TECNÓLOGO EN PROCESAMIENTO DE ALIMENTOS.

SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE[pic 1]

CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS

TECNÓLOGO EN PROCESAMIENTO DE ALIMENTOS

DETERMINACION DE PRESENCIA Y/O AUSENCIA

 Vibrio chorelae

JUAN GUILLERMO CUBILLOS HINOJOSA

Microbiólogo Agroindustrial (c) MSc.

1. INTRODUCCION

Vibrio chorelae pertenece a la familia Vibrionaceae, género Vibrio. Es un bacilo pequeño, gram negativo, no esporulado, aerobio y anaerobio facultativo, curvo, móvil mediante un flagelo polar único, no encapsulado, oxidasa positivo.

El Vibrio chorelae O1 es el agente causal del cólera, enfermedad diarreica producida por una toxina segregada por el microorganismo en el intestino, suele presentarse en comunidades donde las practicas de higiene son muy deficientes. Esta especie se divide en dos biotipos el Clasico y el Tor, y puede pertenecer a los serotipos Ogawa, Inaba e Hikojima.

1. OBJETIVOS

• Adquirir destreza en la determinación de Vibrio chorelae.
• Analizar los resultados obtenidos por la muestra analizada conforme a la normatividad.

1. MATERIALES

Agua pertonada alcalina con 225mL

Agar Tiosulfato Citrato Sales Biliares de Sacarosa (T.C.B.S.)

Agar nutritivo

Agar Infusión Cerebro Corazón (BHI)

Agar Hierro Triple Azucar (TSI)

Peroxido de hidrogeno

Cajas de Petri

Incubadora

Erlenmeyer

Pipetas

Gradillas

Asas microbiológicas

Cuchillos, tenedores y cuchara

Balanza

Papeles de pesado

Porta objetos

1. METODOLOGIA

Preparación de la muestra

Para pescado entero se debe remover la carne alrededor de las tripas, agallas y piel, para conformar la unidad de la muestra necesaria para el análisis. Para los crustáceos partir en trocitos pequeños extrayendo únicamente la carne.

Procedimiento

1. Pesar 25g del total de la muestra.
2. Adicionarlo en un erlenmeyer que contiene 225mL de agua peptonada alcalina (pH 8.5).
3. Agitar e incubar a 35°C+/-2, durante 6-8h.
4. Pasado el tiempo de incubación (sin agitar el erlenmeyer) tomar una azada y sembrar por agotamiento en caja de Petri que contiene agar TCBS por duplicado.
5. Incubar las cajas a 35°C+/-2 durante 18-24h.

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                                   35°C+/-2

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        Incubar por 6-8h

            35°C+/-2

1. Em caso de que observe lãs colônias típicas de V. chorelae, se deben tomar un mínimo de tres colonias y sembrarlas en Agar nutritivo o BHI por estrías e incubarlas a 35°C+/-2 por 18-24h.
2. Seguidamente, realizar la prueba de oxidasa.

1. LECTURA DE RESULTADOS

• Después de transcurrido el tiempo de incubación, obsérvese las colonias típicas de V. chorelae en agar TCBS: colonias grandes (2-3mm) lisas, amarillas y ligeramente aplanadas, con el centro opaco y la periferia traslucida y reacción positiva a la de oxidasa.

1. EXPRESIÓN DE RESULTADOS

• De acuerdo con los resultados de la interpretación, se indica la presencia o ausencia de V. chorelae  en una porción de x g de producto.

1. BIBILOGRAFIA

• AOAC. 2005. Método 988.20 Detección de Vibrio chorelae.
• ICONTEC. 2009. Norma Técnica Colombiana NTC 4092. Microbiología de alimentos y productos para alimentación animal. Requisitos generales y directrices para análisis microbiológicos.
• INVIMA. 1998. Manual de técnicas de análisis para control de calidad microbiológico de alimentos para consumo humano..

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