COLORANTES HISTOLOGICOS MÁS COMUNES

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1. MARCO TEÓRICO

La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos. Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno el lugol y el hematoxilina. 

Si se desea simplemente incrementar el contraste de las células para la microscopía, son suficientes los procedimientos simples de tinción. El azul de metileno es un buen colorante simple que actúa sobre todas las células bacterianas rápidamente y que no produce un color tan intenso que oscurezca los detalles celulares. Es especialmente útil para detectar la presencia de bacterias en muestras naturales, puesto que la mayor parte del material no celular no se tiñe.

COLORANTES HISTOLOGICOS MÁS COMUNES

Los diferentes colorantes reaccionan o se concentran en diferentes partes de las células o tejidos, y estas propiedades son utilizadas como una ventaja para revelar partes o áreas específicas. Algunos de los colorantes biológicos más comunes se listan más abajo. A menos que se indique lo contrario la mayoría de estos colorantes se utilizan con células y tejidos fijados.

1. Lugol

El almidón es una sustancia muy común en la mayor parte de las células vegetales, de modo que una solución diluida de yodo puede colorear el almidón presente en las células. La solución de logul o Lugol yoduro (IKI) es una solución de color marrón que se torna negra en presencia de almidones y puede ser utilizada para colorear células, haciendo más visible el núcleo. En la coloración de gram el yoduro se utiliza como mordiente, aumentando la capacidad del colorante para entrar en las células a través de los poros presentes en la membrana o pared celular.

1. Azul de metileno

El azul de metileno se utiliza para teñir células animales, para hacer más visibles sus núcleos. Es también utilizado para teñir los extendidos de sangre para ser utilizados en citología y como colorante vital en el recuento de reticulocitos.

1. MATERIALES Y PROCEDIMIENTO

1. MATERIALES.

En el presente trabajo se emplearon los siguientes materiales:

 Catafilo de una cebolla, microscopio óptico, goteros, colorantes (azul de metileno y lugol ) porta objetos y cubre objetos. El procedimiento descrito fue realizado de la siguiente manera.

1. PROCEDIMIENTO.

1. OBSERVACION DE LA  CELULA DE CATAFILO DE  CEBOLLA SIN COLORACION EN FRESCO

DESCRIPCION Y PASOS DE LA ACTIVIDAD

• Extraer cuidadosamente un trozo de catafilo de cebolla (tela de cebolla)
• Colocar el trozo de tela de cebolla en el porta objeto y cubrirla con el cubre objeto.
• Realizar observaciones al microscopio e identificar las partes

En resumen en esta actividad se procedió a extraer la tela más delgada de una cebolla (catafilo de cebolla), de esta se cortó un trozo para ponerla en un porta objeto y hermetizarla con un cubreobjetos para así poder ser analizada mediante un microscopio.

Comencé a observar la muestra con el objetivo de menor aumento(x4). Observe que está formada por células alargadas y poligonales, Se distingue una pared celular muy delgada. También fueron observados con los lentes de x10 y x40  no fue posible ver el núcleo..

Estas células fueron observadas sin tinción (o coloración), posteriormente se le aplico azul de metileno (tinción de color azul) y lugol (tinción de color rojo anaranjado). Con estas tinciones las células se pudieron ver con más detalles, sobresaliendo aún más algunas otras partes.

1. OBSERVACION DE LA  CELULA DE CATAFILO DE  CEBOLLA CON AZUL DE METILENO

PROCEDIMIENTO DE LA ACTIVIDAD

1. Del trozo de cebolla desprende una fina membrana delgada y translúcida que está unida en su cara interna.
2. Coloca un trozo de ésta membrana, llamada catafilo, sobre un portaobjetos. Cuidando que no se formen pliegues.
3. Se vierten unas gotas de colorante (Azul de Metileno), cubriendo el trocito.
4. Colocar el cubre objeto y observar la muestra en el  microscopio.

La estructura  aunque no se pueda observar en su totalidad con este método es la típica de una célula vegetal. Comencé  a observar la muestra con el objetivo de menor aumento(x4) esto me sirvió para calibrar enfocar. Observe que está formada por células alargadas y poligonales, con un núcleo en un lateral y algunas en medio. Se distingue algunos   núcleos y se resalta (líneas más gruesas) la pared celular en la muestra, además que el citoplasma esta también teñido de azul.

1. OBSERVACION DE LAS CELULAS DE CATAFILO DE LA CEBOLLA CON LUGOL

PASOS Y DESCRIPCION DE LA ACTIVIDAD

1. Del trozo de cebolla desprende una fina membrana delgada y translúcida que está unida en su cara interna.
2. Coloca un trozo de ésta membrana, llamada catafilo, sobre un portaobjetos. Cuidando que no se formen pliegues.
3. Se vierten unas gotas de colorante ( lugol ), cubriendo el trocito de catafilo.
4. Colocar el cubre objeto y observar la muestra en el  microscopio

Observe que las células vegetales son forma hexaédrica (en celdas) y alargadas. En el Objetivo x40 logre diferenciar la pared celular, el núcleo y el citoplasma. La pared celular se reconoce como una línea no tan gruesa en comparación con la muestra de azul de metileno, destaca el  núcleo  es esférico en menor intensidad que la pared celular  y se ubica en la región media o lateral.

1. RESULTADO

En el presente trabajo se obtuvo el siguiente resultado,

• En el catafilo de la cebolla se  observaron las células vegetales dispuestas uniformemente en formas geométricas, unidas entre sí, mediante el contacto de sus paredes celulares. La pared celular  puede reconocer como unas líneas gruesas, el núcleo que está situado lateralmente también el citoplasma que rodea a este y limita con la pared celular.
• También se debe destacar que al utilizar colorantes para la visualización de muestras a través del microscopio óptico, podemos identificar estructuras propias de la célula vegetal que sin teñir no se vería, como el núcleo que quedo más resaltado con el lugol o el azul de metileno que resalto en mayor medida la pared celular.

RESULTADO DE LA CELULA DE CATAFILO SIN COLORANTES

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