Cromatografia

CUESTIONARIO DE CROMATOGRAFÍA

1. ¿A qué grupo de compuestos pertenecen los pigmentos?

Carotenoides y xantofilas.

2. ¿A qué se debe que estos compuestos sean coloridos?

Carotenoides: son los responsables de la gran mayoría de los colores amarillos, anaranjados y rojos presentes en los alimentos vegetales. Entre mayor sea la intensidad del color, mayor será el contenido de carotenoides.

Xantofilas: son compuestos químicos pertenecientes al grupo de los carotenoides que poseen uno o más átomos de oxígeno en su estructura. Se encuentran de forma natural en muchas plantas y presentan también acción fotosintética. Estos pigmentos, más resistentes a la oxidación que las clorofilas, proporcionan sus tonos amarillentos y parduzcos a las hojas secas.

3. Explique la diferencia entre cromatografía de adsorción y partición.

Cromatografía de partición: La mayoría de las sustancias tendrán distinta solubilidad en diferentes solventes. Si una sustancia se pone en contacto con dos solventes que no se mezclan entre sí, se distribuirá entre los dos solventes en relación a su solubilidad en cada uno. Se llama efecto de partición a la distribución de un soluto entre dos o más solventes que no se mezclan. El solvente o el líquido que es atrapado por el medio del sostén sea este papel, gel, sílice o alúmina, se llama fase estacionaria. Al solvente revelador se le llama fase móvil.

Cromatografía de adsorción: La cromatografía de adsorción o liquido-sólido, es la forma clásica de cromatografía de líquidos. La adsorción se lleva a cabo cuando hay una concentración más alta en la superficie de un sólido que en la solución circundante. La adsorción se refiere al enlace de una sustancia a la superficie de otra. Generalmente los adsorbentes usados en cromatografía son el carbón mineral, el gel de sílice, y la alúmina.

4. ¿Cuáles son las ventajas y desventajas de la cromatografía en capa fina en comparación con la cromatografía en columna?

Cromatografía en columna: Las separaciones en la cromatografía en columna pueden realizarse por reparto, adsorción o intercambio iónico. El estado físico del adsorbente ha de ser de tal manera que permita el empaquetamiento uniforme de la columna y el flujo libre de disolvente a través de ella.

Cromatografía en capa fina: Cromatografía en papel y electro cromatografía. En todos los casos se emplea una capa plana y relativamente delgada de una materia que a la vez es el soporte o bien que recubre una superficie de vidrio, plástico o metálica. La fase móvil se mueve a través de la fase estacionaria por capilaridad, a veces ayudada por gravedad o por aplicación de un potencial eléctrico. En la actualidad la cromatografía en plano se centra en la técnica de la capa fina, que es más rápida, tiene mejor resolución y es más sensible que su alternativa en papel.

5. Explique la diferencia que existe entre el adsorbente utilizado en cromatografía en capa delgada y el de columna. Hacer una lista en orden creciente de actividad.

En columna: Puede usarse cualquier medio adsorbente siendo los más generales la celulosa, gel de sílice, alúmina oxido de magnesio, oxido de cálcico y carbón activo (para separaciones por adsorción y de intercambio iónico). Se emplea para la separación de mezclas o purificación de sustancias a escala preparativa. Como fase estacionaria se usa, generalmente, gel de sílice o alúmina dentro de una columna. La elección del disolvente es crucial para una buena separación. Dicho disolvente pasa a través de la columna por efecto de la gravedad o bien por aplicación de presión (cromatografía flash). La columna se prepara mezclando el soporte con disolvente.

Capa delgada:

• Sílica gel (se utiliza en el 80% de las separaciones)

• Óxido de Aluminio o Alúmina (ácida, neutra o básica)

• Celulosa (Nativa o micro-cristalina)

• Poliamidas

Estos adsorbentes deben tener las siguientes características:

• Tamaño de partícula pequeño

• Diámetro de poro grande

• Área superficial grande

• Homogeneidad

• Alta pureza

6. Hacer una lista de los eluyentes usados comúnmente en cromatografía en columna y capa delgada en orden creciente de polaridad.

• Hexano

• Éter de petróleo

• Benceno

• Tolueno

• Éter etílico

• Cloroformo

• Acetato de etilo

• Cloruro de metilo

• Dicloroetano

• Acetona

• Etanol

• Metanol

7. Lista de la capacidad de adsorción de los grps. funcionales de los compuestos orgánicos.

7.1. ¿Qué compuesto es más retenido una amina o un alqueno, ejemplifique en una capa cromatográfica?

Un alqueno, por su polaridad.

8. ¿Cómo se prepara el capilar para aplicar la muestra en la cromatoplaca?

Se le aplica calor para así poder romperlo cuidando que quede un orificio no muy grande.

9. ¿Por qué es necesario que la cámara de elusión esté saturada con los vapores del eluyente?

Por que así será más fácil el arrastre de los pigmentos y no se secará la placa.

10. Explique cada uno de los siguientes términos:

• Eluyente: solvente que se usa en técnicas de cromatografía para extraer un compuesto que se quiere separar de otra fase.

• Eluato: la sustancia que se separa o sale de la columna después de cada extracción.

• Elución fraccionada: Aparato de elución fraccionada electroforético tiene una columna con una rotación conjunta de sello en el que un delgado chorro de elución búfer es dirigido a través de la luz de la columna electroforética en una dirección perpendicular a la de migración electroforética. El contenido de la columna se gira en relación con el jet estacionario o se gira el jet con respecto a la columna. El sistema puede emplear electroforesis en solución libre o en columnas empaquetadas.

• Adsorción: Es un proceso por el cual átomos, iones o moléculas son atrapados o retenidos en la superficie de otra sustancia o material.

• Partición: La separación se basa en las diferencias de solubilidad de los componentes de la mezcla en las fases estacionaria y móvil.

• Elución: se produce por el flujo de una fase móvil a través de la fase estacionaria.

• Adsorbente: es un sólido que tiene la capacidad de retener sobre su superficie un componente presente en corrientes líquidas o gaseosas. Se caracteriza por una alta superficie específica y por su inercia química frente

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