El urocultivo es una prueba de laboratorio que tiene como finalidad detectar la presencia de microorganismos infecciosos, fundamentalmente bacteria u hongos

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Índice

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1…..............................................................................................introducción

2-3….......................................................................................examen cuantitativo (Método de conteo en placa o recuento de colonias) (Método de asa calibrada)

4-5…………………………………………………………………..examen cualitativo

6- 9……………………………………………………………………procedimiento

Introducción

La orina vesical normalmente no contiene microorganismos. Sin embargo, los primeros 10 a 15 ml de orina emitidos por personas normales de cualquier edad o sexo, siempre presentan bacterias, las que proceden de la flora corriente de la uretra anterior, prepucio, región vulvovaginal o de contaminación fecal.[pic 6]

La flora de estas localizaciones es variada y está constituida por estafilococos coagulaza positivo y negativos, estreptococos diversos, bacilos difteromorfos, enterobacterias, lactobacilos, micoplasmas, bacilos difteromorfos, enterobacterias y muchos otros microorganismos. 

En la presencia de esta flora influyen localización anatómica, sexo, edad, hábitos de higiene y factores patológicos propios del huésped. En la etiología de las infecciones urinarias predominan los bacilos gramnegativos. Los procesos agudos y crónicos son provocados por E. Coli y por especies de los géneros Enterobacter, Proteus, citrobacter, Ps. Aeruginosa y S. marcescens se  aísla en 80% de los casos. Ps.aeruginosa y S.marcescens se identifican en pacientes hospitalizados, muy debilitados o sometidos a instrumentación repetida. Con bastante menor frecuencia desempeña un papel causal Streptococcus faecalis y excepcionalmente los estafilococos.

El examen microbiológico de una muestra de orina se denomina como Urocultivo. Éste se ha de hacer desde un punto cuantitativo y cualitativo:

EXAMEN CUANTITATIVO:

Este estudio fue introducido por Kaas para evitar los riesgos del cateterismo y diferenciar bacteriuria verdadera de contaminación.

EXAMEN CUALITATIVO: 

Este examen conduce a la identificación del agente y se realiza mediante una siembra de la muestra homogeneizada.

EXAMEN CUANTITATIVO

Este examen se realiza de 2 maneras, por el método de conteo en placa o recuento de colonias y por el método del asa calibrada:

• método de conteo en placa o recuento de colonias:[pic 7]

Introducido por Kaas para evitar los riesgos del caterismo vesical y diferenciar bacteriuria de contaminación, esto se realiza de la siguiente manera:

1. Se homogeneíza la muestra mediante agitación
2. Se diluye la muestra 1:100, colocando 0.1 ml. De orina en 9.9ml. de caldo de tripticasa o de suero fisiológico (estériles)
3. Se deposita 1ml. De cada dilución en placas de petri (previamente esterilizadas), sobre las cuales se vacía un tubo de agar-tripticasa o medio CLED, fundidos y enfriados a 45*. mediante rotación suave, se favorece la distribución homogénea de la siembra
4. Se incuban todas las siembras a 37* durante 24 a 48 horas
5. Para calcular el muner4o de colonias se eligen placas que contengan entre 30 y 300 colonias. Contadas. Contadas esta, basta con multiplicar su número por la dilución para obtener la cuenta total.

Imagen sacada de:

http://slideplayer.es/slide/4152419/

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• Método de asa calibrada:

Esta estimación cuantitativa consiste en sembrar una placa con medio de agar-sangre o agar con CLED en una muestra de orina, sin centrifugar, empleando azada de platino calibrada (4mm. De diametro9. Después de incubar las siembras a 37* durante 24 a 48 horas, se cuenta el numero de colonias desarrolladas y el resultado se multiplica por 100, ya que la azada de platino contiene 0.01ml. De orina.[pic 9]

Los resultados dl estudio cuantitativo se informan de la siguiente manera:

1. No hubo desarrollo microbiano
2. Menos de 10,000 colonias por ml.
3. Entre 10,000 y 100,000 colonias por ml.
4. Más de 100,000 colonias por ml.

Cuando se obtienen dos recuentos sucesivos con más de 100,000 colonias por ml. La probabilidad de infección es de 80% cifra que se eleva a 95% si el mismo resultado se logra en 3 recuentos sucesivos.

Por lo general, las muestras tienden a mostrar cuentas inferiores a 10,000 colonias/ml. Cuando el recuento revela valores intermedios a 10,000 y 100,000 colonias/ml. El examen debe repetirse. Conviene advertir que pueden pasar inadvertidas infeccione urinarias verdaderas, si no se toma en cuenta cuentas inferiores a 100.000 colonias por ml., ya que existen diversos factores que pueden explicar recuentos bajos en infecciones crónica e infecciones por cocos grampositivos

Imagen sacada de:

http://microbiologia1234.blogspot.mx/2014/10/tipos-de-asa-y-su-uso.html

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Asa calibrada para tomar 0.0001 ml. De la muestra de orina para el examen de urocultivo

EXAMEN CUANTITATIVO

El estudio cualitativo conduce a la identificación del agente, se realiza mediante la siembra de la muestra homogeneizada, en placas con agar-sangre, agar-CLED, agar de Levine o MacConkey. Es recomendable el medio CLED, porque favorece el desarrollo de bacterias patógenas urinarias y permite la identificación de los microorganismos contaminados. Su contenido en cisteína y lactosa y su deficiencia en electrolitos facilitan, por una parte, el reconocimiento de colonias de bacterias y, por otra, inhiben el carácter invasor de las colonias de Proteus. Así se facilita la identificación de estafilococos, bacilos difteromorfos, lactobacilos y otros agentes que pueden contaminar la orinan.[pic 11]

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