Aislamiento De Bacteria

Actividad 9

Medios especiales para el aislamiento de bacterias

Equipo 5.

Hernández Flores Karina Guadalupe

Rodríguez Ramírez Ana María

Sahagún López Diana Magaly

Velasco Gutiérrez Sergio Ernesto

Introduccion

En todos los ambientes naturales habitan múltiples microorganismos de diversos tipos y actividad fisiológica.

¿ Que es la siembra ?

Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porción de muestra (inóculo) en un medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano, para su desarrollo y multiplicación. Una vez sembrado, el medio de cultivo se incuba a una temperatura adecuada para el crecimiento.

Las reglas fundamentales para efectuar la siembra exigen:

• Que se efectúen asépticamente

• Que los medios de cultivo y el instrumental a utilizar estén esterilizados

• Que se realicen solo los manipuleos indispensables

• Que se trabaje fuera de toda corriente de aire. De ser posible utilizando un mechero o bien Flujo laminar.

Existen diferentes tipos de siembra de acuerdo al medio utilizado y los requerimientos del microorganismo a estudiar.

Medios sólidos:

Siembra por inmersión: se coloca el inóculo en una placa o caja de Petri y

sobre el mismo se vierte el medio de cultivo previamente fundido. Este método se utiliza para microorganismos aerobios.

Siembra en doble capa: se procede de la misma manera que por inmersión. Una vez solidificado el medio se vierte una cantidad extra de medio necesaria para cubrir la capa anterior (generalmente 10 ml. aprox.). Este método se utiliza para microorganismos anaerobios facultativos y microaerofílicos.

Siembra en superficie: se vierte sobre una placa de Petri el medio de cultivo

fundido, se deja solidificar y se coloca sobre la superficie el inóculo. Con ayuda de una espátula de Drigalsky se extiende el inóculo hasta su absorción total por el medio de cultivo. Este tipo de siembra se recomienda para microorganismos aerobios estrictos.

Siembra en estría: se vierte sobre una placa de Petri el medio de cultivo fundido y se deja solidificar.Se utilizan variaos métodos de siembra por estrías en superficie entre las cuales tenemos el método francés y el clásico, la finalidad de estos, es obtener colonias separadas.

METODO FRANCES (Estría compuesta)

Se flamea el asa y se toma la muestra del material a estudiar.

Coloque el inoculo en uno de los extremos de la caja de petri con el medio de

cultivo indicado.Extienda el cultivo haciendo 4 o 5 estrías paralelas, sin romper el agar.

Flamee de nuevo el asa enfríela y sin tomar más muestra, haga 4 o 5 estrías

paralelas formando un ángulo recto con las anteriores. Este paso se repite hasta

cubrir toda el área de la caja.

METODO CLASICO (estría simple)

Flamee el asa y se toma muestra del material a estudiar.

Extienda de un extremo a otro formando líneas en zigzag hasta cubrir toda el área

de la caja.

Siembra en agar en tubo inclinado o bisel: en este caso se colocan 5 ml de

medio de cultivo fundido y estéril, se inclina el tubo y se deja enfriar.

El inóculo se siembra, con ayuda de ansa, de la siguiente manera:

• En profundidad con ansa de punta: se pica con el ansa el cultivo a sembrar y se introduce mediante punsión en el medio contenido en la parte inferior del tubo.

• En superficie con ansa de aro: se pica con el ansa el cultivo a sembrar y se esparce el mismo sobre la superficie

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