Extraccion de ADN

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UNIVERSIDAD NACIONAL

TORIBIO RODRÍGUEZ DE MENDOZA DE AMAZONAS

FACULTAD DE INGENIERÍA ZOOTECNISTA,

AGRONEGOCIOS Y BIOTECNOLOGÍA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA EN AGRONEGOCIOS

TEMA:

         CURSO:        

ALLUMNO:

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CICLO:      

FECHA:  

Extraccion de ADN

Quimica Organica

Grandez Montoya Ivan

Ing. Miguel Garcia Torres

II

13 / 05 / 2017

ÍNDICE

EXTRACCIÓN DE ADN        2

INTRODUCCIÓN        2

MATERIALES Y REACTIVOS        3

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL        3

RESULTADOS        4

CONCLUSIONES        5

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS        5

EXTRACCIÓN DE ADN

INTRODUCCIÓN

Los ácidos nucleicos son moléculas portadoras de información genética de la célula. La información esta codificada en el ADN o ácido desoxirribonucleico, y se extrae e interpreta con la ayuda del ARN ácido ribonucleico. Las moléculas orgánicas que participan son las enzimas, biocatalizadores biológicos específicos que se determinan cualitativamente y cuantitativamente las distintas reacciones químicas necesarias para sustentar la vida. en cuanto a la estructura del ADN, podemos decir que está formado por dos cadenas antiparalelas de nucleótidos para formar una hélice. Este modelo fue propuesto por Watson y Crik en 1953. Unos de los materiales biológicos para estudiar el ADN fueron las bacterias, también fue la mosca de la fruta (Drosophila melanogaster). Hoy en día la determinación del ADN está en boga y existen barias de extracción de las más simples a las más complejas

Se puede extraer ADN de todos los seres vivos, es muy usado en la paternidad responsable, por ser una prueba de mucha certeza. Para la identificación del ADN se utiliza la técnica de electroforesis, se utiliza como soporte al gel de poliacrilamida o también gel de agarosa este último es más usado. Para la detección de las bandas se utiliza como colorante al bromuro de Etidio que fluorece con luz ultravioleta a un color naranja.

El objetivo fundamental de esta práctica es utilizar una técnica sencilla para poder extraer el ADN de un tejido animal y por el aspecto que presenta, confirmar su estructura fibrilar. A partir de la longitud enorme de fibras también se confirma que el núcleo del ADN se encuentra replegado.

MATERIALES Y REACTIVOS

• Hígado de pollo
• Mortero
• Vasos de precipitado de 250 ml
• Pipeta
• Probeta
• Alcohol de 96°
• Cloruro de sodio 2M
• Solución salina fisiológica al 0.85%
• dodecilsulfato de sodio al 20%
• Gasa
• Balanza de dos platillos
• Jeringa con aguja
• Tijera
• Embudo de vidrio  
• Varilla de vidrio

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

• A un hígado se recarga con SSF con una jeringa con su respectiva aguja (perfusión)
• Se pesa 55 gramos de hígado en una balanza de dos platillos
• Se coloca en el mortero y pica muy pequeñito, luego se le agrega un chorrito de SSF para triturarlo con el pilón, una vez triturado el hígado se agrega hasta los 50 ml, de SSF. en este proceso se rompe algunas membranas de las células del hígado y sus núcleos quedan sueltos
• Se coloca la tela en el embudo el cual está encima de un vaso de precipitado
• Se pasa a filtrar el triturado para separar los restos de tejido que hayan quedado por romper
• Se añade al filtrado 50 ml de NaCl al 2 M, este medio hipertónico produce el estallido o ruptura de la membrana nuclear, quedando libre las fibras de cromatina. A continuación, se añade 1 ml de SDS gota a gota por toda la superficie de dicha solución, para luego agitarlo suavemente. La acción del detergente es formar un complejo con las proteínas (cargándolas negativamente) y separarlas del ADN
• Se mide 50 ml de alcohol en la probeta para luego verterla en el vaso de precipitado donde se encuentra la solución antes mencionada. Hay que hacerlo en forma que el alcohol resbale por la pared del vaso y se forme dos capas.

RESULTADOS

En la interface de la solución se precipita el DNA

• Con una varilla de vidrio se levanta un grupo de fibras blancas visibles por la pared del vaso de precipitado. El cual son la agrupación de fibras de DNA. Con lo cual se confirma su estructura fibrilar.
• Al levantar un grupo de fibras blancas por la pared del vaso hasta encima de la solución y alejar lentamente la varilla de la pared del vaso se observa que se estira como una sustancia mucosa hasta que se rompe. En este proceso se confirma los extremos cohesivos o pegajosos del ADN.

CONCLUSIONES

• Este procedimiento fue fácil y sencillo, el cual nos ayudó a observar de una manera más fácil la fibrilación del ADN.
• El producto final no es ADN puro ya que se encuentran diminutos fragmentos de ARN e incluso alagunas proteínas.
• El ADN puede ser extraído de cualquier célula.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Jiménez García, L. F., & Merchant Larios, H. (2003). BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR. Mexico: pearson Educacíon.

Karp, G. (1998). BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR. Mexico: McGrawHill.

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