LABORATORIO DE MÉTODOS DE ANÁLISIS . Cromatografía

LABORATORIO DE MÉTODOS DE ANÁLISIS

Practica no.1

“Separación e identificación de aminoácidos de jugo de tuna por cromatografía bidimensional en capa fina”

Grupo        Sección III

INTRODUCCIÓN

La cromatografía es un método físico de separación en el que los componentes a separar se distribuyen entre dos fases, una de las cuales está en reposo (fase estacionaria o lecho estacionario) mientras que la otra (fase móvil) se mueve en una dirección definida. Tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia. 

Cromatografía en capa fina (TLC)

es el máximo exponente de la cromatografía de adsorción. La fase estacionaria de esta técnica es un gel, que puede ser de celulosa, sílica, óxido de aluminio… etc. Es un procedimiento rápido y sencillo para separar mezclas de sustancias y para identificar/caracterizar o para determinar semicuantitativamente componentes individuales. La separación se basa en que las sustancias investigadas se reparten de modo diferencial entre una fase estacionaria y otra móvil: en la TLC la fase móvil se desplaza por una fina capa de la fase estacionaria, transportando así los componentes individuales de la mezcla de sustancias más o menos lejos dependiendo de su solubilidad y/o de su comportamiento frente a la adsorción. El recorrido particular de cada sustancia se emplea así para su identificación. Las separaciones se realizan generalmente por el procedimiento ascendente, introduciendo el borde inferior de la placa cromatográfica en el solvente, que será succionado por acción de las fuerzas capilares del recubrimiento de la superficie de la placa.

Cromatografía Bidimensional

En la cromatografía plana, cromatografía bidimensional se refiere al proceso cromatográfico que hace que los componentes migren primero en una dirección y luego en otra perpendicular a ella; las dos eluciones se llevan a cabo con eluyentes diferentes.

Aplicaciones

En la mayoría de los casos la TLC se realiza cuando se quieren hacer evaluaciones cualitativas rápidas (screening). Las determinaciones cuantitativas son posibles por acoplamiento del equipamiento necesario (unidades de carga, scanner); en estos casos, es mejor recurrir a las placas de HPTLC, porque son más efectivas.

OBJETIVOS

1. Separé los aminoácidos presentes en jugo de tuna por cromatografía bidimensional en capa fina.
2. Identifique los aminoácidos separados por comparación de sus valores de Rr con los de soluciones tipo de aminoácidos.
3. Analizar la importancia de fase móvil para el desplazamiento de los aminoácidos

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RESULTADOS

TABLA 1. CROMATOGRAMAS UNIDIMENSIONALES TIPO DESARROLLADOS EN LAS 2 FASES MÓVILES.

TABLA 2. CROMATOGRAMA BIDIMENSIONAL TIPO DESARROLLADOS EN LAS 2 FASES MÓVILES.

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