Microbiología: Agar Kligler (Agar Hierro Kligler)

> Agar Kligler (Agar Hierro Kligler)

Es un medio de cultivo que permite la realización de tres pruebas simultáneas: utilización de azúcares (glucosa y lactosa), producción de gas y producción de ácido sulfhídrico. Son medios utilizados preferentemente para la diferenciación de Enterobacteriaceae. En elos se puede determinar las fermentaciones de los hidratos de carbono, la producción de gas y de sulfhídrico. El agar hierro de Kliger contiene dos azúcares: glucosa (0.1%) y lactosa (1%). El medio TSI, además de estos azúcares, lleva incorporado un tercer azúcar: sacarosa (1%). Los fundamentos son los mismos en los dos medios. (1Del Carmen, M. et al. 2006)

El tiosulfato es reducido a H2S quien reacciona con el citrato férrico amoniacal para dar formación al sulfuro de fierro que es de color negro.La presencia de gas se debe al CO2 producto de la fermentación.

En nuestra muestra se notó un cambio en la coloración del agar a amarillo en la base y un levantamiento en la superficie así como un ennegrecimiento, por lo que se concluye que hay fermentación láctica producción de gas y producción de ácido sulfúrico.

> Agar lisina

Esta prueba se utiliza para determinar si un bacilo gramnegativo descarboxila o desamina la lisina. El agar lisina contiene lisina, peptonas, y una pequeña cantidad de glucosa citrato amónico férrico. Cuando se produce la fermentación de la glucosa en el fondo se acidifica (amarillo). Si el microorganismo produce lisina descarboxilasa se forma cadaverina, que neutraliza los ácidos orgánicos formados por la fermentación de la glucosa, y el fondo del medio vuelve al estado alcalino (violeta). Si no se produce descarboxilasa el fondo permanece ácido (amarillo). Si hay desaminación oxidativa de la lisina se forma un compuesto que, en presencia de citrato amónico férrico y una coenzima, flavina mononucleótido, produce un color borgoña en el agar inclinado. Si la desaminación no tiene lugar la superficie del agar inclinado conserva su color violeta. (FORBES, B. 2007)

En nuestra muestra se observa un cambio de color a amarillo, por lo tanto no hay desaminación de lisina.

> Prueba del citrato

Determina si un microorganismo es capaz de utilizar Citrato como única fuente de carbono. El medio utilizado contiene, además de citrato, sales de amonio inorgánicas como fuente de nitrógeno. Los microorganismos Citrato (+) crecen en el medio alcalinizándole, debido a:

* Formación de amonio por desdoblamiento de las sales de amonio

* Producción de carbonatos y bicarbonatos por degradación del Citrato.

El cultivo más utilizado es el Agar inclinado de Simmons. Una prueba positiva se puede detectar tanto por el crecimiento del microorganismo, como por el cambio del indicador de pH debido a la alcalinización del medio. El color inicial es verde y su indicador es el azul de bromotimol, por ello, al dar positiva la prueba cambia de verde a azul el tubo de ensayo. (2Del Carmen, M. et al. 2006)

En nuestra muestra no se evidencia ningún cambio, el color sigue siendo verde, se concluye que no utiliza el citrato.

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