Cromatografía.

Introducción

La cromatografía es un método físico de separación basado en el principio de retención selectiva en el que se tiene en cuanta la diferencia de distribución de los de los componentes presentes en una mezcla. Esta práctica se hace con la intención de aprender a separar e identificar estos compuestos de acuerdo a su polaridad, la cual indica la distancia que cada uno de estos recorre en la placa de aluminio. Así mismo, esto nos permite determinar qué muestra problema tenemos comparándola con muestras patrones y saber qué solvente (eluente) es más adecuado según la muestra que tengamos.

Justificación

La cromatografía es una técnica muy utilizada actualmente para la separación e identificación de los componentes de una muestra, pero no solo esto, ya que también puede ser empleada en la bioquímica, la toxicología entre otras ramas de la ciencia. Ya que se basa en el principio de retención selectiva, es una buena forma (además sencilla) de conocer e identificar algunos compuestos desconocidos. La importancia de esta radica en que debido a la sencillez con la que se realiza y a que no se necesitan herramientas o máquinas muy complejas, puede ser aplicada por cualquier persona que esté empezando en el mundo de la ciencia.

Objetivos

1. Separar una mezcla de compuestos orgánicos en solución, mediante cromatografías en capa fina.
2. Ensayar varias mezclas de solventes en diferentes proporciones y escoger cuál de ellas efectúa la mejor separación.
3. Identificar uno de los compuestos separados comparándolos con muestras patrones.
4. Calcular el valor RF para cada uno de los compuestos en la proporción de solvente escogida.

Sección experimental

Cromatografía de adsorción en capa fina.

1. Tome una placa cromatográfica y siembre en una placa, utilizando un aguja de laboratorio, una mezcla que contenga los siguientes solutos: ácido gálico, resorcinol y β-naftol. Siembre al lado anterior una muestra desconocida que contenga uno de los compuestos anteriores.

• Muestra problema: E

1. Introduzca esta placa en una cámara (beaker) que contenga una mezcla de hexano-acetato de etilo en proporción 8:2 (tapa el beaker con el vidrio reloj ya que la mezcla es muy volátil).

Nota: La cámara cromatográfica debe estar muy seca; en caso de contener humedad colóquela en la estufa.

1. Después de que el eluente haya ascendido hasta un poco antes de la parte superior de la placa, retírela, marque hasta dónde subió el solvente (eluente) y colóquela dentro de una cámara de yodo. Observe las manchas que aparecen en la placa.

• Datos obtenidos con la solución en proporciones 8:2, muestra conocida y muestra problema E:[pic 1]

• Distancia recorrida por el eluente5.5 cm

• Distancia recorrida por cada uno de los compuestos de la muestra conocida:

1. Compuesto menos polar: 3.4cm
2. Compuesto medianamente polar: 1.6cm
3. Compuesto más polar: No se presentó                                                                                                                                                                 movimiento.

• Distancia recorrida por la muestra problema: 3.4cm

• Datos obtenidos con la solución en proporciones 6:4, muestra problema conocida y muestra problema B (resultados proporcionados por los compañeros):

• Distancia recorrida por el eluente: 5.0cm
• Distancia recorrida por cada uno de los compuestos de la muestra conocida:

1. Compuesto menos polar: 4.9
2. Compuesto medianamente polar: 3.6cm
3. Compuesto más polar: No presentó movimiento.

• Distancia recorrida por la muestra problema: 3.3cm

Análisis de resultados:

1. Comparar las manchas de los compuestos patrones con los compuestos orgánicos desconocidos:  

• Mezcla en proporciones 8:2 y muestra problema E: La mancha de la muestra problema subió lo mismo que el componente medianamente polar de la muestra conocida.

Para reconocer cuál de los componentes de la muestra conocida es más polar, se deben tener en cuenta la polaridad de sus enlaces. Al comparar la polaridad de cada compuesto tenemos que:

[pic 2]

• Compuesto a: β-naftol: o 2-naftol

[pic 3]

             Polaridad: Menos polar o apolar.

• Compuesto b: Resorcinol: benceno-1,3-diol

[pic 4]

                                           Polaridad: Medianamente polar.

• Compuesto c: Ácido gálico: ácido 3,4,5-trihidroxibenzoico

[pic 5]

            Polaridad: Altamente polar

Como el hexano es no polar y se encuentra en una proporción 4 veces mayor que el acetato de etilo, que si es polar, esto le da a la muestra un carácter no polar, haciendo que la nuestra muestra problema permanezca más alejada del punto en el cual fue sembrada (a diferencia de la muestra más polar que no presentó movimiento) y se mueva por la fase móvil y esto gracias a la sílica gel contenida en la placa (que es un compuesto que permite una mayor separación entre compuestos con pocos grupos polares) . Esto quiere decir entonces que la muestra problema E es el compuesto c que es equivalente a  B-naftol ya que ambas recorrieron la misma distancia a la misma velocidad. La muestra problema (B-naftol) es menos polar.

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