Informe de laboratorio 2 microbiologia

Informe de Laboratorio Nº2

FROTIS BACTERIANO, COLORACIÓN DE GRAM Y USO DE MICROSCOPIO

Camacho Ginna1, Moreno Ligia2, Ramírez Rosaura3, y Sandoval Zamara4

Fundación Universitaria de San Gil-Sede Yopal, Facultad de Ciencias Naturales e Ingenierías

Yopal- Colombia

Jinita012@hotmail.com

Ligia_more@hotmail.com

rosauraramirez@unisangil.edu.co

sami_12o@hotmail.com

1. PROCEDIMIENTO

1. Registro fotográfico y explicación de procedimiento de montaje y observación del frotis bacteriano teñido en el microscopio.

Figura 1. Autores[pic 1]

[pic 2]

Figura 2. Autores

[pic 3]

Figura 3. Autores

[pic 4]

Figura 4. Autores

[pic 5]

Figura 5. Autores

[pic 6]

Figura 6. Autores

Para hacer  la preparación del frotis bacteriano se limpió el portaobjetos con alcohol y se flameó, se colocó una gota de agua en el portaobjetos y con el asa de siembra, esterilizada a la llama del mechero, se tomó una pequeña cantidad de colonia bacteriana, y se colocó sobre la gota de agua formando una emulsión y se esparció sobre el portaobjetos generando un extendido muy delgado. Se dejó secar a temperatura ambiente.

Al hacer la coloración del frotis con la tinción de Gram se colocó el portaobjetos en el lugar dispuesto para realizar la coloración, se le aplicó el colorante cristal violeta sobre el frotis dejándolo  actuar por un minuto, se lavó con agua y escurrió el exceso, luego se cubrió el frotis con lugol este actuó por un minuto se lavó y escurrió el exceso, después se cubrió con el decolorante alcohol-acetona este actuó por 30 seg. Por último se con el colorante de contraste (safranina o fuschina), actuó por 45 seg. Se hizo la última lavada con

agua y se dejó secar al aire dejando la lámina en posición inclinada.

Luego de que la tinción estuvo seca se colocó el portaobjetos sobre la platina y se sujetó con las pinzas. Se inició la observación con el objetivo 4X; se enfocó y observó la imagen, luego se realizó el mismo procedimiento con los objetivos de 10X, 40X Y 100X para este último se colocó una gota de aceite de inmersión para realizar su buena observación.

1. Registro fotográfico de frotis observado con los diferentes lentes, describa la observación realizada con el objetivo 100x.

Figura 7. Autores[pic 7][pic 8]

Figura 8. Autores

Figura 9. Autores

[pic 9]

Figura 10. Autores

Con el objetivo de 100x se observan bacilos Gram negativos en cadena. (Ver figura 10).

1. Discuta las observaciones realizadas con los diferentes objetivos teniendo en cuenta la resolución y aumento de los mismos

El objetivo 4X tiene, la resolución con el objetivo 100x es muy clara.

[pic 10]

1. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. Cuál es la utilidad del aceite de inmersión en la observación con lente 100X

Este se utiliza para focalizar la luz y centrar el campo visual de la muestra enfocando objetos muy pequeños.

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