Aminoacidos Y Proteinas

PROPIEDADES DE AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS

OBJETIVO:

Que el alumno conozca las propiedades de las proteínas y aminoácidos en cuanto asu solubilidad y reactividad. Que conozca algunas de las reacciones características deidentificación de estos compuestos orgánicos.

FUNDAMENTO:

Las proteínas son polímeros de aminoácidos enlazados a través de enlacespeptídicos. Para que las proteínas cumplan su función biológica tienen que adoptaruna estructura espacial determinada, denominada nativa. La mayoría de las proteínasglobulares son solubles en disoluciones acuosas y a pH próximos a la neutralidadmantienen su estructura nativa intacta. La alteración de esta estructura tridimensionalconlleva la pérdida de su actividad biológica, y el proceso se denomina

desnaturalización.

La presencia de aminoácidos y proteínas en una disolución puede ponerse demanifiesto por gran número de ensayos, generales o específicos (según el grupofuncional con el que reaccione el reactivo), basados en la formación de un compuestocoloreado entre el aminoácido o la proteína y un reactivo específico. Los distintosmétodos, lógicamente, tienen diferencias de sensibilidad, especificidad, etc.Entre los métodos más utilizados para proteínas destacan:

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Ensayo de Biuret

. Compuestos con enlaces peptídicos producen un cambiode color del azul al púrpura cuando reaccionan con Cu(II) en medio alcalino.

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Ensayo de Bradford.

Es un ensayo rápido y sensible para cuantificarproteínas. El método se basa en el cambio de color que experimenta elcolorante azul en medio ácido en presencia de proteínas. Las proteínasproducen el cambio de la coloración anaranjada del reactivo a una tonalidadazulada, cuya intensidad es proporcional a la concentración de proteínas.

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Ensayo xantoproteico

: Método que se basa en el cambio de coloración alutilizar ácido nítrico concentrado.

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En la práctica se utilizarán los ensayos de Biuret y de Bradford, entre otros.

MATERIAL: REACTIVOS:

11 tubos de ensaye 0.3 ml de sulfato de cobre al 1 %1 pinzas para tubos de ensaye 5 ml de hidróxido de sodio al 10 %5 pipetas graduadas Reactivo de Biuret1 gradilla Reactivo del Millón1 perilla Acido glioxílico recién preparado1 mechero Bunsen

α

naftol al 15 %Balanza granataria Ácido nítrico concentradoBaño María 0.3 ml de nitrate de plata al 1 %Tripie 25 ml de solución acuosa de albúminareciénpreparada

TECNICA:

1.

Precipitación de proteínas

. Este apartado se efectuará con la disolución dealbúmina recién obtenida. Rotular cinco tubos de ensayo del 1 al 5, y añadir acada tubo 1 ml de la disolución de albúmina

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2.

Reacción al calor:

A continuación

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