Extraccion, Reconocimiento Y Cromotografia De Lipidos

Introducción

En el siguiente trabajo se presentaran las formas más fáciles para lograr identificar, separar y extraer los lípidos, los cuales son caracterizados por ser insolubles en agua y por ser derivados de modificaciones de ácidos orgánicos mono carboxílicos o más conocidos como ácidos grasos.

Se verán los cambios de color que sufren los lípidos al entrar en contacto con:

.-El Sudan III, es un método utilizado generalmente para demostrar la presencia mediante tinción de triglicéridos, aunque también tiñe otros lípidos. Pertenece al grupo de colorantes indiferentes, que son aquellos que no tienen afinidad por estructuras ácidas o básicas. Son insolubles en el agua y tiñen aquellas sustancias que tienen un poder de disolución superior al del líquido empleado para preparar la solución colorante. ya que toman un tono especial por su estructura, también se observará el bajo grado de interacción que poseen los lípidos y las grasas con el solvente universal del agua, por esto último se les consideran como hidrofóbicos o apolares y que generalmente se ubicaran cerca de biomoleculas tales como los hidratos de carbono.

Para llevar a cabo satisfactoriamente la extracción de lípidos, es necesario que se utilicen soluciones con compuestos orgánicos para poder disolver en gran parte el lípido en cuestión.

Objetivos:

 Conocer métodos generales sencillos de extracción, separación e identificación de lípidos.

 Comprender las propiedades fisicoquímicas de los lípidos (extracción y solubilidad).

 Identificar a través de pruebas bioquímicas los lípidos en las muestras problema.

 Entregar al alumno los reconocimientos básicos para desarrollar análisis en grasas y aceites.

Materiales y métodos

Materiales :

- 1 pipeta Pasteur - 2 matraces 250 ml

- 5 tubos de ensayo de 10 ml - papel filtro

- 3 pipetas de 2 ml - baño termorregulador

- 1 propipeta - cámara cromatografíca

- 2 embudos

- 2 micropipetas

- 2 puntas mp

Reactivos:

- Etanol

- Metanol

- NaOH 20%

- Éter

- Amoniaco

- Tinta china

- Cloroformo

- Aceite de oliva

- Sudán III

Métodos

1.- Extracción de lípidos de yema de huevo.

Se colocó una yema de huevo en un matraz de 250 mL (con tapa) y se agregó 50 mL de etanol y 50 mL de éter, se tapó herméticamente y se agitó. Lo dejamos reposar 10 minutos y se filtró con papel filtro.

2. Identificación de lípidos. Se dispuso en una gradilla 2 tubos de ensayo. Se añadió a uno de ellos 2ml de agua y al otro 2ml de aceite. Luego se añadió a ambos tubos 4-5 gotas de solución alcohólica de Sudán III. Agitamos ambos tubos, se dejó reposar y observar.

3.- Determinación de Solubilidad. Se puso 2ml de aceite en dos tubos de ensayo. Se añadió a uno de ellos 2ml de agua y al otro 2ml de éter, se agitó fuertemente ambos tubos y dejó reposar. Tinción. Se añadió a uno de los tubos 4-5 gotas de de tinta china. Se agitó, dejó reposar y observar.

4.- Saponificación. Se colocó en un tubo de ensayo 2 ml de filtrado de yema de huevo y 2 ml de NaOH al 20%. Se agitó enérgicamente y se colocó el tubo al baño María 10 minutos. Pasado este tiempo, se puedo observar en el tubo 3 fases: una inferior clara que contiene la solución de NaOH sobrante junto con la glicerina formada, otra intermedia semisólida que es el jabón formado y una superior lipídica de aceite inalterado.

Resultados:

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