Extraccion ADN

PRÁCTICA N° 2 - AISLAMIENTO DE ADN

FUNDAMENTO TEÓRICO: El ADN es una de las partes fundamentales de los cromosomas, son estructuras constituidas por dos pequeños filamentos o brazos, que pueden ser iguales o desiguales, están unidos por un punto común llamado Centrómero; varían en forma y tamaño, pueden verse fácilmente al momento de la división celular por medio de un microscopio.

Los cromosomas químicamente están formados por proteínas y por el Ácido desoxiribonucleico o ADN.

- Estructura del ADN: El ADN está formado por unidades llamadas nucleótidos, cada una de las cuales tiene tres sustancias: el ácido fosfórico, un azúcar de cinco carbonos llamada pentosa y una base nitrogenada.

El ácido fosfórico forma el grupo fosfato; la base nitrogenada es de cuatro clases: adenina (A), guanina (G), citocina (C) y timina (T).

Según los descubridores del ADN, James Watson y Francis Crick, el ADN está formado por una doble cadena de nucleótidos que forman una especie de doble hélice semejante a una escalera en espiral; a los lados se disponen en forma alternada un fosfato y un azúcar y en los peldaños dos bases nitrogenadas.

- Funciones y Propiedades del ADN

a) El ADN controla la actividad de la célula.

b) Es el que lleva la información genética de la célula, ya que las unidades de ADN, llamadas genes, son las responsables de las características estructurales y de la transmisión de estas características de una célula a otra en la división celular. Los genes se localizan a lo largo del cromosoma.

c) El ADN tiene la propiedad de duplicarse durante la división celular para formar dos moléculas idénticas, para lo cual necesita que en el núcleo existan nucleótidos, energía y enzimas.

OBJETIVO

El objetivo principal de este experimento es el de poder observar sin ayuda de ningún instrumento óptico (microscopio) el ADN, utilizando únicamente materiales caseros cuyo costo no sea alto.

MATERIALES

- Hígado de pollo

- Detergente líquido

- Enzimas (suavizador de carne en polvo o jugo de papaya)

- Alcohol blanco

- Licuadora

- Recipiente de vidrio o plástico

- Vaso de precipitados o cualquier vaso con graduaciones (para bebés)

CONSEJOS DE SEGURIDAD:

• Maneja cuidadosamente el cuchillo cuando vayas a cortar el pimentón, si no estas seguro como hacerlo, pregunta al adulto que te acompaña o dile a él que lo haga por ti.

• Nunca metas las manos dentro de la licuadora.

• Trabaja lejos del fuego, el alcohol y el fuego pueden estar junto causar un incendio.

• Asegúrate que la conexión de la licuadora este lejos de cualquier fuente de agua, pues puede ocurrir un corto circuito si el enchufe esta mojado.

PROCEDIMIENTO

1.- Debemos cortar en pequeños trozos el hígado de pollo, luego lo colocamos en la licuadora y vertemos suficiente agua como para que, al cabo de 10 segundos de licuar, tengamos la consistencia de una crema.

Luego vertemos el licuado en un recipiente que tenga graduaciones (vaso de precipitados) por medio de un colador para separar algunas partes que no se hayan licuado lo suficiente.

Medimos el licuado en el recipiente y añadimos ¼ de detergente líquido del total del licuado.

Revolvemos suavemente con ayuda de una cuchara.

2.- Añadimos 1 cuchara de Enzimas (en este caso podemos usar suavizador de carne o jugo de papaya) y revolvemos con cuidado y lentamente por unos 5 minutos. Si mezclamos con demasiada rapidez o con mucha fuerza se corre el peligro de romper el ADN, con lo que no podríamos observarlo.

3.- Vertemos la mezcla en un recipiente alto y delgado hasta la mitad.

Ladeamos el recipiente y vertemos alcohol con mucho cuidado, evitando que se mezcle con el líquido de abajo.

Luego de unos minutos se podrá observar unos filamentos blancos dentro del alcohol y que se elevan de la mezcla de hígado, detergente y enzimas. Estamos observando el ADN.

OBSERVACIONES

- Se ha usado una licuadora para separar las células unas de otras, en esto ayuda también el detergente.

- Las enzimas destruyen a las células y hacen posible que se pueda ver el ADN que contienen.

Bibliografía

Vargas Palomeque, Miguel; Gonzales Mendoza, Rossemary; Suplemento Técnico Científico, editado por El Diario, La Paz, Bolivia, 1993.

Bolívar S, Rubén Darío; Gómez R., Miguel A., Biología Integrada, Editorial Voluntad S.A., Bogotá, Colombia, 1989

PREGUNTAS ADICIONALES

¿Qué color tienen los hígados? Y ¿qué color tiene el ADN de pimentón y el de tomate? ¿Funcionara igual en los dos casos?

El ADN es la molécula que guarda los secretos de los genes y se encuentra en el núcleo de cada célula. Una sola molécula de ADN es muy pequeña para verla a simple vista. Pero si tienes muchas moléculas de ADN juntas, ellas se pegan unas a otras y se forman filamentos blancos.

Para poder sacar o extraer el ADN de las células del tomate por ejemplo, usamos diferentes sustancias (sal, jabón, ablanda carne, alcohol) y equipos (licuadora y filtro de café) que nos ayudan a romper las células y “liberar” miles de moléculas de ADN que vemos como filamentos pegajosos. Cuando licuamos, por ejemplo, lo que hacen es romper las membranas de las células del tomate para liberar el ADN. Al filtrar separamos del ADN y otras proteínas, de la pared celular y restos del tomate. Si a través del filtro aun pasan células que no han sido rotas en la licuadora, las rompemos con el jabón. En este paso, podríamos volver a filtrar. El ablanda carne va a romper proteínas. Y finalmente como el ADN no se mezcla con el alcohol entonces se forman esas burbujitas como pegajosas, que son el ADN!!!.

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