Determinación de Ph

Informe de la práctica 3

ESPECTROFOTOMETRÍA

Juan Yuri Meneses León

Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad Nacional San Cristóbal de Huamanga

[pic 1]

Práctica de bioquímica

Prof. David

12 de enero de 2024

RESULTADOS DE LA CONSTRUCCIÓN DE UNA CURVA PATRÓN Y LA DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE UNA MUESTRA

1. Obtención de la concentración final en mG/ml de cinco disoluciones de permanganato de potasio con diferentes ml de la solución patrón, los cuales fueron obtenidas a partir de 0,5G/100ml de permanganato de potasio (solución patrón).

1. Una vez obtenido la concentración final de las cinco disoluciones de permanganato de potasio, se procede a la obtención de la absorbancia de cada una de ellas. Para lo cual, se ajusta el espectrofotómetro a 580 nm, y se realiza las lecturas correspondientes:

1. Gráfica del resultado de la obtención de la concentración final de las cinco disoluciones de permanganato de potasio.

[pic 2]

Ilustración 1: recta de calibración

1. En base a la ilustración 1 determinar la concentración de la muestra por el método analítico si la absorbancia de la muestra es 0,278.

1. Hallando la concentración estándar si  donde:[pic 3]

•  [pic 4]
• ¿? Mg7ml[pic 5]

Resolución:

• Reemplazando datos y hallando el valor de x

[pic 6]

[pic 7]

1. Con los datos obtenidos hallamos la concentración de la muestra (C).

 [pic 8]

[pic 9]

[pic 10]

1. Ubicando la concentración obtenida en la ilustración 1.

[pic 11]

Ilustración 2: recta de calibración

DISCUCIONES.

1. En base a la ley de Lambert y Beer sabemos que cuando pasa luz monocromática por un medio homogéneo, la disminución de la intensidad del haz de luz incidente es proporcional al espesor del medio, lo que equivale a decir que la intensidad de la luz transmitida disminuye exponencialmente al aumentar aritméticamente el espesor del medio absorbente (1).
2. A una determinada longitud de onda de la energía radiante, cada sustancia absorbe una cantidad de radiación que es distinta a la que absorbe otro compuesto. O sea que cada sustancia tiene su propio espectro de absorción, el cuales una curva que muestra la cantidad de energía radiante absorbida por la sustancia en cada longitud de onda del espectro electromagnético (2)
3. La región UV toma importancia ya que, en los compuestos con dobles enlaces aislados, triples enlaces, enlaces peptídicos, sistemas aromáticos, grupos carbonilos y otros heteroátomos tienen su máxima absorbancia en la región UV, por lo que ésta es muy importante para la determinación cualitativa y cuantitativa de compuestos orgánicos (3)

CONCLUSIONES.

1. Conocer la importancia o la aplicación de espectrofotometría actualmente es muy importante porque nos permite determinar la concentración de un compuesto químico; Y esto se da porque la cantidad de luz absorbida depende de la concentración (4). La importancia de la aplicación de espectrofotometría tiene varios campos, por ejemplo: en el campo en el sector de la alimentación, la espectrofotometría se usa para hacer controles de calidad, ya que permite determinar la concentración de algunas sustancias en los alimentos; en el campo del control de la calidad ambiental, los laboratorios realizan ensayos espectrofotométricos para analizar sustancias químicas; en el campo textil, se utiliza la espectrofotometría para determinar la composición química del material (5).
2. El espectrofotómetro va medir la cantidad la cantidad de luz absorbida (absorbancia) y para diferenciar cada sustancia se sabe que cada sustancia absorbe una cantidad de radiación que es distinta a la que absorbe otro compuesto (2).
3. Al construir la curva patrón (ilustración 1) podemos llegar a concluir que a medida que va aumentando la concentración también va aumentando la absorbancia. O sea, la concentración es directamente proporcional a la absorbancia. Una vez graficado la recta de calibración versus concentración obtenemos una ecuación lineal  donde: Y es igual a absorbancia, X es igual a concentración, y el R es un indicador de cuan cierto es el análisis, mientras que el valor de R es más cercano a 1 entonces es más confiable la medición.[pic 12]

CUESTIONARIO

1. Realizar una tabla de 10 compuestos bioquímicos y a que longitud de onda se pueden cuantificar.

1. Qué precauciones debe tenerse en cuenta para el procesamiento de muestra qué serán leídas en el espectrofotómetro.

Para realizar una medición adecuada antes que nada tener en cuenta las normas de bioseguridad del laboratorio como el uso de los guantes, mandil, lentes, gorro, etc. y después proceder a la utilización del instrumento con los siguientes pasos.

...