ACTIVIDAD ENZIMATICA

Introducción

Las enzimas catalizan las reacciones disminuyendo la energía libre de activación necesaria para que las mismas ocurran. La molécula sobre la cual la enzima actúa se denomina sustrato, esta molécula se transforma obteniéndose el producto. La molécula de enzima no se modifica al término de la reacción y puede continuar catalizando la misma repetidas veces.

La sacarosa, conocida comúnmente como azúcar de mesa, está constituida por la asociación de una molécula de α-D-glucopiranosa (glucosa) y una molécula de β-D-fructofuranosa (fructosa).

Su hidrolisis enzimática se hace a nivel del puente de oxígeno del lado de la glucosa por medio de una glucosidasa o del lado de la fructosa con la intervención de una β-fructosidasa.

En ambos casos la hidrolisis da siempre los mismos productos. Estas enzimas se reúnen bajo el nombre de invertasas.

En el siguiente practico realizaremos una hidrolisis de sacarosa a partir de invertasas extraídas de la levadura, donde posteriormente comprobaremos su acción, tiñendo las muestras en presencia de los productos finales (glucosa y fructosa por separados).

Resultados

Resultados de los Tubos:

Tubo 1: Azul (-)

Tubo 2: Azul (tendió a cambiar) (-)

Tubo 3: Rojo (+)

Tubo 4: Azul (-)

Tubo 5: Rojo (+)

Tubo 6: Rojo (+)

Tubo 7: Rojo (+)

Tubo 8: Rojo (+)

Tubo 11: Azul (-)

Tubo 12: Azul (-)

A partir de su experiencia en el práctico, responda:

1- ¿Qué es el reactivo de Fehling y que es lo que reconoce?

El reactivo de Fehling es una disolución que se utiliza como reactivo para la determinación de azúcares reductores. Sirve para reconocer la presencia de glucosa o fructosa.

2- ¿Por qué la reacción de Fehling es negativa con sacarosa y positiva con los productos de la hidrolisis por invertasa?

Porque el reactivo de Fehling no reconoce a la sacarosa como tal, sino que la reconoce hidrolizada por la invertasa, es decir reconoce a los subproductos de esta por separados, Estos son la glucosa y la fructosa.

3- En el protocolo experimental realizado, cuál es el rol del NaOH agregado a algunos de los tubos?

a. Es el sustrato sobre el que actúa la enzima.

b. Acelera la reacción entre la enzima y el sustrato.

c. Desnaturaliza la enzima por alterar su sitio activo.

d. Bloquea el sitio activo de la enzima.

4- ¿Cuál es el objeto de realizar el primer tubo de la serie -el cual contiene sólo sacarosa?

El primer tubo de ensayo que contiene solo sacarosa, lo empleamos como muestra blanco ya que nos permitió identificar la actividad enzimática en los siguientes tubos, debido

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