Extraccion De Caseina

PROTOCOLO DE CASEINA.

PROCEDIMIENTO:

MATERIALES Y REACTIVOS

- 10 tubos de ensayo grandes

- Dos vasos de precipitados de 50ml

- Un vaso de precipitado de 250ml

- Probeta de 50ml

- Matraz aforado de 50 ml

- Pipeta graduada de 5,0 ml

- Pipeta graduada de 1,0 ml

- Pipeta graduada de 10,0 ml

- Embudo de vidrio mediano

- Papel de filtro

- Termómetro

- Reactivos por grupo:

- Agua destilada

- Acetato sódico 0,1 N

- Ácido acético 0,01 N

- Ácido acético 0,1 N

- Ácido acético 1,0 N

- Hidróxido de sodio 1,0 N

- Tetracloruro de carbono/ benceno

- Etanol al 70%

- Materiales y reactivos de uso general:

- Soluciones buffer pH 4,0 y 7,0 para calibrar el potenciómetro

- Potenciómetro (pH-metro)

- Leche desgrasada corriente (1 litro)

- DESARROLLO EXPERIMENTAL

1) Aislamiento de caseína:

- Calentar en un vaso de precipitado 150 ml de agua destilada hasta temperatura de 38ºC

- Añadir 50 ml de leche y luego gota a gota y con agitación, adicionar ácido acético 1N hasta que observe que se forma un precipitado (la leche se corta).

- Dejar sedimentar y filtrar sobre papel de filtro usando un embudo de vidrio/ cristal.

- Lavar el precipitado con 20ml de etanol en el mismo filtro.

- Secar el precipitado colocando varios pliegues de papel de filtro.

- Colocar el precipitado en un vaso de precipitado pequeño previamente pesado, volver a pesar el vaso con el precipitado y luego adicionar 5 ml/gr de tetracloruro de carbono o benceno.

- Filtrar nuevamente.

- El benceno debe ser guardado en un recipiente cerrado para que su desecho sea seguro, se debe entregar dicho líquido al docente a cargo (que será el encargado de desecharlo de manera correcta); en caso de usar tetracloruro de carbono desechar el mismo directamente.

- Se obtendrá un precipitado blanco de fácil manipulación que es la caseína.

2) Preparación de la solución de caseína:

- Pesar la caseína obtenida y volcarla en un vaso de precipitado de 50 ml.

- Agregar 20ml de agua destilada y 5 ml de NaOH 1N; agite hasta lograr una solución

total de la caseína.

- Una vez disuelta la caseína, verterla en un matraz aforado de 50 ml, adicionar 5 ml de

ácido acético 1N y diluir con agua destilada hasta 50ml y mezclar bien.

- La solución debe ser clara y limpia de no ser así, se debe volver a filtrar.

3) Determinación del Punto isoeléctrico de la caseína:

En diez tubos de ensayo (previamente limpios y secos) adicionar exactamente los volúmenes de los reactivos según la siguiente tabla:

TABLA DE DISOLUCIONES

TUBO Acetato 0,1

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