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Estudio de la actividad enzimática de la amilasa salival


Enviado por   •  19 de Febrero de 2023  •  Informe  •  5.969 Palabras (24 Páginas)  •  325 Visitas

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[pic 1]UNIVERSIDAD DE ORIENTE – NÚCLEO BOLÍVAR

ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS FISIOLÓGICAS

SECCIÓN DE BIOQUÍMICA

Estudio de la actividad enzimática de la amilasa salival

PROFESOR:                                                                BACHILLERES:

Dra: Stefani Ríos                                                       Martínez Crisvelis 29.700.416

                                                                                  Mata Karla 21.177.586

                                                                           Seijas Rorlenis 28.504.867

        

Ciudad Bolívar, febrero 2023

Índice

Introducción        3

Desarrollo        4

TABLA 1: Efecto de la Concentración de Sustrato sobre la Actividad Enzimática        4

Cálculos de la tabla Nª1        4

TABLA 2: Efecto de la concentración de Enzimas        5

Cálculos de la tabla Nª2        5

TABLA 3: Efecto de la variación del PH sobre la actividad enzimática        6

Cálculos de la tabla Nª3        6

TABLA 4: Efecto de la Variación de la Temperatura sobre la Actividad Enzimática        8

Cálculos de la tabla Nª4        8

TABLA 5.1: Efecto del Ácido Sulfúrico sobre la Actividad Enzimática        9

Cálculos de la tabla Nª5.1        9

TABLA 5.2: Efecto de la Acarbosa sobre la Actividad Enzimática        10

Cálculos de la tabla Nª5.2        10

TABLA 5.3: Efecto del NaCl sobre la Actividad Enzimática        11

Cálculos de la tabla Nª5.3        11

Discusión        13

Conclusión        17

BIBLIOGRAFÍAS.        18

Introducción

Las enzimas son compuestos proteicos, también llamados catalizadores biológicos, ya que se encargan de realizar la mayoría de las transformaciones energéticas que ocurren en un organismo, aumentando su velocidad de reacción sin alterar el equilibrio final, cada enzima se une a un solo tipo de sustrato por lo que son altamente específicas y eficientes en su función ya que pequeñas concentraciones pueden catalizar grandes concentraciones de sustrato, actúan bajo condiciones determinadas de pH, temperatura, concentración del sustrato y cofactores, siendo muy susceptibles a cualquier variación de estos parámetros (distintos para cada enzima), cambios bruscos resultan en la inhibición o reducción de la actividad enzimática y finalmente la desnaturalización de la enzima y los parámetros adecuados, permiten que la actividad enzimática sea óptima.

La amilasa Salival es una enzima hidrolasa secretada por las glándulas salivales. Hidrolizan enlaces alfa1-4alfa glucosídicos, siendo la primera que actúa en la digestión de carbohidratos.

El objetivo de la experimentación es identificar la acción que realiza la amilasa producida en las glándulas salivales de la boca sobre el almidón y comprobar cómo es que ésta rompe los enlaces del polisacárido en monosacáridos.

Desarrollo

[pic 2]TABLA 1: Efecto de la Concentración de Sustrato sobre la Actividad Enzimática

Fuente: Valores obtenidos en la práctica realizada en el Laboratorio de Bioquímica UDO-Bolívar II-2022

Cálculos de la tabla Nª1

  • Cant S total (gr)= sustrato (g/L) x Volumen S (ml) / 1000=
  • 1= 1g/L x 0,001L= 0,001gr
  • 2= 1g/L x 0,0015L= 0,0015gr
  • 3= 1g/L x 0,0020L= 0,002gr
  • 4= 1g/L x 0,0025L= 0,0025gr
  • 5= 1g/L x 0,003L= 0,003gr
  • Cant S total (mmoles)= (Cant S total (gr) x 1000) / (PM S (g/mol) x 1000)=
  • 1= 0,001g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-6mmoles
  • 2= 0,0015g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 4,38E-6mmoles
  • 3= 0,002g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 5,84E-6mmoles
  • 4= 0,0025g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 7,30E-6mmoles
  • 5= 0,003g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 8,76E-6mmoles
  • Cant de Sustrato NM (gr)= Cant S total (gr) x Dops S (Abs) / Dops C (abs)=
  • 1= 0,001g x 0,033 / 1,931= 1,71E-05g
  • 2= 0,0015g x 0,269 / 2,194= 1,84E-04g
  • 3= 0,002g x 0,401 / 3,004= 2,67E-04g
  • 4= 0,0025g x 0,941 / 4,964= 4,74E-04g
  • 5= 0,003g x 1,806 / 6,02= 9,00E-04g
  •  Cant de Sustrato NM (mmoles)= (Cant de S NM (gr) x 1000) / (342,43g/mol x 1000)=
  • 1= 1,71E-05g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 4,99E-08mmol
  • 2= 1,84E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 5,37E-7mmol
  • 3= 2,67E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 7,80E-7mmol
  • 4= 4,74E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 1,38E-6mmol
  • 5= 9,00E-04g x 1000 / 342,43g/mol x1000= 2,63E-6mmol
  • Cant de Sustrato Metabolizado (gr)= Cant S total (gr) - cant S NM=
  • 1= 0,001g - 1,71E-05g= 9,83E-04g
  • 2= 0,0015g - 1,84E-04g= 1,33E-03g
  • 3= 0,002g - 2,67E-04g= 1,73E-03g
  • 4= 0,0025g - 4,74E-04g= 2,03E-03g
  • 5= 0,003g – 9,00E-04g= 2,10E-03g
  • Cant de Sustrato Metabolizado (mmoles)= Cant S M (gr) x 1000) / (342,43g/mol x 1000)=
  • 1= 9,83E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,87E-06
  • 2= 1,32E-03g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 3,84E-06
  • 3= 1,73E-03g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 5,06E-06
  • 4= 2,03E-03g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 5,92E-06
  • 5= 2,10E-03g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 6,13E-6
  • Velocidad S M (g/min)= Cant S metabolizado (gr) / tiempo de reacción (2 min)=
  • 1= 9,83E-04g / 2min= 4,91E-04g/min
  • 2= 1,32E-03g / 2min= 6,58E-04g/min
  • 3= 1,73E-03g/ 2min= 8,67E-04g/min
  • 4= 2,03E-03g / 2min= 1,01E-03g/min
  • 5= 2,10E-03g / 2min= 1,05E-03g/min
  • Velocidad S M (mmoles/min)= Velocidad S M (gr) x 1000) / (342,43g/mol x 1000)=
  • 1= 4,91E-04g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 1,44E-6
  • 2= 6,58E-04g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 1,92E-6
  • 3= 8,67E-04g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,53E-6
  • 4= 1,01E-03g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,96E-6
  • 5= 1,05E-03g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 3,07E-6

[pic 3]TABLA 2: Efecto de la concentración de Enzimas

Fuente: Valores obtenidos en la práctica realizada en el Laboratorio de Bioquímica UDO-Bolívar II-2022

Cálculos de la tabla Nª2

  • Cant S total (gr)= sustrato (g/L) x Volumen S (ml) / 1000=
  • 1= 1g/L x 0,0015= 0,0015g
  • 2= 1g/L x 0,0015= 0,0015g
  • 3= 1g/L x 0,0015= 0,0015g
  • 4= 1g/L x 0,0015= 0,0015g
  • Cant S total (mmoles)= (Cant S total (gr) x 1000) / (PM S (g/mol) x 1000)=
  • 1= 0,0015g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 4,38E-6mmoles
  • 2= 0,0015g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 4,38E-6mmoles
  • 3= 0,0015g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 4,38E-6mmoles
  • 4= 0,0015g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 4,38E-6mmoles
  • Cant de Sustrato NM (gr)= Cant S total (gr) x Dops S (Abs) / Dops C (abs)=
  • 1= 0,0015g x 0,746 / 2,148= 5,21E-04g
  • 2= 0,0015g x 0,267 / 2,148= 1,86E-04g
  • 3= 0,0015g x 0,21 / 2,148= 1,47E-04g
  • 4= 0,0015g x 0,1 / 2,148= 6,98E-05g
  • Cant de Sustrato NM (mmoles)= (Cant de S NM (gr) x 1000) / (PMS g/mol x 1000)=
  • 1= 5,21E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 1,52E-06mmoles
  • 2= 1,86E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 5,44E-07mmoles
  • 3= 1,47E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 4,28E-07mmoles
  • 4= 6,98E-05g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,04E-07mmoles
  • Cant de Sustrato Metabolizado (gr)= Cant S total (gr) - cant S NM=
  • 1= 0,0015g – 5,21E-04g= 9,79E-04g
  • 2= 0,0015g – 1,86E-04g= 1,31E-03g
  • 3= 0,0015g – 1,47E-04g= 1,35E-03g
  • 4= 0,0015g – 6,98E-05g= 1,43E-03g
  • Cant de Sustrato Metabolizado (mmoles)= Cant S M (gr) x 1000) / (PMS g/mol x 1000)=
  • 1= 9,79E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,86E-06mmoles
  • 2= 1,31E-03g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 3,84E-06mmoles
  • 3= 1,35E-03g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 3,95E-06mmoles
  • 4= 1,43E-03g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 4,18E-06mmoles
  • Velocidad S M (g/min)= Cant S metabolizado (gr) / tiempo de reacción (2 min)=
  • 1=9,79E-04g / 2min= 4,90E-04g/min
  • 2=1,31E-03g / 2min= 6,57E-04g/min
  • 3=1,35E-03g / 2min= 6,77E-04g/min
  • 4=1,43E-03g / 2min= 7,15E-04g/min
  • Velocidad S M (mmoles/min)= Velocidad S M (gr) x 1000) / (PMS g/mol x 1000)=
  • 1= 4,90E-04g g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 1,43E-06mmoles/min
  • 2= 6,57E-04g /min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 1,92E-06mmoles/min
  • 3= 6,77E-04 g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 1,98E-06mmoles/min
  • 4= 7,15E-04g /min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,09E-06mmoles/min

[pic 4]TABLA 3: Efecto de la variación del PH sobre la actividad enzimática

Fuente: Valores obtenidos en la práctica realizada en el Laboratorio de Bioquímica UDO-Bolívar II-2022

Cálculos de la tabla Nª3

  • Cant S total (gr)= sustrato (g/L) x Volumen S (ml) / 1000=
  • 1= 1g/L x 0,001= 0,001g
  • 2= 1g/L x 0,001= 0,001g
  • 3= 1g/L x 0,001= 0,001g
  • 4= 1g/L x 0,001= 0,001g
  • 5= 1g/L x 0,001= 0,001g
  • Cant S total (mmoles)= (Cant S total (gr) x 1000) / (PM S (g/mol) x 1000)=
  • 1= 0,001g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-6mmoles
  • 2= 0,001g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-6mmoles
  • 3= 0,001g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-6mmoles
  • 4= 0,001g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-6mmoles
  • 5= 0,001g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-6mmoles
  • Cant de Sustrato NM (gr)= Cant S total (gr) x Dops S (Abs) / Dops C (abs)=
  • 1= 0,001g x 1,6661 / 1,931= 8,60E-04g
  • 2= 0,001g x 2 / 1,74= 1,15E-03g
  • 3= 0,001g x 0,031 / 1,87= 1,66E-05g
  • 4= 0,001g x 0,214 / 1,639= 1,31E-04g
  • 5= 0,001g x 1.1 / 1.9= 5,79E-04g
  • Cant de Sustrato NM (mmoles)= (Cant de S NM (gr) x 1000) / (342,43g/mol x 1000)=
  • 1= 8,60E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,51E-06mmoles
  • 2= 1,15E-03g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 3,36E-06mmoles
  • 3= 1,66E-05g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 4,84E-08mmoles
  • 4= 1,31E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 3,81E-07mmoles
  • 5= 5,79E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 1,69E-6mmoles
  • Cant de Sustrato Metabolizado (gr)= Cant S total (gr) - cant S NM=
  • 1= 0,001g- 8,60E-04g= 1,40E-04g
  • 2= 0,001g – 1.15E-03g= -1,49E-04g
  • 3= 0,001g - 1,66E-05g= 9,83E-04g
  • 4= 0,001g – 1,31E-04g= 8,69E-04g
  • 5= 0,001g – 5,79E-04g= 4,21E-04g
  • Cant de Sustrato Metabolizado (mmoles)= Cant S M (gr) x 1000) / (PMS x 1000)=
  • 1= 1,40E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 4,08E-08mmoles
  • 2= - 1,49E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= -4,36E-07mmoles
  • 3= 9,83E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= -2,87E-06mmoles
  • 4= 8,69E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,54E-06mmoles
  • 5= 4,21E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 1,23E-06mmoles
  • Velocidad S M (g/min)= Cant S metabolizado (gr) / tiempo de reacción (2 min)=
  • 1= 1,40E-04g / 2min= 6.99E-05g/min
  • 2= - 1,49E-04g / 2min= 7,47E-05g/min
  • 3= 9,83E-04g / 2min= 4.92E-04g/min
  • 4= 8,69E-04g / 2min= 4,35E-04g/min
  • 5= 4,21E-04g / 2min= 2,11E-04g/min
  • Velocidad S M (mmoles/min)= Velocidad S M (gr) x 1000) / (342,43g/mol x 1000)=
  • 1=6.99E-05g/min  x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2, 04E-07mmoles/min
  • 2=7,47E-05g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= -2,18E-07mmoles/min
  • 3=4.92E-04g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 1,44E-06mmoles/min
  • 4=4,35E-04g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 1,27E-06mmoles/min
  • 5=2,11E-04g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 6,15E-07mmole/min

[pic 5]TABLA 4: Efecto de la Variación de la Temperatura sobre la Actividad Enzimática

Fuente: Valores obtenidos en la práctica realizada en el Laboratorio de Bioquímica UDO-Bolívar II-2022

Cálculos de la tabla Nª4

  • Cant S total (gr)= sustrato (g/L) x Volumen S (ml) / 1000=
  • 1= 1g/L x 0,001g= 0,001g
  • 2= 1g/L x 0,001g= 0,001g
  • 3= 1g/L x 0,001g= 0,001g
  • 4= 1g/L x 0,001g= 0,001g
  • 5= 1g/L x 0,001g= 0,001g
  • Cant S total (mmoles)= (Cant S total (gr) x 1000) / (PM S (g/mol) x 1000)=
  • 1= 0,001g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-06mmoles
  • 2= 0,001g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-06mmoles
  • 3= 0,001g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-06mmoles
  • 4= 0,001g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-06mmoles
  • 5= 0,001g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-06mmoles
  • Cant de Sustrato NM (gr)= Cant S total (gr) x Dops S (Abs) / Dops C (abs)=
  • 1= 0,001g x 1,083 / 1,626= 0g
  • 2= 0,001g x 0,123 / 1,701= 7,23E-05g
  • 3= 0,001g x 0,363 / 1,858= 1,95E-04g
  • 4= 0,001g x 1,06 / 1,06= 1,00E-03g
  • 5= 0,001g x 1,707 / 1,707= 1,00E-03g
  • Cant de Sustrato NM (mmoles)= (Cant de S NM (gr) x 1000) / (342,43g/mol x 1000)=
  • 1= 0g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 0
  • 2= 7,23E-05g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,11E-07mmoles
  • 3= 1,95E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 5,71E-07mmoles
  • 4= 1,00E-03g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-06mmoles
  • 5= 1,00E-03g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-06mmoles
  • Cant de Sustrato Metabolizado (gr)= Cant S total (gr) - cant S NM=
  • 1= 0,001g - 0= 0g
  • 2= 0,001g - 7,23E-05g= 9,278E-04g
  • 3= 0,001g – 1,95E-04g= 8,05E-06g
  • 4= 0,001g – 1,00E-03g= 0g
  • 5= 0,001g – 1-,00E-03g= 0g
  • Cant de Sustrato Metabolizado (mmoles)= Cant S M (gr) x 1000) / (PMS g/mol x 1000)=
  • 1= 0g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 0
  • 2= 9,28E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,71E-06mmoles
  • 3= 8,05E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,35E-06mmoles
  • 4= 0g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 0mmoles
  • 5= 0g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 0,mmoles
  • Velocidad S M (g/min)= Cant S metabolizado (gr) / tiempo de reacción (2 min)=
  • 1= 0/ 2min= 0
  • 2= 9,28E-04g / 2min= 4,64g/min
  • 3=805E-04g / 2min= 4.02g/min
  • 4= 0g / 2min= 0g/min
  • 5= 0g / 2min= 0g/min
  • Velocidad S M (mmoles/min)= Velocidad S M (gr) x 1000) / (342,43g/mol x 1000)=
  • 1= 0g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000=0mmols/min
  • 2= 4,64g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000=1,35E-06
  • 3= 4,02g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000=1,17E-06
  • 4= 0g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000=O
  • 5= 0g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000=0

[pic 6]TABLA 5.1: Efecto del Ácido Sulfúrico sobre la Actividad Enzimática

Fuente: Valores obtenidos en la práctica realizada en el Laboratorio de Bioquímica UDO-Bolívar II-2022

Cálculos de la tabla Nª5.1

  • Cant S total (gr)= sustrato (g/L) x Volumen S (ml) / 1000=
  • 1= 1g/L x 0,001= 0,001g
  • 2= 1g/L x 0,0015= 0,0015g
  • 3= 1g/L x 0,002= 0,002g
  • 4= 1g/L x 0,0025= 0,0025g
  • Cant S total (mmoles)= (Cant S total (gr) x 1000) / (PM S (g/mol) x 1000)=
  • 1= 0,001g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-6mmoles
  • 2= 0,0015g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 4,38E -6mmoles
  • 3= 0,002g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 5,84E-6mmoles
  • 4= 0,0025g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 7,30E-6mmoles
  • Cant de Sustrato NM (gr)= Cant S total (gr) x Dops S (Abs) / Dops C (abs)=
  • 1= 0,001g x 1,2 / 1,2= 1,00E-03g
  • 2= 0,0015g x 1,524 / 1,808= 1,26E-03g
  • 3= 0,002g x 2,016 / 2,416= 1,67E-03g
  • 4= 0,0025g x 2,858 / 2,93=  2,42E-03g
  • Cant de Sustrato NM (mmoles)= (Cant de S NM (gr) x 1000) / (342,43g/mol x 1000)=
  • 1= 1,00E-03g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,92E-6mmoles
  • 2=1,26E-03g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 3,69E-6mmoles
  • 3=1,67E-03g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 4,87E-6mmoles
  • 4=2,42E-03g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 7,07E-6mmoles
  • Cant de Sustrato Metabolizado (gr)= Cant S total (gr) - cant S NM=
  • 1= 0,001g - 0,001g= 0g
  • 2= 0,0015g – 1,26g= 2,36E-04g
  • 3= 0,002g – 1,67E-03g= 3,31E-04g
  • 4= 0,0025g – 2,42E-03g= 7,80E-05g
  • Cant de Sustrato Metabolizado (mmoles)= Cant S M (gr) x 1000) / (PMS g/mol x 1000)=
  • 1= 0g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 0mmoles
  • 2= 2,36E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 6,88E-7mmoles
  • 3= 3,31E-04g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 9,67E-7mmoles
  • 4= 7,80E-05g x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 2,28E-7mmoles
  • Velocidad S M (g/min)= Cant S metabolizado (gr) / tiempo de reacción (2 min)=
  • 1= 0g / 2min= 0g/min
  • 2= 2,36E-04g / 2min= 1,18E-04g/min
  • 3=3,31E-04g / 2min= 1,66E-04g/min
  • 4= 7,80E-05g / 2min= 3,90E-05g/min
  • Velocidad S M (mmoles/min)= Velocidad S M (gr) x 1000) / (PMS g/mol x 1000)=
  • 1= 0g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 0mmoles/min
  • 2=1,18E-04g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 3,44E-7mmoles/min
  • 3= 1,66E-04g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 4,83E-7mmoles/min
  • 4= 3,90E-05g/min x 1000 / 342,43g/mol x 1000= 1,14E-7mmoles/min

[pic 7]TABLA 5.2: Efecto de la Acarbosa sobre la Actividad Enzimática

Fuente: Valores obtenidos en la práctica realizada en el Laboratorio de Bioquímica UDO-Bolívar II-2022

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