EXTRACION DE CASEINA Y DETERMINACION DEL PUNTO ISOELECTRICO EN MUESTRA DE LECHE DE CABRA

EXTRACION DE CASEINA Y DETERMINACION DEL PUNTO ISOELECTRICO EN MUESTRA DE LECHE DE CABRA

Rojas-Núñez Yuliana1, Sánchez-Yunda Sebastian2

ABSTRACT

Keywords:

1. Introducción
2. Materiales y métodos

1.  Recolección de la muestra

Se utilizaron 50 ml de leche de cabra fresca, recolectados en la vereda Santo Domingo, zona rural del municipio de Florencia ubicado más precisamente en el departamento del Caquetá, en el piedemonte de la cordillera Oriental, a las orillas del rio Hacha, en el noroeste del departamento. La muestra no recibió ningún tipo de procedimiento de purificación  o transformación previo.  

1. Materiales, equipos y reactivo

1. Materiales
2. Equipos

1.  Procedimiento experimental

1. Aislamiento de la caseína

Se calentó en un vaso de precipitado 150 ml de agua destilada hasta 38°C, posterior a esto se añadieron los 50 ml de leche de cabra, luego se agregó gota a gota y con agitación suave ácido acético con una concentración ([ ]) de 1M hasta que se observó la desnaturalización de la proteína (precipitado). Se dejó sedimentar y se llevó a filtración por vacío. Una vez finalizado el proceso de filtración se lavó el precipitado obtenido con 20 ml de etanol. Se dejó secar, se extrajo y se llevó a un vaso de precipitado al que se le añadió 5 ml de éter de petróleo. Nuevamente se filtró obteniendo como resultado un precipitado blanco fácil de manipular (caseína).

1. Preparación de la solución de caseína

De la caseína extraída previamente se agregaron 250 mg aproximadamente en un vaso de precipitado de 50 ml, posteriormente se agregaron 20 ml de agua destilada y 5 ml de hidróxido de sodio 1N, se agito hasta lograr una solución total de la caseína, una vez esta disuelta se vertió en un matraz aforado de 50 ml y se adicionaron 5 ml de ácido acético 1N y se diluyo con agua destilada, por último, se volvió a filtrar hasta que se obtuvo un solución clara y limpia.

1. Determinación del punto isoeléctrico (pI) de la caseína

En diez vasos de precipitado de 25 ml limpios, secos y rotulados previamente, se adicionaron exactamente los volúmenes de los reactivos según la siguiente tabla:

Tabla 1: Tabla de disoluciones

Una vez realizadas las diferentes disoluciones se procedió a medir el pH experimentalmente de cada uno de los vasos, se añadió a cada vaso 1 ml de la solución de caseína preparada previamente, se agito suavemente cada vaso y se dejó en reposo por un lapso de 3 min aproximadamente. Por último, se midió la absorbancia de cada una de las muestras a 640 nm en el espectrofotómetro.  

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