Practica de microbiologia aislamiento de bacterias

PRACTICA N°4 : AISLAMIENTO DE ENTEROBACTERIAS

1. INTRODUCCION

En conjunto enterobacteriaceae establece un conjunto extenso y heterogéneo de bacterias Gram negativas. Tiene su nombre por el lugar donde habitan como saprofitos en el tracto digestivo, aun se refiera de bacterias ubicuas , hallándose generalmente en el suelo, vegetación , agua y suelo, también como conformando de la flora intestinal habitual de animales y también del hombre.

 Escherichia Coli, es uno de los microorganismos que mas podemos destacar de esta especie, uno de los microorganismos prototípicos que se han sometido a muchos estudios.

• OBJETIVOS

Conocer las técnicas de siembra en los medios de cultivo

Sembrar en medio Agar Mac Conkey

Observar la morfología macroscópica de las colonias y diferenciarlas en lactosa positiva y lactosa negativa

Observar al microscopio mediante una coloración gram para ver su morfología y reacción a la tinción Gram.

• MARCO TEORICO

ENTEROBACTERIAS

Solo hay una familia de enterobacterias. Hay mas de 30 variedades y más de 100 especies. Es la forma más usual de nombrar a las bacterias Gram negativas y su morfología es de cocos o bacilos, estos integrantes conforman parte del microbiota del intestino (coliformes) y otras zonas del ser humano también como otras clases de animales que pueden crecer en la tierra o plantas.

Reciben el nombre de bacterias Gram negativas por que se pueden hallar en el intestino de especies de mamíferos. La clase de que tienen flagelos (móviles) y los excedentes (inmóviles). Tienen disposición de fermentar la lactosa y el tiempo que demoran en hacerlo ayuda a identificar los géneros. Los que no llegan a lograr fermentación son conocidos como patógenos, saprofitos. existen enterobacterias que causan intoxicaciones alimenticias, como salmonelosis.

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Imagen 01 : Estructura de Enterobacteria

Fuente: Enterobacterias y partes

CARACTERISTICAS

• Son Gram negativo y la totalidad de estos son bacilos.
• Se pueden cultivar de forma muy sencilla.
• Son catalasa positiva y oxidasa negativa.
• Son considerados anaerobios facultativos.
• Contienen o no flagelos.
• Quimioheterótrofos, no crean esporas.

ENTEROBACTERIAS PATOGENAS

La competencia de estas enterobacterias patógenas se encuentran los alimentos y son un gran riesgo para las personas que los ingieren, se debe asegurar de que o hallan este tipo de bacterias en los alimentos.

• Bacilus cereus
• Escherichia coli
• Salmonella
• Shigella
• Clastridum botulinum

DIVISION DE GRUPOS

• GRUPO I

ESCHERICHIA

E. COLI

Es una clase más apartada y más denominante, se constituye de 5 familias más. Son un grupo heterogéneo de origen en las que la mayoría son patógenas, aunque, hay patógenos más oportunistas.

SALMONELLA

Una especie muy conectada a la Escherichia, contienen el 50% de la secuencia del ADN, pero la mayoría son patógenas para los seres humanos y animales. La salmonella entérica es la serie donde hay mas de 1500 serotipos diferentes. Se encuentra en animales ( aves, reptiles) y en animales domésticos. Se contagia por contacto entre animales por los alimentos contaminados.

• GRUPO II

ENTEROBACTER

Se encuentra en las aguas, suelos y muy rara vez en el intestino. Entre estos podemos encontrar la Serratia, Ewinia.

• GRUPO III

La gran parte de estas son existencia libre y contienen un Proteus patógeno. Se desplazan muy rápido y se desarrollan en oleadas (placas de cultivo donde se puede observar círculos concéntricos).

• GRUPO IV

Contiene siete familias de las que 3 son patógenas y se consideran muy importantes para los seres humanos; tenemos la Y. Pseudotuberculosis, Y. enterocolitica y la Y. Pestis.

PRUEBAS DE IDENTIFICACION

• CATALASA

Es un fermento que se encuentra en la totalidad de las bacterias que tienen citocromos. Los microorganismos que reducen a catalasa que producen hidrolisis en el peróxido de hidrogeno en agua y oxigeno espumoso que se suelta en estructura de burbujas. El objetivo primordial de este método es dividir micrococacceae (positiva) de los streptococcus y enterococcus (negativa)

• OXIDASA

Este método funciona para definir la existencia de enzimas oxidasas. La catálisis de la oxidasa que se obtiene por la aparición de un conjunto de citocromooxidasa que estimula la herrumbacion del citrocromo el que es disminuido por causa del oxigeno molecular obteniendo agua o peróxido de hidrogeno según la familia microscópica. El oxígeno trabaja como aprobador final de los electrones en cadena. La mayoría de veces el método citocrooxidasa solo se localiza los microorganismos que son aerobicos, anaeróbicos facultativos y en algunos microaerófilo, pero los microorganismos aeróbicos estricticos no tienen oxidasa. También la existencia de oxidasa está acompañada de la elaboración de catalasa, ya que esta está disminuida en el peróxido de hidrogeno que se hace en consecuencia de la disminución del oxígeno y la acumulación toxica.

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