EXTRACCIÓN DE ADN.

LABORATORIO:

EXTRACCIÓN DE ADN.

INTEGRANTES: WILLI ARROYO.

SARANI CRUCES.

PAOLA RIQUELME.

DANIELA TOLEDO.

TANIA SALAZAR.

SECTOR: BIOLOGÍA.

CURSO: 4º AÑO “C”.

FECHA: 03-04-2014.

INTRODUCCIÓN.

El ácido desoxirribonucleico o ADN contiene la información genética para toda la función y organización celular, por lo tanto nos otorga todas las características que poseemos ya que es la molécula que controla todos los procesos vitales para los seres vivos, además de ser el principal constituyente de los cromosomas celulares.

En casi todos los organismos celulares el ADN está organizado en forma de cromosomas, situados en el núcleo de la célula.

El ADN lleva la información necesaria para dirigir la síntesis de proteínas y la replicación.

Cada molécula de ADN está constituida por dos cadenas o bandas formadas por un elevado número de compuestos químicos llamados nucleótidos. Estas cadenas forman una especie de escalera retorcida que se llama doble hélice. Cada nucleótido está formado por tres unidades: una molécula de azúcar llamada desoxirribosa, un grupo fosfato y uno de cuatro posibles compuestos de bases nitrogenadas que son: Adenina (A), Guanina (G), Timina (T) y Citosina (C).

El ADN consigue una elevada condensación gracias a los diferentes niveles estructurales que presenta.

En este informe de laboratorio, queremos plasmar de manera general y específica nuestra experiencia frente a la extracción y observación del ADN.

MATERIALES Y PROCEDIMIENTO.

Materiales:

-1 kiwi maduro.

- Solución de extracción (detergente de loza 50 ml, 225 ml de agua destilada, 10 gr de sal y agua hasta 500 ml.

- Alcohol etílico de 90º.

- 2 Tubos de ensayo.

- Gradilla.

- Varillas de madera.

- Portaobjetos.

- Tinción.

- Cubre objetos microscópicos.

1.- Colocar la fruta madura, sin cáscara en un mortero, y agregar 20 ml de solución de extracción.

2.- Homogeneizar la mezcla hasta que quede fluida.

3.- Filtrar la mezcla poco a poco, colocando papel filtro en un embudo sobre una probeta.

4.- Del filtrado extraer con pipeta 2 ml y transferir a un tubo de ensayo. Agregar cuidadosamente por los bordes del tubo, el triple del volumen de alcohol, sin mezclar, observar formación de precipitado.

5.- Introducir un palito de madera hasta la interfase, en esta zona se observa un precipitado esponjoso. Retirar una parte del precipitado y colocarla en un porta objeto, agregar una gota de tinción, tapar con cube objeto y observar al microscopio con aumento 10 X.

RESULTADOS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS.

Extracción del ADN:

En primer lugar hubo que romper la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. A continuación romper también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hubo que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo tuvimos que precipitarlo en alcohol.

Luego de realizar el procedimiento para la extracción y visualización del ADN, procedimos a retirarlo para observarlo de mejor manera en el microscopio.

Observación de la estructura del ADN: Al colocar el ADN teñido con yodo bajo el lente del microscopio y pudimos apreciar claramente una célula con su respectivo núcleo.

- La solución de lava loza y sal nos ayudó a romper la pared celular y las membranas plasmática y nuclear.

- El alcohol nos ayudó a precipitar el ADN que es soluble en agua, pero en este caso con el alcohol se desenrolló y precipitó.

PREGUNTAS.

1.- ¿Qué función cumple el detergente y la sal en este procedimiento?

R: El detergente es una solución capaz de disolver las membranas y así permitir que éstas se separen del resto de los componentes, además, es capaz de unir las proteínas que están junto al ADN.

La sal de mesa tiene un catión que se une a la molécula de ADN y hace que cambie sus propiedades químicas, permitiendo que el ADN precipite en presencia de alcohol.

2.-¿Por qué se aplicó alcohol al final del procedimiento ?

R: El alcohol es un ácido que se emplea como reactivo químico que es capaz de provocar la destrucción de tejidos, además, disuelve los azúcares y proteínas.

3.- ¿Qué factores pueden producir mutaciones en el ADN?

R: Los factores que pueden producir mutaciones en el ADN suceden de manera espontánea generalmente, pero también suceden de manera inducida.

Factores físicos: Radiaciones Ionizantes, Rayos Alfa, Beta y Gamma de fuentes radioactivas (Radio, Uranio, Cobalto), choque térmico.

Factores químicos: Análogos de Bases de Ácidos Nucleicos, los agentes que atacan al ADN como la formalina, Nitrógeno, Gas mostaza, Sulfato de Cobre, Ácido Bórico, Ácido Fórmico.

Factores biológicos: Pueden ser Bacterias o Virus.

4.- ¿Existe algún mecanismo de “Reparación de errores en el ADN”?

R: Sí, existe, y es la Reacción en cadena de la polimerasa

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