Informe de laboratorio: actividad enzimatica

INFORME DE LABORATORIO 4

ACTIVIDAD ENZIMATICA

MARIBEL MOJICONES COD: 136003111

MARCELA BRICEÑO COD: 136003100

DANIEL MONROY COD: 136003112

MARIA CAMILA VELAZQUEZ

BIOLOGA

TECNOLOGIA EN REGENCIA DE FARMACEA

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS

13-ABRIL-2013

VILLAVICENCIO - META

OBJETIVOS

• Conocer que sustancias contienen proteínas carbohidratos

• Conocer la obtención de los carbohidratos y las proteínas

• Identificar las reacciones positivas (+) y reacciones negativas (-)

• Conocer el procedimiento y identificar las diferentes clases de componentes

INTRODUCCIÓN

Este es un trabajo práctico, basado en la observación, que aborda el tema de la presencia de moléculas orgánicas en la diferente muestra orgánica.Las enzimas son moléculas denaturaleza proteica que catalizan reacciones, siempre que sean termodinámicamente posibles: una enzima hace que una reacción química que es energéticamente posible, pero que transcurre a una velocidad muy baja, sea cinéticamente favorable, es decir, transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima. En estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas. Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su velocidad crece sólo con algunas reacciones, el conjunto de enzimas sintetizadas en una célula determina el tipo de metabolismo que tendrá cada célula. A su vez, esta síntesis depende de la regulación de la expresión génica. Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energía de activación (ΔG‡) de una reacción, de forma que se acelera sustancialmente la tasa de reacción. Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que intervienen, ni modifican, por lo tanto, el equilibrio de la reacción, pero consiguen acelerar el proceso incluso millones de veces. Una reacción que se produce bajo el control de una enzima, o de un catalizador en general, alcanza el equilibrio mucho más deprisa que la correspondiente reacción no catalizada. Al igual que ocurre con otros catalizadores, las enzimas no son consumidas por las reacciones que catalizan, ni alteran su equilibrio químico. Sin embargo, las enzimas difieren de otros catalizadores por ser más específicas. Las enzimas catalizan alrededor de 4.000 reacciones bioquímicas distintas. No todos los catalizadores bioquímicos son proteínas, pues algunas moléculas de ARN son capaces de catalizar reacciones (como la subunidad 16S de los ribosomas en la que reside la actividad peptidil transferasa). También cabe nombrar unas moléculas sintéticas denominadas enzimas artificiales capaces de catalizar reacciones químicas como las enzimas clásicas. La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas. Los inhibidores enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas, mientras que los activadores son moléculas que incrementan dicha actividad. Asimismo, gran cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. Muchas drogas o fármacos son moléculas inhibidoras. Igualmente, la actividad es afectada por la temperatura, el pH, la concentración de la propia enzima y del sustrato, y otros factores físico-químicos. Uno de los factores que afecta a la velocidad de una reacción catalizada por un enzima purificado un vitro es la concentración de sustrato presente. El estudio de los efectos de la concentración de sustratos complicado porque el sustrato cambia en el transcurso de una reacción a medida que el sustrato se convierte en producto. A concentraciones de sustrato relativamente bajas, Va aumenta casi linealmente con el incremento de sustrato. A mayores concentraciones de sustrato, Va aumenta incrementos cada vez menores en respuesta a incrementos de sustratos. Finalmente se alcanza un punto más allá del cual se dan incrementos pequeñísimos Va con el incremento de sustrato. Esta meseta en el valor de se denomina velocidad máxima, Vmax. Otro factor que afecta a la velocidad es el PH, las enzimas tienen un PH óptimo o un intervalo de PH en el que su actividad es máxima; a valores superiores o inferiores de PH la actividad disminuye. El intervalo de PH en el que cambia la actividad enzimática puede proporcionar alguna pista sobre que aminoácido está implicado, un cambio en la actividad enzimática cerca de PH 7,0 refleja frecuentemente la valoración de un residuo de His. Los estudios de la dependencia respecto al PH de las enzimas son útiles para sugerir que aminoácidos pueden ser operativos durante el proceso catalítico. Otro factor importante en velocidad de actividad enzimática es la temperatura de muchas enzimas y su temperatura optima está entre los 40 y 45 °C para las enzimas de mamíferos. Por encima de esta temperatura se produce desnaturalización térmica del enzima. Entre 0 y 40 °C muchas enzimas muestran un incremento del doble de la actividad por cada 10 °C de incremento en la temperatura. En condiciones de hipotermia muchas reacciones enzimáticas están deprimidas, lo que explica la inferior demanda de oxigeno de los organismos vivos a baja temperatura. La mutación de una enzima a una forma termolábil puede tener consecuencias graves.

MATERIALES Y REACTIVOS

BIOLOGICOS

• Papa (catalasa)

• Hielo

EQUIPOS

• Pipeta de 5ml

• Tubos de ensayo

• Cajas de Petri

• Mechero

REACTIVOS

• Ácido clorhídrico o sulfúrico

• Peróxido de hidrogeno al 5%

• Cloruro de mercurio (metal pesado)

• Nitrato de plata o de plomo al 1%

• Cloruro de sodio (NaCl)

RESULTADOS

Para la presente práctica utilizaremos la catalasa

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