Reconocimiento Proteinas

PRACTICA No.4

RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS

Muchas de las propiedades fisicoquímicas y biológicas características de las proteínas son reflejo de los aminoácidos que las constituyen y las reacciones de tipo cualitativo se utilizan para su detectar la presencia de un aminoácidos específicos.

1. Coagulación de Proteínas

Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formación de coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70 ºC al ser tratadas con soluciones ácidas y alcohol, etc. La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados anteriormente, que al actuar sobre la proteína la desordenan por la destrucción de su estructura terciaria y cuaternaria.

Técnica:

Para ver la coagulación de las proteínas se utilizara Albúmina y Caseína.

1. Colocar en un tubo de ensayo una pequeña cantidad de Albúmina.

2. Colocar en un tubo de ensayo una pequeña cantidad de Caseína.

3. Añadir 5 gotas de acido acético (CH3COOH) y calentar el tubo a la llama del mechero.

4. Anotar Resultados Obtenidos

Reacción Xantoproteica

Es debida a la formación de un compuesto aromático nitrado de color amarillo, cuando las proteínas son tratadas con Acido Nítrico concentrado (HNO3). La prueba es positiva en aquellas proteínas con aminoácido portadores de grupos bencénicos, especialmente en presencia de Tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con una Base (Hidróxido de Sodio al 40% NaOH) vira a un color anaranjado oscuro.

Técnicas:

1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de solución problema (Albúmina ó Caseína).

2. Añadir 1 cc. de HNO3 concentrado.

3. Calentar al baño maría a 100 ºC

4. Anotar Cambios de tipo Cualitativo

5. Enfriar en agua fría.

6. Añadir gota a gota una solución de NaOH 40%

7. Anotar Cambios de tipo Cualitativo.

Reacción de Biuret

La producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptídico (-CO-NH-) que se destruye al liberarse los aminoácidos. Cuando una proteína se pone en contacto con una Base (Hidróxido de Sodio al 40% NaOH), se forma una sustancia compleja denominada Biuret, de fórmula:

La sustancia Biuret entra en contacto con una solución de sulfato cúprico pentahidratado (CuSO4.5H2O) diluida, da una coloración violeta característica.

Técnica:

1. Tomar un tubo de ensayo y poner 3 cc. de la solución

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