Metodologia

Virus de la hepatitis B

Solo hasta los años 60 fue descrito el virus B como uno de los agentes responsables de la hepatitis sérica. El virus presenta un estrecho rango de huéspedes posiblemente restringido a los

seres humanos y algunos primates. Los seres humanos serían el único reservorio conocido para

nuevas infecciones humanas. Son capaces de inducir persistencia de la infección con formas

virales en el hígado y sangre durante años o de por vida. La infección persistente puede estar

acompañada de escasa enfermedad hepática o ninguna, pero es común la hepatitis crónica

persistente o activa. La expectativa de vida de los pacientes infectados por el VHB se ve

acortada por el riesgo significativo de desarrollar cirrosis y carcinoma hepatocelular.

TAXONOMÍA Y CLASIFICACIÓN

El virus de la hepatitis B (VHB) pertenece a una familia de virus animales denominada Hepadnaviridae y es un hepadnavirus junto a otros virus relacionados como el virus de la hepatitis

de la marmota, el de la hepatitis de la ardilla terrera y el de la hepatitis del pato de Pekín.

Todos ellos son virus ADN hepatotrópicos. El VHB es el único que infecta al hombre. Estos

virus tienen un moderado rango de hospederos, tropismo por los hepatocitos y la producción

in vivo, en los hepatocitos, de: gran cantidad de envolturas virales no infecciosas (secretadas

a la circulación) y partículas virales infecciosas.

CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES

Es un virus de forma esférica de 42 nm de diámetro (partícula de Dane). Posee una envoltura

de 7 nm de espesor que contiene las proteínas que forman el antígeno S (o antígeno Australia),

HBsAg, y glucoproteínas y lípidos celulares. Dentro de la cubierta encontramos la nucleocápside de 28 nm de diámetro que forma el antígeno del core de la hepatitis B, HBcAg. En

el interior de ésta se sitúa el genoma y una enzimas con actividad ADN polimerasa (incluida

transcriptasa inversa) y con actividad proteinquinasa

El HBsAg está representado por tres polipéptidos codificados por VHB designados grande,

mediano y pequeño, y por lípidos derivados del huésped. La proteína pequeña está codificada

por la región S del gen S, la proteína mediana está codificada por las regiones pre-S2 y S del

gen S, y la proteína grande está codificada por las regiones pre-S1 + pre-S2 y S del gen S delgenoma del HBV. Las glucoproteínas del HBsAg contienen un determinante específico de

grupo (a) y determinantes tipo-específicos (“d” o “y”, “w” o “r”), habiéndose identificado los

subtipos: adw, adr, ayw y ayr, útiles como marcadores epidemiológicos. Estos subtipos están

distribuidos geográficamente alrededor del mundo, siendo el subtipo adw el que predomina

en las Américas. También se ha descrito heterogeneidad antigénica del determinante w y

determinantes adicionales como j, k, q, etc. El determinante a puede generar inmunidad

protectora contra virus de cualquier subtipo, y los determinantes de subtipo parecen generar

protección específica de subtipo.

La nucleocápside consiste en 180 monómeros de proteínas arreglados en forma icosaédrica.

Están codificados por el gen C (central o de la nucleocápside). Cuando los polipéptidos se

ensamblan formando el core se manifiesta la especificidad de antígeno, HBcAg. Una forma

truncada de esta proteína posee especificidad de “antígeno e” (HBeAg). El marco de lectura

del gen C incluye una región pre-C. Cuando se inicia la traducción a partir de esta región se

secreta el polipéptido truncado con especificidad HBeAg. Este, a diferencia del HBcAg se

encuentra en forma soluble y es un indicador de replicación viral.

También se observan otras entidades morfológicas en varias proporciones. Las formas

más numerosas son las partículas esféricas pleomórficas, no infecciosas, con un diámetro que

varía entre 17-25 nm; se ven también formas tubulares o filamentosas de varios largos pero

con diámetros similares a los de las partículas pequeñas. Estas partículas son producto de la

síntesis en exceso de la cubierta o envoltura.

GENOMA VIRAL

Está compuesto por una pequeña molécula de ADN de doble cadena incompleta de 3,2 kb.

La cadena de polaridad negativa es la completa, circular pero no cerrada, con un polipéptido

covalente en el extremo 5´ que probablemente funcione como “primer”. La cadena corta,

incompleta, de polaridad positiva tiene una longitud variable (15-60% de la cadena negativa). El extremo 3´ de la cadena negativa tiene una ADN polimerasa capaz de completarla,

formando un ADN circular de doble cadena completa en el inicio del ciclo de replicación.

La cadena negativa es la que posee la totalidad de la información genética. Posee cuatro

marcos abiertos de lectura (MAL): S, C, P y X, cada uno de los cuales codifica la síntesis de

una proteína vírica distinta: HBsAg, HBcAg, DNA-polimerasa y la proteína X, que interviene

en el proceso de replicación del virus. Estas regiones del ADN se superponen parcialmente

entre sí, de manera que la cadena es leída una vez y media (figura 3). Esta característica

permite incrementar la capacidad codificante del ADN viral más pequeño conocido que

infecta a mamíferos.

El ADN de VHB se encuentra en los hepatocitos no solo en las formas episomales, sino

también integrados al ADN celular. Se desconoce si esta integración ocurre en todas o solo

en algunas células infectadas y si el ADN viral se encuentra en muchos sectores del ADN

celular. La integración del ADN viral al ADN celular interrumpe el genoma viral por lo que

no se produce replicación viral a partir de las secuencias integradas en células hepáticas

infectadas. Por lo tanto la integración no forma parte del proceso de replicación viral como

ocurre en los retrovirus. Sin embargo se pueden expresar algunos genes virales, habitualmente

el gen del antígeno de superficie.

REPLICACIÓN

El ciclo replicativo comienza con la adsorción y entrada del virus a la célula. Se han descrito

dos mecanismos relacionados con receptores celulares: uno asociado a la proteína media del

HBsAg que tiene la capacidad de ligar albúmina humana polimerizada, ésta actuaría como

puente en la utilización de los receptores de albúmina del hepatocito. El otro mecanismo

relaciona a la proteína grande de HBsAg con la capacidad de utilizar los receptores para IgA

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