Modelo de cultivo

Fases del modelo de producción del proyecto “ NutraTarapacá”

1)Placas petri (1-1,5%p/v agar + agua de mar + F/2) tiempo máximo 3 meses desde su apertura, se colectan las colonias que se encuentren más separadas se pasan al cultivo en tubos de ensayo de 5 mL

2)Cultivo en tubos de ensayo, cepas. Se agrega 5 mL de agua estéril, mediante la colecta con pipetas pasteurs estériles se depositan las colonias desde la placa Petri. Cambio cada 30 días.

3)Cultivo en matraces de 250 mL. Se esteriliza agua de mar, en un matraz de 2 L, luego se trasvasija en la cámara de transferencia y se le agrega el medio estéril, se flamea el cuello, se adiciona el tubo de ensayo con cultivo , se vuelve a flamear y se tapa con tapón de goma, se rotula, especie, batch, fecha. Para el recambio, se elige el mejor (cualitativamente, ausencia de fondo, espuma, floculos, etc. Color), y se selecciona para hacer replicas, se toma 1 mL del elegido y se hacen n replicas, para línea productiva se sugiere 10 réplicas mínimas., cada 10-15 días.

4)Cultivo en schott de 1 litro, se adiciona el contenido del matraz de 250mL, evitando el fondo, se le adiciona aire a un flujo entre 0,8-1 L min-1 suministrado por la línea de aire, y entregado por un capilar esterilizado por calor seco, se ayuda a filtrar el aire mediante la adición de un algodón estéril en la punta del capilar. Cambio cada 7-10 días, se elige una réplica de una cepa de 250 mL.

5)Cultivo de en matraces de 5 L, se elige una réplica desde los schott de 1L (sin fondo), y se adiciona a 3,5 L de agua de mar estéril, se adiciona medio. Se coloca capilar esterilizado por calor seco y el flujo de aire entre 0,8-1 L min-1. El otro schott se divide en 2 de 1 L, acelerando la producción, esta regla debe respetarse y aumentar si la producción lo necesita. Cultivo entre 7-10 días.

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