Informe De Actividad Enzimatica

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS Y BIOQUÍMICA

LABORATORIO DE BIOLOGÍA GENERAL

Estudiante: Anderson Aguinda Fecha: 3 de enero del 2013

Semestre: Segundo “U” Bioquímica

TEMA:

“ACTIVIDAD ENZIMÁTICA”

1. INTRODUCCIÓN.

En una gran proporción de casos, la enzima propiamente dicha, o sea la proteína, no basta para ejercer su acción catalítica, sino que requiere de otras moléculas de bajo peso molecular y de naturaleza no proteica para llevar a cabo su función como catalizador biológico. A estas otras moléculas, juegan un papel importante en la función catalizadora de las enzimas, se les llama coenzimas, o también grupos prostéticos. Su naturaleza química precisa y su función en la catálisis se estudiarán posteriormente. Por ahora basta decir que la única diferencia entre la coenzima y un grupo protético es que la primera esta unida laxamente a la proteína, mientras que en el segundo esta unido firmemente a ella, y que una y el otro constituyen parte fundamental de la enzima completa, o mejor dicho, de un sistema enzimático completo. Para referirse específicamente a la parte proteica (proteína) del sistema enzimático, se le da a ésta el nombre de apoenzima. Además de las coenzimas y grupos prostéticos, muchas enzimas requieren la presencia de activadores, que son iones metálicos, generalmente cationes como el Mg 2+, Ca 2+ o el Zn 2+ que también deben considerarse parte del sistema enzimático. (PEÑA, 1988)

2. OBJETIVOS.

General.

• Determinar los factores de la actividad enzimática de la catalasa y la amilasa.

Específicos.

• Demostrar como se produce la acción de la catalasa mediante la muestra de células animales.

• Observar la presencia de la acción de la amilasa a través del agar de almidón.

3. MATERIALES

- 100 semillas de cebada germinada

- 20 semillas de maíz germinado.

- 1 hígado de res en buen estado

- 2 frascos de agua oxigenada

- yoduro de potasio

- arena fina

- mechero y fósforos

- cajas petri con agar almidón (10% w/v)

- Lugol

- Palillos de dientes

- Tubos de ensayo

4. PROCEDIMIENTO.

Acción de la catalasa.

- Colocar 5ml de agua oxigenada en cinco tubos de ensayo.

- En el primer tubo colocar un poquito de arena fina. Tapar el tubo con el dedo pulgar y agitar fuertemente.

Observar lo que ocurre. Luego colocar un palillo incandescente en al boca del tubo. Observar lo que ocurre.

- En el segundo tubo agregar un poquito de yoduro de potasio. Proceder como en el caso anterior.

- En el tercero agregar un pedazo pequeño de hígado. Proceder como en el caso anterior.

- En el cuarto colocar un poquito de hígado molido (proceso realizado en un mortero y con la ayuda de arena fina). Proceder como en el caso anterior.

- Finalmente, hervir un pedazo pequeño de hígado por cinco minutos, y luego colocar en el quinto tubo. Proceder como en el caso anterior.

Acción de la amilasa.

- Etiquetar el reverso de tres cajas petri que contienen agar-almidón de la siguiente manera: control, hervido, sin hervir.

- Licuar unos los granos germinados (por separado) germinados con 20 ml de agua destilada. Filtrar el extracto y dividirlo en partes iguales en dos recipientes (tubos de ensayo o vasos de precipitación de 50 ml).

- Colocar uno de los recipientes en agua hirviendo por 10 minutos.

- Colocar 3 gotas de cada extracto en las cajas marcadas como hervido y sin hervir, con las muestras correspondientes. No añadir nada en la caja marcada como control.

- Incubar las cajas en la oscuridad a temperatura ambiente por 36 horas.

- Lavar con agua destilada la superficie del agar-almidón, escurrir el agua y cubrir la superficie con lugol. Dejar actuar el colorante por 1 minuto.

- Escurrir el lugol y observar los resultados.

5. RESULTADOS.

 Anotar todos los resultados de cada uno de los experimentos. En el caso de la catalasa, anotar la velocidad de la reacción, presión de oxígeno en el tubo, si se enciende o no el palillo incandescente.

TABLA # 1. Datos de la acción de la catalasa.

Tubo de ensayo Observaciones

Tubo 1

(Agua oxigenada + arena)

Tuvo una reacción lenta porque el palillo estaba un poco incandescente y se produjo oxigeno en menor cantidad por la cantidad de microorganismos y porque hay catalasa en menor cantidad.

Tubo 2

(Agua oxigenada + Yoduro de potasio) Al agitar el tubo de ensayo la reacción moderada y una presión de oxigeno por ende moderado y pudo mantener el palillo encendido que estaba incandescente

Tubo 3

(Agua oxigenada + hígado) Al agitar el tubo de ensayo hubo una presión del oxigeno y reacción elevada y se produjo que se prenda nuevamente el palillo y que este incandescente.

Tubo 4

(Agua oxigenada + hígado + arena)

Hubo una reacción rápida porque al mezclar el hígado con la arena el tejido del hígado se separa y hay mas reacción por el contacto de la superficie con dicha sustancia, y el palillo se mantenía muy incandescente por la presión de oxigeno.

Tubo 5

No hubo una reacción, ni presión de oxigeno, ni el palillo se mantuvo encendido porque el hígado al cocinar se desnaturaliza o se destruye completamente la catalasa que contiene.

Fuente: Laboratorio de Biología General de la FCIAL.

Elaborado por: Anderson Aguinda.

 En el caso de

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