RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS

RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS

OBJETIVOS

-Determinar cualitativamente, mediante una reacción de color la presencia de proteínas

FUNDAMENTO

Las proteínas son elementos vitales para los organismos, encontrándose en plantas y animales en una proporción elevada. Hay una gran variedad de proteínas y cada una desempeña una función biológica específica que puede ser de reserva, de sostén, transporte, estructural, etc. Químicamente las proteínas están constituidas por combinaciones complejas de carbono, hidrogeno, oxigeno, nitrógeno y otros elementos en menor proporción como son azufre cobre y fosforo, debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar, formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc. La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados, que al actuar sobre la proteína la desorganizan, por destrucción de sus estructuras secundaria y terciaria. Esto trae como consecuencia la pérdida de la actividad biológica. Este método es utilizado para demostrar la presencia de proteínas: albúminas, globulinas, glutelinas y prolaminas etc. La positividad se manifiesta por la formación de un coágulo, no se conoce exactamente el mecanismo de reacción, se cree que ocurre cierta deshidratación de la molécula proteica, es por ello que la formación de este solido fácilmente observable, está asociada a la disminución de solubilidad de la proteína. También se puede identificar proteínas mediante el uso de sustancias que al ponerse en contacto con ellas, producen una coloración específica, tal es el caso de la Reacción de Biuret.

Las proteínas ocupan un lugar de máxima importancia entre las moléculas constituyentes de los seres vivos (biomoléculas). Prácticamente todos los procesos biológicos dependen de la presencia o la actividad de este tipo de moléculas. Bastan algunos ejemplos para dar idea de la variedad y trascendencia de las funciones que desempeñan. Son proteínas:

• Casi todas las enzimas, catalizadores de reacciones químicas en organismos vivientes;
• Muchas hormonas, reguladores de actividades celulares;
• La hemoglobina y otras moléculas con funciones de transporte en la sangre;
• Los anticuerpos, encargados de acciones de defensa natural contra infecciones o agentes patógenos;
• Los receptores de las células, a los cuales se fijan moléculas capaces de desencadenar una respuesta determinada;
• La actina y la miosina, responsables finales del acortamiento del músculo durante la contracción;
• El colágeno, integrante de fibras altamente resistentes en tejidos de sostén.

Funciones de reserva. Como la ovoalbúmina en el huevo, o la caseína de la leche.

Todas las proteínas realizan elementales funciones para la vida celular, pero además cada una de éstas cuenta con una función más específica de cara a nuestro organismo.

Debido a sus funciones, se pueden clasificar en:

• Catálisis: Está formado por enzimas proteicas que se encargan de realizar reacciones químicas de una manera más rápida y eficiente. Procesos que resultan de suma importancia para el organismo. Por ejemplo la pepsina, esta enzima se encuentra en el sistema digestivo y se encargan de degradar los alimentos.
• Reguladoras: Las hormonas son un tipo de proteínas las cuales ayudan a que exista un equilibrio entre las funciones que realiza el cuerpo. Tal es el caso de la insulina que se encarga de regular la glucosa que se encuentra en la sangre.
• Estructural: Este tipo de proteínas tienen la función de dar resistencia y elasticidad que permite formar tejidos así como la de dar soporte a otras estructuras. Este es el caso de la tubulina que se encuentra en el citoesqueleto.
• Defensiva: Son las encargadas de defender al organismo. Glicoproteínas que se encargan de producir inmunoglobulinas que defienden al organismo contra cuerpos extraños, o la queratina que protege la piel, así como el fibrinógeno y protrombina que forman coágulos.
• Transporte: La función de estas proteínas es llevar sustancias a través de todo el organismo donde son requeridas. Proteínas como la hemoglobina que lleva el oxígeno por medio de la sangre.
• Receptoras: Este tipo de proteínas se encuentran en la membrana celular y llevan a cabo la función de recibir señales y para que la célula así pueda realizar su función. El acetilcolina que recibe señales para producir la contracción muscular.

MATERIAL Y MÉTODO

• Tubos de ensayo
• Pipetas
• Vaso de precipitado
• Mechero bunsen

Reactivos

• Ácido nítrico concentrado
• Albumina de huevo
• Sulfato cúprico o cobre II
• Hidróxido de sodio al 20% y 40%
• Acetato de plomo
• Agua

La metodología consta en la observación y explicación

PROCEDIMIENTO

Reacción De Biuret Inkiosa

1. Se toma un tubo de ensayo y se colocan tres centímetros cúbicos de albúmina, es decir, la clara.
2. Se añaden 1 a 2 ml de solución de hidróxido de sodio al 20%.
3. Homogenizar por agitación y agregar 4 o 5 gotas de solución de sulfato de cobre al 1%.
4. Observar que sucede.

Reacción Xantoproteica

1. Colocar 3 ml de albumina en un tubo de ensayo limpio y seco.
2. Agregar 1 ml de ácido nítrico concentrado.
3. Observar hasta la formación de un precipitado blanco lechoso
4. Llevar al calor del mechero y observar
5. Dejar enfriar
6. Por último, agregar gota a gota NaOH al 40% y observar

Reacción De La Cistina

1. En un tubo colocar 3ml de albumina
2. Agregar 0.5ml de NaOH al 40%
3. Llevar al mechero
4. Agregar unas gotas de acetato de plomo al 10%
5. Calentar al mechero
6. Observar

RESULTADOS

[pic 1]

Vemos que la prueba da positiva ya que se torna de un color lila, como se ve en la imagen.

[pic 2]

Se puede observar una pequeña parte de color naranja lo que significa que la prueba es positiva en la reacción xatoproteica.

[pic 3]

Vemos el cambio de color a un café oscuro casi negro el cual nos da una prueba positiva de aminoácidos azufrados.

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