SOLUCIONES BUFFER

PRACTICA DE PREPARACION DE SOLUCIONES BUFFER PARA EXTRAER ADN

RESULTADOS

CÁLCULOS

1 mol NaCl 58,44 mol/g

5 moles x

X= 292,2 moles

1000 ml 292,2 gramos

20 ml x

X= 58,44 g / 1000 mol

X= 5,844 g

1 mol TRIS HCl 157,64 g

1000 ml 157,64 g

20 ml x

X= 3,1528 g

EDTA 0,5 M

1 mol 372,24 g

0,5 mol x

X= 186,12 g

1000 ml 186,12 g

20 ml x

X= 3,7724 g

SDS

288,38 g/mol

G soluto= L sln x % p/v = 0,02 L x 10% p/v= 2 g

X= 0,002 g

ACETATO DE AMONIO

PM= 77,08

X= 11,06 g

PARA PREPARAR LAS SOLUCIONES

NaCl: 5,8 en 20 ml de agua destilada.

TRIS: Se debe calentar, se ajusta pH adicionando 4 gotas de NaOH.

42 gotas NaOH pH= 8,00

EDTA: se calienta 5 ml, luego se adiciona NaOH perla hasta llegar al valor de pH indicado en el procedimiento. Al adicionar 14 gotas se logra un pH de 8,02.

CANTIDADES DE REACTIVOS TARA PREPARAR 5 ml DE SOLUCIÓN BUFFER:

NaCl (5M) 0,5 ml

TRIS (0,2 M) 1 ml

EDTA (10 mM) 0,1 ml

SDS (1% p/v) 0,5 ml

CALCULOS DE LA PRACTICA DE ELECTROFORESIS

Para preparar el gel de agarosa, primero se realzó el cálculo de la cantidad que se utilizó

%p/v=(gr soluto)/(Litro de solucion) *100

gr soluto=(0.8%*50 ml)/(100 ml)=0.4 gr de agarosa

Se diluyó la agarosa a 340 rpm a 240°C, luego se le agregó 50 ml de tampón y se dejó enfriar hasta alcanzar una temperatura de 60°C.

Se agregaron 3 ml de Syber Safe (DNA gel stain)

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