AISLAMIENTO DE HONGOS Y BACTERIAS EXISTENTES EN MUESTRAS DE SUELO
Enviado por Pablos Almeida • 16 de Octubre de 2018 • Tarea • 1.539 Palabras (7 Páginas) • 369 Visitas
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO[pic 1][pic 2]
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
CARRERA: INGENIERÍA AGRONÓMICA
FITOPATOLOGÍA[pic 3][pic 4]
PROFESOR: Ing. Marco Pérez
AYUDANTE: Ing. Maribel Manobanda
Informe N°1
TEMA: AISLAMIENTO DE HONGOS Y BACTERIAS EXISTENTES EN MUESTRAS DE SUELO[pic 5][pic 6]
NOMBRE:
PABLO ALMEIDA
FECHA DE ENTREGA: 10/10/2017
SEMESTRE: QUINTO
PERIODO:
SEPTIEMBRE - FEBRERO 2017-2018
CEVALLOS – ECUADOR
- INTRODUCCIÓN
En la naturaleza abundan los microorganismos que se desarrollan estrechamente relacionados entre sí, de manera que encontramos bacterias, hongos y otros organismos de muy diversos tipos, tanto de vida libre como parásitos. Para poder estudiarlos y conocerlos se deben cultivar en medios adecuados aislándolos del suelo o de partes vegetales enfermas. Para realizar aislamientos a partir del suelo, existen diversas técnicas como la de placa directa y la de dilución en serie. En el caso de que el patógeno se encuentre en las partes vegetales, se puede proceder a realizar aislamientos directos, utilizar cámaras húmedas, o a través de trampas, etc (Agrios, 2005).
Los hongos del suelo juegan un papel clave en los procesos de descomposición que mineralizan y reciclan nutrientes de plantas. En el suelo, los hongos interactúan con una compleja comunidad microbiana que incluye: bacterias, actinomicetos (actinobacterias) y pequeños invertebrados. Los hongos son una parte importante de la cadena alimenticia en el suelo, principalmente para la mesofauna que habita en el suelo. En los ecosistemas agrícolas, los patógenos de plantas actúan en el suelo y en la rizósfera, causando una notable reducción en las cosechas y afectando su calidad suelo (Bonkowski et al., 2000).
La siembra se realiza con el fin de aislar o repicar los hongos o bacterias para su uso inmediato o para mantenerlos viables por un tiempo corto. La siembra o aislamiento en cultivo puro consiste en dejar crecer el hongo elegido bajo condiciones en las que pueda desarrollar y esporular convenientemente. Para ello es necesario verter el medio de cultivo, dejarlo enfriar, acidificarlo –si fuera necesario– y colocar una pizca del hongo a sembrar. Se realiza por medio de una aguja o de un ansa, ya sea por un simple toque o por rayado continuo (Mateos. P, 2001).
El cultivo de microorganismos es una actividad que requiere del conocimiento de técnicas de siembra o inoculación y de aislamiento para transferirlos de un medio a otro, o mantener su crecimiento y actividad. Es indispensable para realizar diversos estudios morfológicos, de identificación, bioquímicos, de patogenicidad y ecológicos, entre otros. Existen diferentes técnicas de siembra: por suspensión de la muestra en medios líquidos o por estría en caja de Petri y tubos con medios solidificados en forma inclinada; por piquete o picadura en tubos con medios sólidos o semisólidos. Con la aplicación de cada técnica se obtiene información de importancia para el estudio básico o aplicado de los microorganismos de interés (Becerra, Sosa & López, 2010).
- OBJETIVOS
- Desarrollar y comprender un método práctico de los tipos de aislamiento de agentes fitopatógenos.
- Conocer los hongos y bacterias de mayor importancia de interés económico que se encuentran en el suelo agrícola.
- Identificar con la observación microscópica la estructura del agente causal y posteriormente su efecto que produce en la planta.
- Conocer la importancia del estudio de agentes fitopatógenos para determinar medidas de control.
- MATERIALES Y EQUIPOS
- Muestras de suelo
- Vaso de precipitación de 75ml
- 3 Cajas Petri
- Lámpara de alcohol
- Asa de siembra
- Agua destilada
- Balanza analítica
- Auto clave
- Cámara de flujo laminar
- Microscopio óptico
- Papa dextrosa Agra (PDA)
- PROCEDIMIENTO
Preparación del medio de cultivo y esterilización
- Se coloca 3 gr de PDA en 1 lito de agua destilada en un matraz.
- Se coloca el matraz con la solución tapada la boca con un tapón de algodón y papel aluminio y se procede a colocar en el autoclave.
- Se colocó el matraz en el autoclave de 15 a 20 minutos para esterilizarlo luego se retiró y posteriormente se dejó que se enfrié.
Preparación de la solución de suelo para la siembra
- Diluir 10 gramos de suelo en 75 ml de agua destilada mecer por un minuto.
- Proceder en la cámara de flujo laminar a sembrar el suelo en el medio de cultivo a 75 ml a 50 ml y 25 ml de la solución.
- Dejar en reposo de 48 horas y luego identificar y observar las colonias de fitopatógenos presentes en el microscopio.
- RESULTADO
Preparación de la solución de suelo
FIGURA 1 [pic 7] Pesamos 10 gr de suelo en la balanza analítica. | FIGURA 2[pic 8][pic 9] Colocamos los 10 gr de suelo en el vaso de precipitación y 75 gr de agua destilada. | FIGURA 3[pic 10] Diluir la solución de suelo por un minuto y está lista para la siembra. |
Asepsia y siembra de la solución
FIGURA 1 [pic 11] Con todo el atuendo necesario procedimos a descontaminarnos las manos y los guantes con alcohol para prevenir contaminaciones. | FIGURA 2[pic 12] Ingresamos las manos a la cámara de flujo para proceder a sembrar la solución de suelo se tomó todas las medidas de asepsia y esterilización el método de siembra fue por estrías. | FIGURA 3[pic 13][pic 14] Con el medio de cultivo previamente preparado se procedió a la siembra se utilizó una asa que se flameo para proceder a colocar cuidadosamente sobre la superficie la solución se realizó tres siembra al 75, 50 y 25 ml de la solución y se procedió a sellarlas con un flameo alrededor de las cajas Petri. |
FIGURA 4[pic 15] Se dejó reposar 48 horas y se procedió a abrir para evidenciar si existe crecimiento de colonias de microorganismos y proceder a observar en este caso no se logró evidenciar microorganismos. |
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