Desarrollo de una metodología de Electroforesis y de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)

UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DEL CENTRO[pic 2][pic 3][pic 4]

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INGENIERIA EN BIOTECNOLOGÍA

Desarrollo de una metodología de Electroforesis y de la Reacción en         Cadena de la Polimerasa (PCR).

Lizbeth Rivera Hernández

Zuleima Teresa Méndez Jiménez

Villahermosa, Tabasco a 28 de mayo de 2018.

Contenido

Resùmen………………………………………………………………………………..3

Introducciòn……………………………………………………………………………..4

Objetivo General        6

Objetivos Específicos        6

Desarrollo        7

Conclusiones        17

Bibliografía…………………………………………………………………………….18

Anexos…………………………………………………………………………………19

Introducción

Estamos complacidas de compartir con ustedes este tema, que es de suma importancia en la biotecnología. Como punto de partida el siguiente trabajo pretende como su nombre lo indica, desarrollar una metodología de PCR punto final (Reacción en la Cadena de la Polimerasa) y la técnica de Electroforesis horizontal, por lo cual se ha estructurado de manera concreta y sencilla, a fin de obtener un panorama más amplio del tema a tratar.

De inicio, se aborda de manera general los objetivos a cumplir durante este trabajo y los antecedentes del tema a tratar ya que resulta necesario la implementación de la metodología con ayuda de la extracción del ADN vegetal de las siguientes plantas: Albahaca (Ocimum basilicum), Cilantro (Coriandrum sativum) y Espinaca (Spinacia oleracea), con el fin de garantizar la efectividad de la metodología implementada.

Cabe mencionar que la PCR es importante ya que es una técnica para la síntesis "in vitro" de secuencias específicas de ADN. Además, es una forma simple y muy rápida de multiplicar el ADN presente en diferentes muestras biológicas, obteniéndose millones de copias de una determinada secuencia de ADN. (Mas, E., Poza, J., Ciriza, J., Zaragoza, P., & Osta, R. (1993).

Por otra parte, la PCR permite obtener resultados en menor tiempo, con alta sensibilidad y especificidad, lo cual la hace importante y diferente a otras técnicas. (D. D. E. E., & Grado, P. D. E. (2012).

De igual manera la importancia de la electroforesis es debido a que esta sirve para poder separar fragmentos de ADN y ARN en función de su tamaño, visualizarlos mediante una sencilla tinción, y de esta forma determinar el contenido de ácidos nucleicos de una muestra, teniendo una estimación de su concentración y grado de entereza. La electroforesis constituye parte importante del procedimiento del análisis de los ácidos nucleicos y proteínas, así como el microscopio permite visualizar microorganismos y estructuras similares, la electroforesis nos ayuda a observar los ácidos nucleicos y proteínas al final del procedimiento.

Es importante señalar que la electroforesis en asociación con otras técnicas tales como PCR nos brinda una gran ayuda en diferentes áreas de la biotecnología ya que gracias a estas técnicas es posible visualizar las bandas de ARN o ADN de patógenos, detectar cambios, visualizar una nueva proteína entre otros. (Varas, Carlos Augusto Yábar. 2003).

Justificación

 En la biología molecular existen diferentes técnicas indispensables para las ciertas áreas de la biotecnología, ya que estas son bases fundamentales durante la formación académica de un biotecnólogo. Debido a esto se implementará el desarrollo de una metodología para las técnicas de Electroforesis y PCR en el laboratorio de Ingeniería en biotecnología  

Objetivo General

Elaboración de la metodología de Electroforesis horizontal y PCR.

Objetivos Específicos

Extracción de ADN de plantas para evaluación de la metodología desarrollada de PCR y Electroforesis horizontal.

Hipótesis

 Si elaboramos de manera correcta la metodología de PCR y Electroforesis, podremos llevarla a cabo con ayuda del ADN vegetal de las plantas antes mencionadas y ayudar a generaciones atrás en la aplicación de las técnicas en el laboratorio de la Universidad Politécnica del Centro.

MARCO TEORICO

En los últimos años, el término "biología molecular" se ha puesto de moda y sus usos han variado. Para algunos se ha convertido en sinónimo de bioquímica practicado "sin licencia", como ha señalado un escritor. Para otros, es una excusa para subirse al carro del hallazgo de la investigación; para otros, no es más que una rama de la biología ultraestructural, llevada al nivel de la arquitectura molecular.  En 1950 fue Watson y Crick que llamaron por las formas de las moléculas biológicas y con la evolución, explotación y ramificación de estas formas en el ascenso a niveles cada vez más altos de organización.” La biología molecular es predominantemente tridimensional y estructural, lo que no significa, sin embargo, que no es más que un refinamiento de la morfología. Al mismo tiempo, debe indagar en la génesis y la función”.  Allen, G. (1978).

En 1953 los mismos autores descubrieron la doble hélice del ADN, lo cual fue un gran avance en la biología molecular. Luego Francis Crick continua con el descubrimiento del código genético en los años 60. Es decir, se descubrió que las bases del ADN se leen de a 3 y tres combinaciones de letras significan un aminoácido que formará parte de una proteína. Allí comienza a comprenderse como es la molécula de ADN y como se lleva la información que contiene a la célula que la contiene. A esto se le denomino “Dogma central de la biología molecular”.

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