PRACTICA #4 “REACCIONES DE COLOR PARA IDENTIFICACIÓN DE AMINOÁCIDOS”

UNIVERSIDAD DE SONORA

DIVISION DE CS. BIOLOGICAS Y DE LA SALUD

DEPARTAMENTO DE CS. QUIMICO-BIOLOGICAS

LIC. CIENCIAS NUTRICIONALES

PRACTICA #4

“REACCIONES DE COLOR PARA IDENTIFICACIÓN DE AMINOÁCIDOS”

ANA VALERIA MACHICHI MAYBOCA

HERMOSILLO, SONORA.                                                                                        12 DE MARZO 2021.

OBJETIVO:

Realizar   las   reacciones   de   identificación   de   aminoácidos y   proteínas: Biuret, Ninhidrina, Millon, Xantoproteica.

• Reacción de Biuret: Identifica proteínas.
• Reacción de la Ninhidrina: Universal para detectar Aminoácidos.
• Reacción de Millon: Identifica Tirosinas en solución o en Proteínas.
• Reacción Xantoproteica: Identifica Tirosina y Triptófano.

PROCEDIMIENTO:

Reacción de Biuret:

 1.Primero marcamos cada tubo de ensaye con el nombre de la muestra.

2.Agregar 1 ml de cada disolución a estudiar en el tubo de ensaye.

3.Y se prepara un tubo de ensaye con agua destilada como blanco.

4.Añadir 1 ml de reactivo de Biuret a cada tubo y agitar.

5. Esperar 15 minutos y anotar los resultados.

Reacción de la Ninhidrina:

1. Primero marcamos cada tubo de ensaye con el nombre de la muestra.

2. Agregar 1 ml en cada disolución a estudiar en el tubo de ensaye.

3. Añadir siete gotas de Ninhidrina a cada tubo.

4. Calentar los tubos en baño de agua a 100 °C por 10 minutos.

5.Observar y anotar resultados.

Reacción de Millon:

1.Marcamos cada tubo de ensaye con el nombre de la muestra.

2. Agregar 1 ml de cada disolución a estudiar en el tuyo de ensaye.

3. Agregar cinco o seis gotas de reactivo de Millon a cada tubo de ensaye y mezclar.

4. Poner a calentar hasta la aparición de un color rojizo.

5.Observar y no están los resultados.

Reacción Xantoproteica:

1. Marcamos cada tubo de ensaye con el nombre de la muestra.

2. Agregar 1 ml de cada disolución a estudiar en el tubo de ensaye.

3. Añadir mililitro de ácido nítrico concentrado a cada tubo.

4. Poner a calentar hasta la aparición de un color amarillo.

5. Observar y anotar los resultados.

FUNDAMENTOS TEORICOS:

Reacción de Biuret: La muestra debe contener al menos dos enlaces peptídicos para que se pueda formar un complejo de color violeta-púrpura. El complejo se forma por la unión de los enlaces y el ión de cobre.

Reacción de Ninhidrina:  la ninhidrina es un agente oxidante poderoso y lleva al cabo la deaminación oxidativa de los grupos a-amino, liberando amoniaco, dióxido de carbono y el correspondiente aldehído, así como la forma reducida de la ninhidrina.  El amoniaco entonces reacciona con un mol adicional de ninhidrina oxidada y un mol de ninhidrina reducida para dar una sustancia de color azul violeta, que presenta un máximo de absorción a 570 nanómetros.

Reacción de Millon: El reactivo es una solución de Nitrato Mercúrico con Ácido Nítrico.  El color rosa rojo que se forma al reaccionar la Tirosina con el reactivo, se cree que se debe a un complejo Mercúrico con los derivados nitrógeno.

Reacción Xantoproteica: La reacción es debida a la nitración del anillo bencénico con el ácido nítrico concentrado, para dar productos de color amarillo, que se tornan anaranjados al añadir álcali, debido a la formación de sales. En las condiciones del experimento solo la Tirosina y el Triptófano darán positiva la prueba. La fenilalanina es más difícil de nitrar, para lo cual requeriría ácido sulfúrico como catalizador.

OBSERVACIONES Y RESULTADOS:

Reacción de Biuret:

Reacción de la Ninhidrina.

Reacción de Millon.

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