CALCULO DE LA CONCENTRACIÓN DE UNA SOLUCION PROBLEMA

CALCULO DE LA CONCENTRACIÓN DE UNA SOLUCION PROBLEMA:

Para calcular la concentración de una solución problema con el empleo de un fotocolorímetro, existen dos formas:

- Método de la curva standard o curva de calibración.

- Factor de calibración.

a) CURVA STANDARD.- Este método consiste en utilizar varios standares de concentraciones conocidas y progresivas para luego construir un gràfico en un sistema de coordenadas en el que se colocan las lecturas en las ordenadas (Eje Y) y las concentraciones en las abcisas (Eje X). En la recta obtenida (Función lineal), se puede extrapolar la absorbancia o densidad óptica de la muestra problema, hallando la concentración de la misma en el eje de las abcisas.

b) FACTOR DE CALIBRACIÓN.- (Fc), El factor de calibración es un término que se relaciona con la concentración de una sustancia con su absorbancia, es decir la intensidad que absorbe una sustancia de concentración conocida (Standard o Patrón).

A

sí tenemos:

Donde: Fc = factor de calibración.

A = absorbancia del tubo standard.

[Standard ] = concentración del standard.

Con el factor de calibración se puede fácilmente determinar la concentración de una muestra desconocida o problema (MP), conociendo su absorbancia.

Si la muestra problema y el standard son procesados de la misma manera (diluciones) se podrá usar directamente la siguiente fórmula:

[ MP ] = A mp . Fc

Si la muestra problema sufre diluciones previas se encontrará el factor de dilución (Fd) que es matemáticamente la inversa de la dilución (dil) y esta a su vez es:

Fc = [ Standard ] / A

BIOQUIMICA Y NUTRICION Página 5

Dil = Vol mp / Vol t

Dónde: Vol mp = Volumen de la muestra problema tomada para hacer la dilución.

Vol t = Volumen total.

Para este segundo caso cuando se quiere saber la concentración de una muestra problema se procederá usando la siguiente fórmula:

[ MP ] = A mp . Fc . Fd

Dónde: A mp = Absorbancia de la muestra problema.

Fc = Factor de calibración.

Fd = Factor de dilución.

[ MP ] = Concentración de la muestra.

EXPERIMENTO

1. Preparar la siguiente batería de tubos:

Tubo I

Tubo II

Tubo III

Tubo IV

Bicromato de potasio

1 ml

2 ml

3 ml

4 ml

Agua destilada

9 ml

8 ml

7 ml

6 ml

Concentración (mg %)

Solución stock: Bicromato de Potasio 40 mg%.

Calcular la concentración en mg% de bicromato de K en cada uno de los

tubos.

Leer las absorbancias de los cuatro tubos a 530 nm de longitud de onda (ג)

en el espectrofotómetro.

2. Con los datos obtenidos construir en un papel milimetrado la gráfica de absorbancia vs concentración de

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