Modelo De Proyecto

Proyecto de Biología General

Primera parte: AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS EN ZONAS

TRANSITADAS DE LA UNIVERSIDAD

El proyecto se hará en grupos de máximo seis estudiantes.

Materiales

Placas de Petri con Agar común (6 cajas por grupo)

Hisopos estériles

Tubos con solución estéril

Micro tubos con solución estéril para colecta de muestras

Marcador para identificar las cajas

Objetivos

1. Aprender técnicas de aislamiento de microorganismos.

2. Poner de manifiesto la presencia de microorganismos en ambientes diversos.

3. Observar el crecimiento de los microorganismos en medio de cultivo sólido.

4. Establecer diferencias en cuanto a la cantidad y tipos de microorganismos

presentes en diferentes ambientes u objetos.

Ejemplos de lugares donde se podrían colectar las muestras

• Ascensores (botones de llamada internos y externos).

• Pasamanos de escaleras (de bajada a las aulas, de bajada a la cafetería, etc.).

• Superficie de una mesa de la cafetería.

Procedimiento para la toma de muestras

1. Una vez en el lugar exacto donde se ha de tomar la muestra, se procederá a

destapar el tubo con solución estéril y el hisopo.

2. A continuación, se introducirá el hisopo en la solución estéril y se empapará,

escurriéndolo después ligeramente sobre la pared del tubo.

3. Seguidamente, se pasará el hisopo por la superficie elegida, rotando el hisopo

por la misma a medida que se va extendiendo y tomando la muestra.

4. El hisopo con la muestra se lavará en un microtubo con solución estéril, de esta

forma los microorganismos quedarán en la solución.

5. Luego se procederá a sembrar por inundación en las cajas Petri. Para esto se

utilizará un ambiente limpio (idealmente una cabina de flujo laminar)

6. Para realizar la siembra adecuadamente, basta con invertir el contenido del

microtubo en la superficie del agar hasta descargar toda la muestra recogida.

7. Las placas serán incubadas a 37o

C durante 24 horas. Luego se guardarán en

refrigeración hasta la segunda parte del proyecto.

Segunda parte: Preparación de placas y observación al microscopio

1. Material

Microscopio

Caja Petri con cultivos de microorganismos (obtenidos en la primera parte)

Tinción de Gram

Floxina

Hisopos estériles

Portaobjetos

Cubreobjetos

Cristalizador y paralelas

Aceite de inmersión

Marcador

Objetivos

1. Distinguir las características macroscópicas de los colonias bacterianas,

levaduras y micelio de hongos.

2. Aprender a montar preparaciones de microorganismos.

3. Enfocar preparaciones de microorganismos con el objetivo 40X y con 100X

(inmersión).

4. Distinguir las características microscópicas de los colonias bacterianas,

levaduras y micelio de hongos.

5. Aprender la técnica de las tinciones mediante el empleo de la tinción simple.

Procedimiento para la preparación de las placas y observación

1. Utilizar cultivos microbianos en cajas Petri.

2. Observar detenidamente las colonias de microorganismos que han crecido en

cada caja con el fin de registrar el número y tipo de colonia presentes.

3. Para las colonias seleccionadas, con la ayuda de un hisopo estéril depositar una

gota del cultivo sobre el portaobjetos y extenderlas sobre la superficie del

portaobjetos. La extensión debe tener aproximadamente 1 cm2 (Figura 1).

4. Para fijar una preparación con calor, se pasa el portaobjetos, por el lado opuesto

a la preparación, por encima de la llama de un mechero. Son suficientes dos o

tres pases rápidos. Para evitar quemaduras se pueden utilizar las pinzas.

5. Una vez fijada, colocar la preparación en las paralelas sobre el cristalizador.

Añadir el colorante a los portaobjetos de uno en uno (Figura 2).

6. En la tinción, los colorantes deben cubrir sólo la superficie de la extensión. Los

lavados con agua (de grifo) deben ser abundantes. Los secados finales deben

realizarse

...