Informe Laboratorio N°4 “Introducción de Material Vegetal (Semillas)”

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                  Informe Laboratorio N°4

“Introducción de Material Vegetal (Semillas)”

Profesor: Boris Chong Pérez

Fecha: 28/05/2018

Integrantes:

Esteban Ahumada

Miguel Farías

Patricio González

Introducción

La semilla es uno de los principales órganos reproductivos de la gran mayoría de las plantas terrestres y acuáticas, ya que esta desempeña una función fundamental en la renovación, persistencia y dispersión de las poblaciones de plantas, pudiendo ser almacenadas por largos periodos sin afectar su capacidad de germinación. Es por esto que la investigación de los mecanismos que están presentes en la germinación de las semillas ha sido fundamental para entender el papel reproductivo y el rol que juega en el contexto ecológico, en este caso la germinación de las semillas comprende tres etapas sucesivas que se superponen parcialmente: 

1. La absorción de agua por imbibición, causando su hinchamiento y la ruptura final de la testa.
2. El inicio de la actividad enzimática y del metabolismo respiratorio, translocación y asimilación de las reservas alimentarias en las regiones en crecimiento del embrión.
3. El crecimiento y la división celular que provoca la emergencia de la radícula y posteriormente de la plúmula. En la mayoría de las semillas el agua penetra inicialmente por el micrópilo y la primera manifestación de la germinación exitosa es la emergencia de la radícula.  

Es para esto que se necesitan ciertos requerimientos abióticos que son necesarios para este proceso que son; Agua, Oxigeno, Temperatura y Luz, ya que si alguno de estos no se encuentra presente en este proceso puede que no se realice de buena manera, así es como todas las especies necesitan de todos estos factores para lograr su germinación (Carlos Vázquez, 2018).

En el caso de una planta herbácea bianual como lo es la zanahoria, son vegetales que se caracterizan por producir raíces cilíndricas semilargas, con carne coloreada y dulce; pertenecientes a la familia Apiaceae con hojas cortadas y que se cultivan por sus raíces carnosas y dependiendo de su variedad son más largas o de cuerpos más redondos, siendo generalmente anaranjadas pero también tomando colores amarillos, blancos o morados. Además se caracterizan por ser ricas en caroteno los cuales funcionan como antioxidantes liposolubles, asimismo de que reduce las probabilidades de ataques cardíacos y aumenta la eficiencia del sistema inmune, como lo es en el caso de la Nantaise ameliorée 3.

Las Nantaise 3 son zanahorias que se caracterizan por ser alargadas con un crecimiento de entre los 14-18 centímetros y cilíndricas que son muy sabrosas y muy coloridas que por lo general se siembra entre marzo y abril en países con temperaturas más bajas, se cosecha después de 3-4 meses, crece a temperaturas de alrededor de los 15° Celsius y es ampliamente utilizada en muchas recetas por su sabor dulce, y mayoritariamente es usada rallada en sopas o como acompañamiento para carnes y pescados (Fleurs, 2018).

Objetivos:

• Comprender y evaluar los métodos de desinfección de semillas, para su establecimiento in vitro.
• Inducir la germinación de semillas de diferentes especies vegetales para la obtención de plántulas libres de hongos y bacterias.
• Comprender la importancia nutricional de los componentes de los medios de cultivo en la germinación de semillas, embriogénesis, organogénesis, etc.
• Familiarizar al operario con las técnicas de cultivo de vegetales in vitro.

Materiales

Biológico: Semillas de Zanahoria (Nantaise Ameliorée 3) Vilmorin.

Material de Laboratorio:

• Medios de cultivos preparados para la germinación in vitro de semillas
• Botellas con agua destilada estéril.
• Botellas con solución de hipoclorito de sodio al 2,5% estéril.
• Botellas con solución de sulfato de cobre al 2,5% estéril.
• Mangos de bisturí, pinzas y hojas estériles.
• Gorros, mascarilla y cubre calzado.
• Papel toalla (Nova).
• Etanol al 70%.
• Etanol de quemar.
• Mecheros.
• Cámara de flujo laminar.

Métodos

1. Se llevó al cuarto de siembra los materiales y medios de cultivos requeridos para realizar la siembra de semillas.
2. Se limpió  y desinfectó superficialmente la cámara de flujo laminar con etanol al 70%.  
3. Fue encendida la luz ultravioleta durante 25 minutos.  
4. Posterior a eso se realizo la desinfección de las semillas a sembrar, para lo cual se siguió el siguiente protocolo:  

Desinfección de semillas:  

• Se pusieron las semillas en frascos limpios
• Fueron lavadas con detergente (Quix) y agua corriente, posterior a eso se  enjuagaron varias veces.
• Se añadieron las semillas en los frascos estériles para realizar la primera fase de la desinfección.
• Se adiciono la solución de sulfato de cobre al 2,5%, y fue agitado durante 20 minutos.
• Se retiró con cuidado la solución de sulfato de cobre al 2,5% y se realizaron 3 enjuagues con agua destilada estéril por 6 minutos.
• Luego se adiciono la solución de hipoclorito de sodio al 2,5 y una agitación de 15 minutos.
• Se retiró con cuidado la solución de hipoclorito de sodio al 2,5% y se realizaron 3 enjuagues con agua destilada estéril durante 6 minutos cada uno.  
• Posterior a eso se realizo la siembra.
• Una vez concluido se rotularon los frascos y fueron llevados al cuarto de incubación.
• Finalmente se realizo una vez por semana la evaluación de los niveles de contaminación y momento de la germinación y comportamiento de esta.

Resultados

Se sembraron 24 frascos con 6-8 semillas aprox. /frasco.

Al cabo de una semana después de la siembra, no se observo germinación de ninguna semilla en ningún frasco.

Al cabo de dos semanas después de la siembra, se observo un leve cambio en las semillas en ciertos frascos.

A los 16 días aprox. se observaron ciertas semillas germinadas, pero no en los mismos frascos.

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