Laboratorio N°3 Microscopia Universidad Andres Bello

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Introducción:

A lo largo del tiempo, el ser humano se ha dado cuenta de sus necesidades, y lo que necesita para avanzar, una de estas es, observar células de tan mínimo tamaño, imperceptible para el ojo humano. Es por esto, que el microscopio ha sido, y es una de las herramientas más utilizadas en la biología.

El microscopio es un elemento principal en todos los laboratorios de investigación, es un instrumento que permite observar elementos, organismos, sustancias, que no se ven a simple vista.

El primer microscopio fue inventado, por una casualidad en experimentos con lentes, lo que sucedió de manera similar pocos años después con el telescopio de Hans Lippershey (1608). Entre los años 1590 y 1600, el óptico holandés Zacharías Janssen (1580-1638) inventó un microscopio con una especie de tubo con lentes en sus extremos, de 8 cm de largo soportado por tres delfines de bronce; pero se obtenían imágenes borrosas a causa de las lentes de mala calidad. Estos primeros microscopios aumentaban la imagen 200 veces.  Estos microscopios ópticos no permiten agrandar la imagen más de 2000 veces. [1]

Existen distintos tipos de microscopios, por ejemplo el óptico, contraste de fases, fluorescencia, electrónico, entre otros.

En la actualidad hay mucha tecnología dispuesta para descifrar distintos principios fundamentales que regulan la estructura y la actividad de la célula [2], pero no tan solo sirven para eso, sino para ver todo tipo de estructura no celular que se desee ver.

De esta forma, todos podemos acceder a la utilización del microscopio, para diferentes objetivos, los cuales dependen del trabajo que se dispone a realizar.

En este siguiente informe, se verá como fue el trabajo práctico y teórico de utilización de microscopio para la visualización de diferentes muestras como una letra “e”, un papel milimetrado, frotis de sangre humana, corte de intestino delgado, catafilo de cebolla, elodea sp y protozoos. Todo lo que logramos observar será dispuesto en este informe, trabando de dejar en claro el uso del microscopio y las diferentes estructuras que se pueden observar con distintos aumentos.

Hipótesis: Al ya conocer el funcionamiento y la forma adecuada de usar un microscopio óptico, podemos observar con diferentes objetivos, infinidades de estructuras en cada una de las muestras utilizadas, que son imposibles de ver al ojo humano.

Objetivos del laboratorio práctico

• Aprender la estructura física del microscopio con sus diferentes sistemas que lo componen.
• Distinguir los diferentes poderes que tiene el microscopio y aprender a utilizarlos en la práctica.
• Saber preparar un material para ser luego observado en un microscopio.
• Cálculos con respecto a los poderes y límites de resolución del microscopio óptico, también el diámetro del campo visual y determinación del tamaño celular.
• Realizar de manera correcta una observación en microscopio a través de los oculares, además de poder describirla y esquematizarla.

Materiales y métodos

Actividad 2: En esta actividad, se logra observar una letra “e” impresa contenida en el portaobjetos, lo primero a realizar es colocar la muestra sobre la platina del microscopio, acomodar bien para que quede en un buen campo visual, luego utilizar el lente objetivo 10x. Lo siguiente fue rotar el revolver hasta llegar al otro objetivo 40x y colocar en posición. Por ultimo dibujar lo observado a través de los oculares. En ambos casos la letra “e” se vio de forma invertida.

Actividad 3: Esta actividad consiste en observar los cuadros de un papel milimetrado y cada cuadro equivale a 1 . Primero se toma el porta objeto con el papel milimetrado (que está listo), luego utilizar el objetivo 4x, enfocar con el macrométrico y micrométrico, calcular el campo visual contando la mayor cantidad de cuadros observados. Al final transformar a unidades micrométricas y calcular el campo visual de 10x, 40x y 100x.[pic 6]

Actividad 4: Los pasos a seguir son para observar frotis de sangre (humana) y corte de intestino delgado de Rattus norvegicus (Berkenhout).

En el frotis de sangre humana, la preparación se coloca en la platina del microscopio y se ajusta, se coloca el objetivo inicialmente en 4x luego se enfoca con el micrométrico y luego con el micrométrico para tener mejor nitidez, de este modo luego se pasa a 10x y se enfoca solo con el micrométrico, de la misma manera se cambia de objetivo a 40x que es el objetivo que se pedía en esta actividad.

Para el corte de intestino delgado, se hace de la misma manera, se empieza con el objetivo 4x se enfoca con el macrométrico y luego con el micrométrico, así mismo con 10x y 40x que también era al objetivo que se quería llegar.

Actividad 6: Esta actividad se llevará a cabo de una forma distinta que las anteriores, ya que utilizaremos tinción.

1. Catafilo de cebolla: En un trozo de cebolla, con una hoja de gillete limpia se realiza un pequeño corte transversal al tejido, se levanta cuidadosamente para obtener un trozo adecuado de tejido muy fino. Luego se realizan 3 preparaciones; a  la primera se coloca una gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio, utilizando un gotario y sobre esa gota se ubica el trozo de catafilo de cebolla y se coloca el cubreobjetos. El segundo es con tinción, se pone una gota de azul de metileno a un lado de la muestra en el portaobjetos y se inclina para que el colorante baje y atraviese el tejido. El tercero es con tinción, con lucol y se realiza el mismo procedimiento que con el azul de metileno.

Se hace la observación de cada uno de las 3 preparaciones con el objetivo 10x se enfoca con el micrómetro y luego con el micrométrico.

1. Elodea sp: Primero se preparara la muestra agregando una gota de agua destilada, con el gotario, al portaobjeto y sobre él se deposita una hoja de Elodea sp, se cubre con un cubreobjetos, luego se coloca en la platina y se acomoda, por último se observa a través del microscopio, comenzando con un objetivo 4x y se prosigue aumentando hasta llegar al objetivo 40x que es el pedido inicialmente. Lo que se logra ver es varias células vegetales delimitadas por su correspondiente pared celular.

1. Protozoos: Se comienza por preparas las dos muestras, la primera de Paramacio y la segunda de Euctena, ambas de igual forma. Lo primero fue agregar una gota que contenía a cada especie, cada una a un respectivo portaobjetos y cubrir por un cubreobjetos evitando la formación de burbujas de aire. Se pusieron las muestras en la platina y se acomodaron, se comenzó con el objetivo 4x,  se enfocó con el macrométrico y después con el micrométrico, y se fue rotando el revolver para aumentar el objetivo a 10x, 40x que es el objetivo de la actividad.

Resultados

Actividad 1:

1. Poder de aumento y apertura numérica de los lentes objetivos.

1. Aumento y apertura numérica de los lentes oculares.

1. Apertura numérica del condensador.

1. Resolución máxima.

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