Informe sobre calibración de micropipetas

PRÁCTICA 1[pic 1]

CALIBRACIÓN Y MANEJO DE MICROPIPETAS

ANTE H. Andersson Steven; TORRES A, Jessica; VALLEJO L. Juan Fernando; VELASQUEZ D. Cristian. Universidad Santiago de Cali. Facultad de Ciencias Básicas. Programa de Microbiología. Marzo de 2021.

PALABRAS CLAVE

Calibración, micropipetas, volumen, nominal, precisión y exactitud.

RESUMEN

En esta práctica se desarrolla destrezas para el manejo adecuado de micropipetas, ya que estas nos permiten medir volúmenes en cantidades muy pequeñas (μL). Para saber que tan exactos son estos volúmenes, se busca determinar la calibración y exactitud (E%) idóneas de las micropipetas, a través de cálculos numéricos se busca evidenciar el porcentaje de error asociado al manejo inadecuado de estas herramientas.

través de una toma de muestras mínima de diez lecturas, esta última se expresa como

INTRODUCCIÓN

La pipeta automática, también denominada micropipeta, es un instrumento de laboratorio que se utiliza para absorber y transferir pequeños volúmenes de líquido. La calibración de estas es una parte fundamental en diversas prácticas de laboratorio y debe ser considerada como una parte vital de cualquier practica que necesite volúmenes precisos en la transferencia de fluidos y disoluciones con cantidades exactas. Cabe señalar que el uso de micropipetas permite tomar volúmenes de diversos líquidos sin necesidad de lavar el dispositivo, ya que ´para ello se utilizan puntas de plástico desechables, generalmente estériles. Hay varios tipos de puntas, por ejemplo, las amarillas son para pipetas de pequeño volumen y azules para extracciones de muestras de volúmenes más grandes.

En estos procesos para calibración de volumetría también se calculan las desviaciones de inexactitud e imprecisión a

coeficiente de variación (CV). Para mantener la exactitud y precisión incluso a través de los regímenes de pipeteo repetido, las pipetas deben ser calibradas a intervalos periódicos.

La exactitud y precisión de un instrumento de medida es sumamente importante debido a que permite que haya menos errores. Se conoce como exactitud a lo cerca está un resultado de una medición del valor verdadero o teórico; y como precisión, a lo cerca que están los valores medidos, es decir, lo cerca que están unos de los otros. Cuando un instrumento de medida está calibrado se obtienen resultados confiables. La confiabilidad es una medida de determinación de la estabilidad y la consistencia interna del instrumento. Un instrumento es estable y confiable si, aplicado repetidas veces a los mismos fenómenos, bajo las mismas condiciones, arroja resultados consistentes. Eso lo hace preciso y si se acerca al valor teórico se volvería exacto.

MATERIALES Y METODOS

La calibración de micropipetas se realiza por el método gravimétrico, que consiste en la carga con agua destilada del instrumento y la posterior descarga en un recipiente abierto.

1. Se coloca una punta nueva, en el porta-puntas de la pipeta; evitando contaminarla y se verificando que esté bien ajustada.
2. Para estabilizar la humedad del volumen de aire en el interior de la pipeta, se extrajo agua destilada de un beaker y se desechó a otro 5 veces.
3. Se pesa un beaker y se añade agua destilada hasta obtener un nivel de 3 mm en el recipiente.
4. Se registra la temperatura del agua, la presión ambiental y la humedad relativa.
5. Se pone la balanza en cero (0 gr).
6. Se extrae H2O destilada del recipiente de almacenamiento con la micropipeta y se dispensa en el recipiente de pesado, expulsando la

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

En la práctica se utilizaron 2 micropipetas, cada una con diferentes volúmenes. En cada una se utilizaron 2 calibraciones diferentes, esto con el fin de sacar datos para hacer diversos cálculos para determinar la precisión y exactitud de cada una.

Micropipeta 10 – 100 μL

Micropipeta 100 μL – 1000 μL

Las ecuaciones que utilizamos para los cálculos son:

Valor medio:

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