Flujograma final biología molecular

ELISA DIRECTO[pic 1]

       Flujograma final biología molecular

         Mariana Pérez Alzate[pic 2]

Introducción

La Elisa o Enzyme-Linked Inmmunosorbent Assay (Prueba por inmunoabsorción ligado a enzimas) es una prueba bioquímica muy importante en el laboratorio de inmunología porque permite la identificación y la SEMI-CUANTIFICACION in vitro de una determinada proteína, o sustancias como hormonas en soluciones que bien pueden ser: muestras de sangre, orina, tejidos e incluso en cultivos celulares.

Existen 4 tipos de Elisa: Directo, indirecto, sándwich y competitivo, de los cuales los más usados son la Elisa directa y la Elisa sándwich.

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El uso de esta técnica es muy común en la medicina humana, medicina veterinaria para determinar el estado vacunal de un animal e incluso en la industria de la alimentación para la detección de alérgenos en alimentos destinados tanto para personas como animales.

La Elisa directa es adecuado para determinar la cantidad de antígenos de alto peso molecular, además de ser la prueba más rápida y sencilla, donde un anticuerpo primario específico marcado por una enzima reconocerá un antígeno determinado que estará inmovilizado en una placa, y al entrar en contacto con un sustrato, reaccionará la enzima para proporcionar una señal visible que será directamente proporcional a la cantidad del antígeno.

Un en ensayo ELISA requiere, en términos generales, tres componentes esenciales: el antígeno a detectar o cuantificar, un anticuerpo específico para ese antígeno conjugado a una enzima que genere una reacción cuantificable y un sistema que permita estimar la cantidad de antígeno presente en la muestra a partir de la reacción enzimática que se genere.

Antígeno y anticuerpo

Un antígeno es una sustancia extraña proveniente del ambiente, como químicos, bacterias, virus o polen, que provoca que el sistema inmunitario produzca anticuerpos (puede ser reconocida por los receptores del sistema inmunitario adaptativo).

Los anticuerpos son proteínas producidas por el sistema inmunitario del cuerpo cuando detecta sustancias que pueden ser dañinas (antígenos). Todos los anticuerpos pertenecen a un grupo de proteínas séricas conocidas como globulinas. Cada anticuerpo se compone de una cadena de polipéptido pesada y ligera. En general, los anticuerpos se producen en respuesta a la presencia de una respuesta antigénica y son de dos tipos: Monoclonales (reconocen solo una estructura dentro del antígeno) y Policlonales (mezcla de anticuerpos que reconoce diferentes estructuras dentro del antígeno).

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Objetivos                                                                         Materiales

* Detectar la presencia de anticuerpos [pic 6]

frente a patógenos específicos (Elisa de

anticuerpos)

* Determinar la exposición a un patógeno

* Detectar la presencia de un patógeno

objetivo a través de la detección de

 proteínas/antígenos del patógeno (Elis-

a de antígenos)

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Pregunta:  Se quiere diagnosticar un paciente que tiene síntomas de hepatitis B.

Flujograma

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Bibliografía:

https://www.bioted.es/protocolos/INTRODUCCION-ELISA.pdf 

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