgar Fabian.

Instituto Tecnológico de Tuxtla Gutiérrez, Carretera Panamericana km. 1080. Tuxtla Gutiérrez, Chiapas

Resumen. Se realizó la propagación in vitro de la especie vegetal Agave americana L. en medio MS adicionando como inductor de callos, el regulador de crecimiento BAP a una concentración de 2mg/L. Después de 8 semanas de incubación y monitoreo, no se presentó respuesta en la formación de callos embriogénicos en ninguno de los 9 cultivos establecidos. Reportes indican que a menores concentraciones se obtienen mejores resultados y también utilizando como inductor de callogenesis a la auxina 2,4-D.

Palabras clave: Bencilaminopurina, callogénesis, embriogénesis somática.

Introducción.

La propagación de plantas es una ocupación básica de la humanidad y está dada en gran parte sobre la habilidad del hombre para propagar y cultivar clases específicas de estas que puedan ser usadas para proporcionarle protección, alimento, vestido, recreación y satisfacciones estéticas.1 Una planta de gran importancia, tanto económica como ecológica es el agave, que históricamente ha tenido un papel fundamental en el desarrollo de las comunidades ubicadas en las zonas áridas y semiáridas. Desde tiempos anteriores a la conquista y hasta nuestros días, el agave ha sido considerado “el árbol de las maravillas”, debido a los diferentes usos que se les puede dar. Las partes más comúnmente utilizadas del agave como fuente de alimento son los tallos y las bases de las hojas, las cuales son ricas en carbohidratos, de ellas es extraído un líquido rico en azucares principalmente fructosa, con el cual se producen diferentes bebidas como “el aguamiel” que es consumido directamente en fresco sin llevarse a cabo proceso alguno de transformación microbiana, a diferencia del pulque, que es producto de la fermentación del aguamiel, además se producen algunos otros destilados como lo son el “bacanora”, el “mezcal” y el “tequila”.2 El crecimiento muy lento de estas plantas, así como sus bajas tasas de reproducción asexual y sexual son factores que hacen a los agaves difíciles de multiplicar masivamente por métodos convencionales. Una alternativa prometedora para la resolución de estos problemas es la aplicación en estas especies de las técnicas de propagación y mejoramiento derivadas de la Biotecnología Vegetal. En estos momentos, la técnica más usada en este campo es la llamada micro propagación o in vitro, misma que consiste en la propagación asexual de plantas utilizando las técnicas de cultivo de tejidos vegetales.3 Una de las técnicas utilizadas para la micropropagación es el cultivo de callos embriogénicos, se le denomina tejido calloso a una masa amorfa de células vegetales poco diferenciadas y de rápida proliferación, esta masa amorfa se obtiene a partir de un tejido obtenido por medio del aislamiento de órganos o tejidos diferenciados, los cuales posteriormente son llevados a una desdiferenciación celular.4 

Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue inducir un crecimiento celular en el cultivo de callos de la especie Agave americana L. en medio MS adicionado con bencilaminopurina (BAP).

Materiales y Métodos.

Los callos de Agave americana L. fueron proporcionados por el laboratorio de cultivo de tejidos vegetales del Instituto Tecnológico de Tuxtla Gutiérrez. Para realizar la propagación in vitro se preparó medio MS (Murashige y Skoog, 1962) y se colocó en 9 frascos con un aproximado de 20 mL, adicionando BAP como regulador de crecimiento a una concentración de 2 mg/L, se esterilizaron en autoclave a 15 lbs/pulg2 a una temperatura de 121ºC durante 15 minutos. En estos frascos con medio y regulador de crecimiento ya estériles, se resembraron los callos dentro de la campana de flujo laminar para evitar contaminación alguna. Una vez terminada la resiembra de callos los frascos fueron sellados con Kleenpack y posteriormente se trasladaron a la cámara de aclimatación a una temperatura de 26ºC por 2 meses

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