Informe Glicemia

• Introducción:

En este informe presentaremos los valores de absorvancia de las distintas soluciones preparadas durante el paso práctico con el fin de mediante la interpolación, obtener las concentraciones de glucosa de estas soluciones, posteriormente estos resultados serán discutidos y se analizaran los métodos para la determinación de la glucosa y otros azúcares.

Para la realización del experimento y el informe fue necesario conocer ciertos conceptos fundamentales tales como :

• Absorvancia: es “la cantidad de luz monocromática absorbida por las moléculas de una solución” y es un valor que está relacionado con la distancia que deben recorrer las partículas (o longitud), la longitud de onda que estas partículas pueden absorber (determinado por su estructura) y por la concentración de estas moléculas, que en este experimento es la única variable ya que tanto la distancia como la estrucutra molecular se mantienen constantes.

• Curva de calibración: curva de referencia construida con cantidades conocidas de una sustancia que sirve para determinar la concentración de esta sustancia en una solución desconocida a partir de la absorvancia registrada.

• Disoluciones seriadas: son soluciones creadas a partir de una solución de concentración estándar que es más alta que la de las soluciones que se quieren preparar, estas disoluciones se preparan en serie, es decir a partir de una de mayor concentración se van preparando las de menos concentradas. El volumen necesario de la solución 1 para preparar la solución 2 se encuentra por la fórmula: V1x C1 = V2x C2, partiendo por la solución estándar y repitiendo el paso para las de menor concentración.

• Glicemia: medida de la concentración de glucosa en el plasma sanguíneo, este valor varía dependiendo de la alimentación de la persona, para las personas en ayunas se establece un rango normal que va entre los 70 mg/dl y 100 mg/dl.

Durante la experimentación primero se prepararon soluciones 5 soluciones seriadas de glucosa partiendo de una solución de 500 uL de glucosa estándar (400 mg/dl). Después con estas se prepararon distintas soluciones en tubos eppendorfs:

• 5 tubos contenían 300 μL de un reactivo 1 y 3 μL de las 5 soluciones de glucosa preparadas anteriormente que tenían concentraciones de: 400, 200, 100, 50 y 25 mg/dl

• 1 tubo con 300 μL de R1 y 3 μL de suero fisiológico.

• 1 tubo con 300 μL de R1 con 3μL de una muestra “A”

• 1 tubo con 300 μL de R1 y 3 μL de una muestra “B”.

Posteriormente estos tubos fueron incubados y expuestos a las espectrofotometría para obtener los valores de absorvancia de cada una de las soluciones, los cuales se expondrán durante este informe.

• Objetivos:

• Aplicar los conocimientos adquiridos durante el práctico y en clases para lograr relacionar los resultados obtenidos con los valores normales de glicemia y también a su vez entender los métodos de medición de azúcares.

• Encontrar las concentraciones de glucosa de las soluciones preparadas a partir de su absorvancia interpolando estos valores en la curva de calibración concentración v/s absorvancia.

• Analizar los resultados de concentración obtenidos en relación al rango normal de glucosa de la sangre.

• Buscar los fundamentos de los distintos métodos utilizados para medir la concentración de azúcares, tanto del método usado como de otros existentes.

• Obtención y discusión de resultados:

3.1 Cálculos utilizados:

C1 x V1 = C2 x V2

a. 400 mg/dL x V1 = 200 mg/dL x 500μL

V1 = 250μL

b. 200 mg/dL x V2 = 100 mg/dL x 500μL

V2 = 250μL

c. 100 mg/dL x V3 = 50 mg/dL x 500μL

V3 = 250μL

...