Articulo Científico

Artículo Científico

Víctor L. González

Roxana de la C. Sierra

David Marrero Delange

Virgen Milián Hernández

Heriberto Campañá

Identificación por Cromatografía de Gases – Espectrometría de Masas y determinación cuantitativa por Cromatografía de Gases de los productos de degradación térmica de las tabletas de policosanol (20 mg) revestidas.

Resumen.

Mediante Cromatografía de Gases-Espectrometría de Masas se identificaron los estearatos y palmitatos de hexacosanilo, octacosanilo y triacontanilo como los principales productos de degradación térmica en las tabletas de policosanol de 20 mg de ingrediente activo. Para cuantificar estos productos de degradación se desarrolló y validó una metodología por cromatografía de gases con detector de ionización por llama, utilizando una columna capilar wide-bore BPX-5 (25 m X 0,53 mm d.i. X 1,0 µm de espesor de película) y estearato de docosanilo como patrón interno, mediante un programa de temperatura entre 300 y 350 °C . Al validar la metodología, esta mostró buena exactitud y linealidad en un intervalo entre 2,5 y 30 % de degradación del ingrediente activo. Los estudios de precisión realizados a este método (repetibilidad y precisión intermedia) mostraron coeficientes de variación menores del 2 % en el análisis de tabletas con un 7,2 % de degradación. Los límites de detección y cuantificación encontrados para el palmitato de hexacosanilo, uno de los ésteresminoritarios de la mezcla, (0,006 y 0,022 mg/tableta, respectivamente) demostraron la posibilidad de emplear esta metodología para el análisis de tabletas con menos de un 2 % de degradación, además de obtener buena precisión y recobrado en el análisis de tabletas contaminadas con palmitato de hexacosanilo en una concentración correspondiente al límite de cuantificación. El método puede ser utilizado como soporte en los estudios de estabilidad de dichas tabletas.

Introducción

El policosanol es un ingrediente activo hipolipemiante y antiplaquetario compuesto por una mezcla de alcoholes alifáticos primarios de alto peso molecular. Su componente principal es el 1-octacosanol (C28), seguido por el 1-triacontanol (C30), el 1-hexacosanol (C26) y otros alcoholes de alto peso molecular. La determinación de los productos de degradación del policosanol en sus formas terminadas debe ser realizada como apoyo a los estudios de estabilidad, según se requiere actualmente por la Industria Farmacéutica para los productos nuevos. Estudios realizados bajo condiciones drásticas de almacenamiento a las tabletas de policosanol, con dosis de 5 y 10 mg, mostraron que a elevadas temperaturas aparecen productos de degradación. Estos fueron identificados por Cromatografía de Gases (CG) acoplada a Espectrometría de Masas (EM) como los palmitatos y estearatos de octacosanilo y triacontanilo en las tabletas de 5 mg, y como los palmitatos de hexacosanilo, octacosanilo y triacontanilo y los estearatos de hexacosanilo, octacosanilo y triacontanilo en las tabletas de 10 mg y se desarrollaron métodos analíticos para su determinación por CG en dichas formas farmacéuticas.

Materiales y métodos

Disoluciones

Se emplearon disoluciones patrones de referencia (DPR) de palmitatos de hexacosanilo (96,59 %), octacosanilo (97,72 %) y triacontanilo (97,27 %), así como de estearatos de hexacosanilo (99,57 %), octacosanilo (99,29 %) y triacontanilo (96,48 %) (CNIC, Ciudad de La Habana, Cuba) a 0,5 mg/mL en n.hexano (Merck,Alemania). Se empleó una disolución de patrón interno (DPI) de estearato de docosanilo (99,9 %) (CNIC, Ciudad de La Habana, Cuba)8 también a 0,5 mg/mL en n.hexano (Merck, Alemania). Se preparó, además, una disolución patrón de trabajo (DPT), también en n-hexano, con la composición siguiente: palmitato de hexacosanilo a 0,13 mg/mL; palmitato de octacosanilo a 1,2 mg/mL; palmitato de triacontanilo a 0,32 mg/mL; estearato de hexacosanilo a 0,01 mg/mL;estearato de octacosanilo a 0,77 mg/mL y estearato de triacontanilo a 0,17 mg/mL . Se empleó también Nmetil-N-trimetilsililtrifluoroacetamida (MSTFA, Sigma, EUA) como agente derivatizante para los alcoholes del policosanol.

Equipos

Se empleó un cromatógrafo de gases modelo GC 14B (Shimadzu, Japón) con detector de ionización por llama, acoplado a un sistema de cómputo,y equipado con una columna capilar con fase enlazada BPX-5 (25 mX 0,53 mm d.i. X 1,0 µm de espesor de película, SGE, Australia). Programación: de 300 a 350 ºC a 10 ºC/min y 10 min isotérmico a la temperatura final. Flujo del gas portador (hidró-geno): 13,2 mL/min. Para la formación de la llama se empleó hidrógeno a 40 mL/min y aire a 400 mL/min. El detector y el inyector se calentaron a 350 ºC. El volumen de inyección fue 1 µL. Se empleó un cromatógrafo de gases acoplado a un espectrómetro de masas GC 8000 Series MD800 (Fisons Instruments, Inglaterra), con un sistema de cómputo y equipado (25 m X 0,32 mm d.i. X 0,25 µm de espesor de película, Supelco, USA). Programación: de 100 a 200 ºC a 40 ºC /min, de 200 a 320 ºC a 10 ºC/min y 30 min isotérmico a la temperatura final. El flujo de gas portador (helio) fue 1 mL/min . Las temperaturas del inyector, la fuente y la interfase fueron 300, 250 y 300 ºC, respectivamente. La energía de ionización fue de 70 eV. El espectro de masas se obtuvo de forma continua de 40 a 800 m/z.

Degradación de las tabletas

Se tomaron aleatoriamente 60 tabletas, seleccionadas a partir de tres lotes (20 tabletas de cada uno), las cuales fueron sometidas a degradación acelerada por termólisis, a 108 °C durante 24 h en una estufa con temperatura controlada.

Preparación de la muestra

Se tomaron aleatoriamente 20 tabletas degradadas, se pesaron y se les determinó el peso promedio, que oscila alrededor de 176 mg. Se trituraron en el mortero hasta obtener un polvo fino y homogéneo. En un tubo de ensayos se pesó, con una exactitud de 0,1 mg, alrededor del peso promedio de la tableta,

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