Guia Extraccion De Adn

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRÁN

MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA

ACADÉMICA

FORMATO PARA PRACTICAS DE LABORATORIO

Fecha: Abril 2011 Código: GRL-006 Página 1 de 10 Versión: 4.0

INFORMACIÓN BÁSICA

NOMBRE DE LA PRÁCTICA: EXTRACCIÓN DE ADN

PRACTICA No. 11

ASIGNATURA: Biología

TEMA DE LA PRÁCTICA: Extracción sencilla de ADN (ácido desoxirribonucleico) a partir de material vegetal

LABORATORIO A UTILIZAR: Biología CONTENIDO DE LA GUÍA

OBJETIVOS Conocer el proceso de extracción de ADN a partir de material vegetal Discutir la diferencia entre la molécula de ADN y ARN Reconocer la importancia y utilidad de cada uno de los procedimientos empleados en la técnica de extracción.

INTRODUCCIÓN.

Los ácidos nucleicos, ADN (ácido desoxirribonucleico) y ARN (ácido desoxirribonucleico), son polímeros especializados en almacenar, transmitir y expresar la información genética en secuencias de aminoácidos, las cuales luego de algunos procesos (Traducción) conforman las proteínas de una célula. Son considerados las moléculas de la vida, por lo cual conocerlos e identificarlos es esencial en los campos de la salud e ingenierías especialmente por el potencial que representan en campos como la biotecnología y biología molecular entre otras ciencias.

MARCO TEORICO

Cada molécula de ADN está constituida por dos cadenas o bandas formadas por un numeroso grupo de compuestos químicos llamados nucleótidos. Estas cadenas forman una estructura (de escalera retorcida) que se llama doble hélice. Cada nucleótido está formado por tres unidades: una molécula de azúcar llamada desoxirribosa, un grupo fosfato y uno de cuatro posibles compuestos nitrogenados llamados bases: Adenina (abreviada como A), Guanina (G), estas son Purinas, Timina (T) y Citosina (C), estas son pirimidínicas; La molécula de desoxirribosa ocupa el centro del nucleótido y está rodeada por un grupo fosfato a un lado y una base al otro. El grupo fosfato está a su vez unido a la desoxirribosa del nucleótido contiguo de la cadena. Estas subunidades enlazadas desoxirribosa-fosfato forman los lados de la escalera; las bases están enfrentadas por parejas (Figura 1).

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Figura 1. Estructura del ADN, y enrollamiento molecular

Fuente: http://stemcellizpisua.blogspot.com/2010_11_01_archive.html

La estructura del ADN es de doble cadena, lo que probablemente da una mayor protección a la información contenida en la molécula. La estructura del ARN es monocatenaria aunque, puede presentarse en forma lineal como el ARNm o en forma plegada cruciforme como ARNt y ARNr (Figura 2).

Figura 2. Representación de las cadena de ARN y ADN

Fuente:http://www.biotecnologica.com/wp-content/imagenes/2007/06/rna.png

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Otra diferencia entre ADN y ARN es su componente de pentosa (azúcar), el ADN cuenta con desoxirribosa y el ARN con ribosa, el ADN está compuesto por Adenina, Timina Guanina y Citosina, el ARN sustituye la Timina por Uracilo (Figura 2).

CONSULTA PREVIA

Elabore el Mapa Mental sobre la historia del estudio ADN, incluyendo sus conceptos básicos. Apóyate para ello de las ayudas visuales brindadas. Elabóralo en Cmaptools.

http://www.youtube.com/watch?v=b4pQJ4rMQjA

http://www.galileog.com/ciencia/biologia/adn/adn1.htm

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METODOLOGIA

Se desarrollara en grupos de cuatro personas como máximo, en los espacios de los laboratorios de Biología, siguiendo el procedimiento indicado en la guía de trabajo.

El tiempo de extracción es relativamente corto comparado con procesos de extracción de ADN Animal. Por ello la descripción de cada proceso como se describe a lo largo del procedimiento a seguir, involucra la atención sobre cada uno de los 8 pasos. Los cuáles serán considerados clave en el análisis final.

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS A UTILIZAR

Materiales Y Equipos Reactivos Material Estudiante*

Mortero y pistilo (6)

Agua destilada (300 ml.)

Marcador para vidrio y colores (anaranjado, azul, morado, rojo, negro, blanco) entre otros (INDISPENSABLE)

Beaker 200 ml. (3)

Isopropanol (o Alcohol isoamílico) a 0·C. (50 ml.)

Cinta de enmascarar

Centrífuga. (1)

Azul de metileno. (2 ml.)

Guantes (2 pares por estudiante) Gafas de protección, Gorro y Bata Manga larga de material no inflamable.

Probeta 25 ml. (5)

Bisturí por grupo

Cubeta con hielo (1)

Cloruro de Sodio (Sal) (5 gr.)

Pipeta 10 ml. (5)

Bicarbonato de Sódio (5 gr.)

Tubos de Ensayo (21) gradillas (6)

Champú (Jabón líquido) (5 ml.) Ojalà sin color alguno o blanco.

Agitador de vidrio (5)

Banano 1 unidad - Germen de trigo

Balanza digital (1)

Bisturí (1 por grupo)

1 cebolla pequeña por grupo

Tomate 1 unidad

Cada uno de los materiales vegetales solicitados deben ser medidos para que no se genere desperdicio del mismo al momento de terminar con la práctica.

Los estudiantes que no porten sus implementos de Bioseguridad individuales y materiales por equipo no serán admitidos a la sesión de trabajo práctico.

Recuerden traer las cantidades solicitadas en recipientes aislados para no contaminar un contenido mayor al solicitado en el laboratorio.

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PRECAUCIONES Y MANEJO DE MATERIALES Y EQUIPOS. CONSULTA DE EQUIPO ESPECIALIZADO.

Con precaución y cuidado al manipular la balanza digital normal y la balanza de precisión, (Tararla adecuadamente) , al igual que el bisturí – evitando cortar hacia el interior.

Desechar adecuadamente los excedentes de Alcoholes en los recipientes adecuados (Fenoles)

Reactivos y Reacción

Agua destilada: Agua a la que se le han eliminado iones e impurezas mediante destilación.

Isopropanol

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